犬細(xì)小病毒的分離鑒定及VP2基因的原核表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2024-01-26 21:15
犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒(canine parvovirus,CPV)引起犬的一種高度接觸性的烈性傳染病,臨床上主要表現(xiàn)為腸炎型和心肌炎型。該病廣泛分布于世界各地,近年來,病發(fā)率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì),給養(yǎng)犬業(yè)帶來了極大經(jīng)濟(jì)損失。VP2蛋白是CPV的主要結(jié)構(gòu)蛋白,也是CPV的主要抗原決定簇。本研究從1只患有犬細(xì)小病毒病的病犬糞便中分離出1株CPV,對(duì)其進(jìn)行鑒定和VP2基因的原核表達(dá)。根據(jù)GenBank公布的CPV基因序列設(shè)計(jì)1對(duì)用于鑒定CPV引物,目的片段大小為1755 bp;參考文獻(xiàn)設(shè)計(jì)鑒別犬冠狀病毒(CCV)、犬瘟熱病毒(CDV)、犬副流感病毒(CPIV)的引物用于檢測(cè)患病犬是否感染其他病毒;通過免疫熒光試驗(yàn)測(cè)定其半數(shù)細(xì)胞感染數(shù)量(TCID50)。結(jié)果顯示用于鑒定CPV的引物擴(kuò)增出的基因片段與預(yù)期大小相符;將目的基因與GenBank中收錄的CPV-VP2基因進(jìn)行遺傳性與進(jìn)化性分析,表明此基因與新CPV-2a型毒株GQ379042.1同源性最高,由此確定該株分離病毒為CPV,且為新2a亞型;其他病毒檢測(cè)結(jié)果表明CCV、CDV、CPIV均為陰性;盲傳5代時(shí)其TCID50為104.0/mL...
【文章頁數(shù)】:42 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
本文編號(hào):3885704
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圖2-2?PCR檢測(cè)結(jié)果??M:?DL2000DNAMarker;?1:細(xì)胞樣品;2:陰性對(duì)照??-
圖2一l細(xì)腦病變F館2一1Tb已CPEofCRFK
圖2一5外源病匆檢測(cè)結(jié)果
圖2石CPV感染C燈K
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