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PMWS多病原混合感染的檢測(cè)及PCV2重組桿狀病毒培養(yǎng)的優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2024-02-04 06:46
  斷奶仔豬多系統(tǒng)障礙綜合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome, PMWS)自1991年在加拿大被首次報(bào)道以來(lái),已經(jīng)在全世界許多國(guó)家蔓延,給養(yǎng)豬行業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus Ⅱ, PCV2)是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動(dòng)物DNA圓環(huán)病毒,它與一系列的豬的疾病有關(guān),被認(rèn)為是斷奶仔豬繁殖障礙綜合征的主要病原,其混合感染的其他病原還有豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV)、豬輸血傳播病毒(PTTV)、以及豬細(xì)小病毒(PPV)等。如何及時(shí)的了解病毒的基因分布,流行趨勢(shì)等是有效針對(duì)病情進(jìn)行預(yù)防的手段。同時(shí),本實(shí)驗(yàn)室對(duì)近年來(lái)在我國(guó)流行的PCV2基因進(jìn)行分析,取其共有序列(Consensus sequence),通過(guò)密碼子優(yōu)化,提高表達(dá)量,克服了PCV2疫苗交叉保護(hù)性較低,在細(xì)胞上增殖滴度較低,不利于生產(chǎn),等難題。將該段序列用桿狀病毒載體表達(dá)系統(tǒng)表達(dá),需要通過(guò)改善昆蟲(chóng)細(xì)胞的培養(yǎng)條件來(lái)提高病毒的表達(dá)量。本研究主要分為三個(gè)部分,主要是對(duì)出現(xiàn)臨床癥狀的病豬和健康豬采樣并對(duì)相關(guān)病原進(jìn)行檢測(cè),從PCV2的分子流行病學(xué)角度出發(fā),觀測(cè)目標(biāo)...

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1?PCV2和PCVl基因組編碼??Fig?1-1?the?gene?encodes?of?PCV2?and?PCVl??

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的總長(zhǎng)度決定了大部分閱讀框都有部分重疊W。Hamel等用軟件對(duì)PCV的基因組進(jìn)??行了分析,發(fā)現(xiàn)理論上兩種血清型都有可能含有11個(gè)開(kāi)放閱讀框[is]。目前得到證實(shí)??的閱讀框分別是0RF1、0RF2、0RF3?(圖1-1)?[12】。??f?\f?||??圖1-1?PCV2和PC....


圖2.1-1?PRRSV臨床樣品檢測(cè)圖??Fig?2.1-1?Clinic?sample?detection?of?PRRSV??

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?第二篇研究報(bào)告第一章PMWS相關(guān)病原的流行病學(xué)調(diào)查???2結(jié)果??2.1PCR擴(kuò)增結(jié)果??用上述PC民方法對(duì)徐州、啟動(dòng)、泰州等地區(qū)的834份組織樣品進(jìn)行PRRSV、TTV1、??TTV2、PPV、PCV2的部分片段的擴(kuò)增,電泳結(jié)果見(jiàn)圖??


圖2.1-2?TTVl臨床樣品檢測(cè)圖??Fig?2.1-2?Clinic?sample?detection?ofTTVl??

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圖2.1-3?TTV2臨床樣品檢測(cè)圖??Fig?2.1-3.?Clinic?sample?detection?ofTTV2??

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?750—4——774bp??圖2.M?PPV臨床樣品檢測(cè)圖??Fig?2.1-4?Clinic?sample?detection?of?PPV??1:陽(yáng)



本文編號(hào):3895393

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