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牛多殺性巴氏桿菌分離鑒定及應(yīng)用噬菌體展示技術(shù)篩選TbpA蛋白抗原表位

發(fā)布時(shí)間:2024-01-27 11:34
  多殺性巴氏桿菌是動(dòng)物機(jī)體上呼吸道和眼部黏膜的常在菌群,當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激或其他呼吸性病原體感染時(shí),常發(fā)生內(nèi)源性感染。牛巴氏桿菌病多發(fā)于運(yùn)輸應(yīng)激的牛群或者犢牛群中,F(xiàn)有的牛出敗滅活疫苗免疫原是莢膜血清型B型的多殺性巴氏桿菌,然而大量的研究表明A型多殺性巴氏桿菌引起的牛呼吸道感染較為普遍,不同莢膜血清型間的交叉保護(hù)效果并不理想。本研究從黑龍江省兩個(gè)規(guī);膛(chǎng)發(fā)生嚴(yán)重呼吸道感染的病死牛肺臟和患病牛鼻拭子中分離鑒定致病菌,篩選多殺性巴氏桿菌轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合蛋白TbpA的抗原表位,對(duì)于研制高效疫苗防治該病具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。首先,無(wú)菌采集病死牛的肺臟和患病牛鼻拭子,進(jìn)行病原分離培養(yǎng)、染色鏡檢及生化試驗(yàn)、細(xì)菌16S rDNA及OmpH基因PCR鑒定,應(yīng)用PCR方法確定分離株的莢膜血清型和毒力因子。結(jié)果表明,兩個(gè)分離株WC16551、LY01均為莢膜血清型A型多殺性巴氏桿菌,藥敏試驗(yàn)顯示對(duì)恩諾沙星、環(huán)丙沙星高度敏感。檢測(cè)22種毒力因子,兩株菌均攜帶19種毒力因子(oma87、fimA、ompA、tonB、exbD、Fur、hgbA、sodC、PmHAS、TbpA、hsf-2、hsf-1、PfhA、ptfA...

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【學(xué)位級(jí)別】:碩士

圖2-2多殺性巴氏桿菌革蘭氏染色Fig.2-2GramstainingofPasteuellamultocida

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圖2-1多殺性巴氏桿菌接種血平板Fig.2-1Pasteuellamultocidawasinoculatedontobloodagar

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圖2-3.分離株16SrDNA與OmpH基因的擴(kuò)增結(jié)果

圖2-3.分離株16SrDNA與OmpH基因的擴(kuò)增結(jié)果


圖2-4分離菌株分型結(jié)果

圖2-4分離菌株分型結(jié)果



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