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利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)制備KRTAP13-1基因敲除絨山羊

發(fā)布時(shí)間:2023-12-17 13:08
  內(nèi)蒙古白絨山羊是產(chǎn)絨量和絨纖維品質(zhì)都位居世界前列的山羊品種,其絨產(chǎn)量約占中國(guó)的一半以上,占世界羊絨產(chǎn)量的1/3。山羊絨作為內(nèi)蒙古白絨山羊最重要的經(jīng)濟(jì)組成部分,是一類(lèi)稀缺珍貴的動(dòng)物資源,在國(guó)際上享有盛譽(yù)。但由于國(guó)際羊絨市場(chǎng)需求量大,各產(chǎn)區(qū)紛紛以提高產(chǎn)量為目的進(jìn)行雜交擴(kuò)繁,導(dǎo)致羊絨品質(zhì)急速下降,使種質(zhì)資源被嚴(yán)重破壞。傳統(tǒng)生物學(xué)育種也面臨著優(yōu)良種系存欄少、繁育周期長(zhǎng)等問(wèn)題,而基因編輯技術(shù)的應(yīng)用為大動(dòng)物育種提供了新的方向。角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白(keratin-associated protein,KAP)是角蛋白的重要組成成分,對(duì)毛發(fā)等皮膚衍生物的形成和結(jié)構(gòu)有著重要影響。研究發(fā)現(xiàn)KAP13-1的調(diào)控基因角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白基因(keratin-associated protein,KRTAP)13-1參與了毛囊的早期發(fā)育,并對(duì)絨毛纖維直徑產(chǎn)生影響。本實(shí)驗(yàn)利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)制備KRTAP13-1基因敲除絨山羊,探究KRTAP13-1基因?qū)τ诿野l(fā)育和纖維直徑的影響,為培育超細(xì)絨型絨山羊育種新材料提供理論依據(jù)和研究基礎(chǔ)。1、載體構(gòu)建在KRTAP13-1基因的編碼序列(Coding sequence...

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述 CRISPR/Cas系統(tǒng)簡(jiǎn)述
    1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的研究歷程
    2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的功能
        2.1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的獲得性免疫功能
        2.2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的基因編輯功能
    3 CRISPR/Cas系統(tǒng)的分類(lèi)與作用
    4 CRISPR/Cas系統(tǒng)的應(yīng)用
        4.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用
        4.2 CRISPR/Cas13系統(tǒng)的應(yīng)用
    5 CRISPR/Cas系統(tǒng)的安全問(wèn)題
    6 結(jié)語(yǔ)
第二章 研究論文
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結(jié)果
        3.1 Cas9/gRNA共載體的構(gòu)建與檢測(cè)
        3.2 單克隆細(xì)胞系的篩選與鑒定
        3.3 KRTAP13-基因敲除絨山羊的制備
    4 討論
        4.1 gRNA載體的設(shè)計(jì)與構(gòu)建
        4.2 單克隆細(xì)胞的篩選
        4.3 KRTAP13-1基因敲除絨山羊的制備
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào):3873937

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