利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)制備KRTAP13-1基因敲除絨山羊
發(fā)布時間:2023-12-17 13:08
內(nèi)蒙古白絨山羊是產(chǎn)絨量和絨纖維品質(zhì)都位居世界前列的山羊品種,其絨產(chǎn)量約占中國的一半以上,占世界羊絨產(chǎn)量的1/3。山羊絨作為內(nèi)蒙古白絨山羊最重要的經(jīng)濟組成部分,是一類稀缺珍貴的動物資源,在國際上享有盛譽。但由于國際羊絨市場需求量大,各產(chǎn)區(qū)紛紛以提高產(chǎn)量為目的進行雜交擴繁,導(dǎo)致羊絨品質(zhì)急速下降,使種質(zhì)資源被嚴(yán)重破壞。傳統(tǒng)生物學(xué)育種也面臨著優(yōu)良種系存欄少、繁育周期長等問題,而基因編輯技術(shù)的應(yīng)用為大動物育種提供了新的方向。角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白(keratin-associated protein,KAP)是角蛋白的重要組成成分,對毛發(fā)等皮膚衍生物的形成和結(jié)構(gòu)有著重要影響。研究發(fā)現(xiàn)KAP13-1的調(diào)控基因角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白基因(keratin-associated protein,KRTAP)13-1參與了毛囊的早期發(fā)育,并對絨毛纖維直徑產(chǎn)生影響。本實驗利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)制備KRTAP13-1基因敲除絨山羊,探究KRTAP13-1基因?qū)τ诿野l(fā)育和纖維直徑的影響,為培育超細(xì)絨型絨山羊育種新材料提供理論依據(jù)和研究基礎(chǔ)。1、載體構(gòu)建在KRTAP13-1基因的編碼序列(Coding sequence...
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻綜述 CRISPR/Cas系統(tǒng)簡述
1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的研究歷程
2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的功能
2.1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的獲得性免疫功能
2.2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的基因編輯功能
3 CRISPR/Cas系統(tǒng)的分類與作用
4 CRISPR/Cas系統(tǒng)的應(yīng)用
4.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用
4.2 CRISPR/Cas13系統(tǒng)的應(yīng)用
5 CRISPR/Cas系統(tǒng)的安全問題
6 結(jié)語
第二章 研究論文
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
3 結(jié)果
3.1 Cas9/gRNA共載體的構(gòu)建與檢測
3.2 單克隆細(xì)胞系的篩選與鑒定
3.3 KRTAP13-基因敲除絨山羊的制備
4 討論
4.1 gRNA載體的設(shè)計與構(gòu)建
4.2 單克隆細(xì)胞的篩選
4.3 KRTAP13-1基因敲除絨山羊的制備
結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3873937
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻綜述 CRISPR/Cas系統(tǒng)簡述
1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的研究歷程
2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的功能
2.1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的獲得性免疫功能
2.2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的基因編輯功能
3 CRISPR/Cas系統(tǒng)的分類與作用
4 CRISPR/Cas系統(tǒng)的應(yīng)用
4.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用
4.2 CRISPR/Cas13系統(tǒng)的應(yīng)用
5 CRISPR/Cas系統(tǒng)的安全問題
6 結(jié)語
第二章 研究論文
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
3 結(jié)果
3.1 Cas9/gRNA共載體的構(gòu)建與檢測
3.2 單克隆細(xì)胞系的篩選與鑒定
3.3 KRTAP13-基因敲除絨山羊的制備
4 討論
4.1 gRNA載體的設(shè)計與構(gòu)建
4.2 單克隆細(xì)胞的篩選
4.3 KRTAP13-1基因敲除絨山羊的制備
結(jié)論
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