流行性感冒(Influenza)是由流感病毒(Influenza virus)引起的一種人畜共患的呼吸道傳染病。流感病毒分為A型、B型和C型,其中A型(甲型)流感病毒最為常見。A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是一種分節(jié)段的單股負鏈RNA病毒,它的每個基因片段分別編碼不同的蛋白。流感病毒具有高度傳染性,能在短時間內(nèi)迅速蔓延,嚴重危害人類健康,引起嚴重的公共衛(wèi)生安全。巨噬細胞是抗感染免疫中起關鍵作用的多功能免疫細胞,廣泛存在于多種組織中,主要參與病原體識別、清除、抗原加工和呈遞、炎癥和組織修復以及免疫調(diào)節(jié)等功能。另一方面,巨噬細胞也是一些病毒直接攻擊的靶標細胞,它可以被某些病毒調(diào)節(jié)和利用,并作為病毒復制增殖、儲存及運輸?shù)娜萜骱洼d體,從而有利于病毒感染的建立、傳播及長期在組織內(nèi)持久存在。因此,巨噬細胞是研究病毒感染與宿主細胞免疫反應機制的重要工具和模型,然而關于穩(wěn)定的流感病毒巨噬細胞直接感染的模型還未有報導。本研究的主要目標是探究巨噬細胞在抗流感病毒感染中的作用及其介導的機制,本研究構(gòu)建了流感病毒小鼠巨噬細胞感染模型,為研究流感病毒免疫逃逸、調(diào)控宿主細胞免疫反應機制...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻綜述
    1 流行性感冒及流行性感冒病毒
        1.1 概述
        1.2 流感病毒基因組編碼的蛋白及其功能
        1.3 流感病毒的感染機制與免疫逃逸機制
    2 先天性免疫和獲得性免疫
    3 巨噬細胞功能及調(diào)控病毒感染作用
        3.1 巨噬細胞免疫學功能
        3.2 巨噬細胞調(diào)控病毒感染作用
    4 TLRs信號通路與病毒感染調(diào)控
        4.1 Toll樣受體
        4.2 TLR4介導的抗病毒免疫
    5 研究目的及意義
第二部分 試驗研究
    第一章 流感病毒H1N1巨噬細胞感染模型的建立
        1 實驗材料與儀器設備
            1.1 實驗試劑
            1.2 實驗儀器
            1.3 實驗材料、細胞及試劑配制
        2 實驗方法
            2.1 流感病毒PR8毒株的培養(yǎng)與鑒定
            2.2 小鼠組織與腹腔細胞中流感病毒抗原表達的檢測
            2.3 流感病毒在BMM細胞中的蛋白表達檢測
            2.4 流感病毒mRNA在 BMM細胞中的表達檢測
            2.5 流感病毒在BMM細胞中的復制動力學研究
            2.6 LPS刺激對流感病毒在BMM細胞中的復制的影響
            2.7 shTLR4 對流感病毒在BMM細胞中的復制的影響
        3 實驗結(jié)果
            3.1 流感病毒在感染小鼠中的抗原表達分析
            3.2 流感病毒在BMM細胞中的蛋白表達分析
            3.3 流感病毒在BMM細胞中的m RNA表達分析
            3.4 流感病毒在BMM細胞中的復制動力學研究
            3.5 LPS刺激對流感病毒復制的影響
            3.6 shRNA干擾效果鑒定
            3.7 shTLR4對流感病毒復制的影響
        4 討論
    第二章 BMM細胞中與流感病毒NP蛋白互作的蛋白鑒定
        1 實驗儀器與試劑
            1.1 實驗試劑
            1.2 實驗儀器
            1.3 實驗材料、細胞及試劑配制
        2 實驗方法
            2.1 免疫沉淀
            2.2 Western blot檢測
            2.3 質(zhì)譜鑒定
        3 實驗結(jié)果
            3.1 IP免疫印跡結(jié)果
            3.2 蛋白質(zhì)譜結(jié)果分析
        4 討論
全文總結(jié)
參考文獻
附錄
個人簡介
致謝



本文編號：3889473