由兔出血癥病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus. RHDV)引起的兔病毒性出血癥是一種導(dǎo)致兔大量死亡的烈性傳染病,給國內(nèi)外養(yǎng)兔業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。RHDV其基因組為一條單股正鏈的RNA分子,目前關(guān)于該病毒的翻譯機(jī)制仍不清楚。我們實(shí)驗(yàn)室的前期研究結(jié)果提示,RHDV基因組的5’端非編碼區(qū)很短,不能形成IRES元件,它不可能采用類似小RNA病毒一樣的翻譯起始機(jī)制,雖然其基因組5’末端偶聯(lián)一個(gè)小分子的Vpg蛋白,但是我們前期試驗(yàn)證實(shí)該蛋白并不是RHDV起始蛋白翻譯所必須的,也就是說它不具備帽子結(jié)構(gòu)類似物的功能。這些研究結(jié)果都提示RHDV可能采用了一種新的翻譯起始機(jī)制。為此,我們開展NSP1蛋白及其編碼序列與病毒蛋白翻譯之間關(guān)系的研究,以期能為揭開RHDV的翻譯機(jī)制提供有價(jià)值的參考信息。 首先,我們克隆并將NSP1的編碼序列插入原核表達(dá)載體pGEX-4T-1中,獲得重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-NSP1,該重組質(zhì)�？稍贐L21菌株中以包涵體形式高效表達(dá),利用包涵體粗純技術(shù)獲得了高純度的重組蛋白GST-NSP1來免疫實(shí)驗(yàn)兔,制備了具有高度特異性的多克隆抗體,為研究NS...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

本文編號(hào)：3882095