流行性感冒(Influenza)是由流感病毒(Influenza virus)引起的一種人畜共患的呼吸道傳染病。流感病毒分為A型、B型和C型,其中A型(甲型)流感病毒最為常見(jiàn)。A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是一種分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒,它的每個(gè)基因片段分別編碼不同的蛋白。流感病毒具有高度傳染性,能在短時(shí)間內(nèi)迅速蔓延,嚴(yán)重危害人類(lèi)健康,引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生安全。巨噬細(xì)胞是抗感染免疫中起關(guān)鍵作用的多功能免疫細(xì)胞,廣泛存在于多種組織中,主要參與病原體識(shí)別、清除、抗原加工和呈遞、炎癥和組織修復(fù)以及免疫調(diào)節(jié)等功能。另一方面,巨噬細(xì)胞也是一些病毒直接攻擊的靶標(biāo)細(xì)胞,它可以被某些病毒調(diào)節(jié)和利用,并作為病毒復(fù)制增殖、儲(chǔ)存及運(yùn)輸?shù)娜萜骱洼d體,從而有利于病毒感染的建立、傳播及長(zhǎng)期在組織內(nèi)持久存在。因此,巨噬細(xì)胞是研究病毒感染與宿主細(xì)胞免疫反應(yīng)機(jī)制的重要工具和模型,然而關(guān)于穩(wěn)定的流感病毒巨噬細(xì)胞直接感染的模型還未有報(bào)導(dǎo)。本研究的主要目標(biāo)是探究巨噬細(xì)胞在抗流感病毒感染中的作用及其介導(dǎo)的機(jī)制,本研究構(gòu)建了流感病毒小鼠巨噬細(xì)胞感染模型,為研究流感病毒免疫逃逸、調(diào)控宿主細(xì)胞免疫反應(yīng)機(jī)制...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 流行性感冒及流行性感冒病毒
        1.1 概述
        1.2 流感病毒基因組編碼的蛋白及其功能
        1.3 流感病毒的感染機(jī)制與免疫逃逸機(jī)制
    2 先天性免疫和獲得性免疫
    3 巨噬細(xì)胞功能及調(diào)控病毒感染作用
        3.1 巨噬細(xì)胞免疫學(xué)功能
        3.2 巨噬細(xì)胞調(diào)控病毒感染作用
    4 TLRs信號(hào)通路與病毒感染調(diào)控
        4.1 Toll樣受體
        4.2 TLR4介導(dǎo)的抗病毒免疫
    5 研究目的及意義
第二部分 試驗(yàn)研究
    第一章 流感病毒H1N1巨噬細(xì)胞感染模型的建立
        1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
            1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.3 實(shí)驗(yàn)材料、細(xì)胞及試劑配制
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 流感病毒PR8毒株的培養(yǎng)與鑒定
            2.2 小鼠組織與腹腔細(xì)胞中流感病毒抗原表達(dá)的檢測(cè)
            2.3 流感病毒在BMM細(xì)胞中的蛋白表達(dá)檢測(cè)
            2.4 流感病毒mRNA在 BMM細(xì)胞中的表達(dá)檢測(cè)
            2.5 流感病毒在BMM細(xì)胞中的復(fù)制動(dòng)力學(xué)研究
            2.6 LPS刺激對(duì)流感病毒在BMM細(xì)胞中的復(fù)制的影響
            2.7 shTLR4 對(duì)流感病毒在BMM細(xì)胞中的復(fù)制的影響
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 流感病毒在感染小鼠中的抗原表達(dá)分析
            3.2 流感病毒在BMM細(xì)胞中的蛋白表達(dá)分析
            3.3 流感病毒在BMM細(xì)胞中的m RNA表達(dá)分析
            3.4 流感病毒在BMM細(xì)胞中的復(fù)制動(dòng)力學(xué)研究
            3.5 LPS刺激對(duì)流感病毒復(fù)制的影響
            3.6 shRNA干擾效果鑒定
            3.7 shTLR4對(duì)流感病毒復(fù)制的影響
        4 討論
    第二章 BMM細(xì)胞中與流感病毒NP蛋白互作的蛋白鑒定
        1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
            1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.3 實(shí)驗(yàn)材料、細(xì)胞及試劑配制
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 免疫沉淀
            2.2 Western blot檢測(cè)
            2.3 質(zhì)譜鑒定
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 IP免疫印跡結(jié)果
            3.2 蛋白質(zhì)譜結(jié)果分析
        4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3889473