日本乙型腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)屬于黃病毒科黃病毒屬,感染該病毒后引起的乙型腦炎是一種重要的蚊媒性、急性自然疫源性、人畜共患傳染性疾病,人和多種動(dòng)物易感。該病主要在南亞、東南亞和東亞一帶流行,但近年來(lái),有不斷擴(kuò)展的趨勢(shì)。當(dāng)前對(duì)于乙型腦炎的防制主要依靠疫苗接種,迄今為止,仍無(wú)針對(duì)性療法,也沒(méi)有特異性治療的藥物。日本乙型腦炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3(non-structural protein 3,NS3)是一種多功能蛋白,N端具蛋白酶功能,C端由440個(gè)氨基酸編碼解旋酶(helicase)。該酶具有3個(gè)活性位點(diǎn),分別是核苷三磷酸酶活性(NTPase),底物核酸結(jié)合活性和雙鏈底物解旋活性。其利用NTP水解釋放的能量來(lái)解旋病毒復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生的雙鏈中間體,是病毒復(fù)制所必需的。另外,該酶與人類(lèi)解旋酶的同源性很低,因而成為近年來(lái)很有潛力的抗病毒藥物靶標(biāo)之一。本研究成功表達(dá)并純化了JEV NS3解旋酶的可溶性蛋白,分別通過(guò)化學(xué)發(fā)光和熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)建立了ATPase活性和解旋活性的檢測(cè)方法,并優(yōu)化了酶反應(yīng)的條件。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步建立了針對(duì)解旋活...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

本文編號(hào)：3879203