Wnt/β-catenin通路參與機體許多重要生理活動,包括細胞命運決定、胚胎早期發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、生殖系統(tǒng)發(fā)育以及腫瘤發(fā)生等,在卵泡發(fā)育、顆粒細胞生長和卵母細胞成熟過程中扮演至關(guān)重要的角色。卵巢顆粒細胞的增殖、凋亡以及類固醇激素的分泌依賴于Wnt/β-catenin通路的調(diào)控。褪黑素(Melatonin)作為一種重要的吲哚胺類激素,在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、卵巢卵泡發(fā)育和抗腫瘤中體現(xiàn)出色功能。褪黑素在卵巢顆粒細胞的發(fā)育中扮演重要的調(diào)控作用。越來越多的研究結(jié)果證實Wnt/β-catenin通路參與了褪黑素在機體多個重要生理活動中的調(diào)節(jié),但是否參與了褪黑素對卵巢顆粒細胞發(fā)育的調(diào)控仍需研究證實。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)通路參與了細胞命運決定,調(diào)控高等生物神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和卵巢發(fā)育等重要生長發(fā)育活動,同時也與一些人類疾病,包括糖尿病、阿爾茨海默病甚至癌癥等緊密關(guān)聯(lián)。Wnt/β-catenin通路與PI3K/Akt通路在腫瘤形成和許多其它生理活動中的互作被越來越多的研究結(jié)果證實,但目前尚無文獻報道Wnt/β-catenin通路與PI3K/...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
文獻綜述
    第一章 Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進展
        1.1 Wnt/β-catenin通路組成
        1.2 Wnt/β-catenin通路與卵巢發(fā)育
        1.3 Wnt/β-catenin通路與褪黑素對神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用
        1.4 Wnt/β-catenin通路與PI3K/Akt通路互作
    第二章 褪黑素研究進展
        2.1 褪黑素受體
        2.2 褪黑素抗氧化功能
            2.2.1 以電子供體的形式與自由基直接結(jié)合達到清除自由基的作用
            2.2.2 調(diào)控抗氧化酶類活性及表達
        2.3 褪黑素對卵巢發(fā)育的影響
        2.4 褪黑素與卵母細胞成熟及胚胎發(fā)育
    第三章 PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進展
        3.1 PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路構(gòu)成
        3.2 PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對卵巢、卵母細胞發(fā)育的影響
        3.3 PI3K信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與卵巢腫瘤
        3.4 本研究目的與意義
試驗研究
    第四章 Wnt/β-catenin通路對豬卵巢顆粒細胞增殖、凋亡的影響
        4.1 前言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 主要儀器
            4.2.2 主要試驗試劑
            4.2.3 豬卵巢采集和運送
            4.2.4 豬卵巢細胞收集和體外培養(yǎng)
            4.2.5 豬卵巢顆粒細胞的鑒定
            4.2.6 豬卵巢顆粒細胞增殖活力檢測
            4.2.7 RNA提取與qRT-PCR
            4.2.8 豬卵巢顆粒細胞蛋白提取與免疫印跡
            4.2.9 統(tǒng)計分析
        4.3 試驗結(jié)果與分析
            4.3.1 豬卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)與細胞鑒定
            4.3.2 IWR-1-endo降低豬卵巢顆粒細胞增殖活力
            4.3.3 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路調(diào)控豬卵巢顆粒細胞周期基因表達
            4.3.4 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路誘導(dǎo)豬卵巢顆粒凋亡相關(guān)基因表達
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 Wnt通路對豬卵巢顆粒細胞類固醇激素合成和性腺激素受體相關(guān)基因表達的影響
        5.1 前言
        5.2 材料與方法
            5.2.1 主要儀器
            5.2.2 主要試驗試劑
            5.2.3 豬卵巢采集和運送
            5.2.4 豬卵巢顆粒細胞收集和體外培養(yǎng)
            5.2.4 RNA提取與qRT-PCR
            5.2.5 豬卵巢顆粒細胞蛋白提取及WesternBlot
            5.2.6 統(tǒng)計分析
        5.3 試驗結(jié)果與分析
            5.3.1 無FSH培養(yǎng)體系中IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路
            5.3.2 FSH影響Wnt/β-catenin通路對CYP19A1和StAR基因的調(diào)控
            5.3.3 FSH影響Wnt/β-catenin通路對性腺激素受體基因和CCND2基因的調(diào)控
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
    第六章 褪黑素通過Wnt/β-catenin通路調(diào)控豬卵巢顆粒細胞增殖、凋亡和類固醇激素生成
        6.1 前言
        6.2 材料與方法
            6.2.1 主要儀器
            6.2.2 主要試驗試劑
            6.2.3 豬卵巢采集和運送
            6.2.4 豬卵巢顆粒細胞收集和體外培養(yǎng)
            6.2.5 豬卵巢顆粒細胞增殖活力檢測
            6.2.6 RNA提取與qRT-PCR
            6.2.7 豬卵巢顆粒細胞蛋白提取與WesternBlot
            6.2.8 統(tǒng)計分析
        6.3 試驗結(jié)果與分析
            6.3.1 不同濃度褪黑素對豬卵巢顆粒細胞增殖活力的影響
            6.3.2 褪黑素對Wnt/β-catenin通路的影響
            6.3.3 褪黑素調(diào)控豬卵巢顆粒細胞細胞周期和細胞凋亡
            6.3.4 褪黑素調(diào)控豬卵巢顆粒細胞類固醇激素合成相關(guān)基因表達
        6.4 討論
        6.5 小結(jié)
    第七章 抑制PI3K通路對Wnt/β-catenin通路的影響
        7.1 前言
        7.2 材料與方法
            7.2.1 主要儀器
            7.2.2 主要試劑
            7.2.3 豬卵巢采集和運送
            7.2.4 豬卵巢顆粒細胞收集和體外培養(yǎng)
            7.2.5 豬卵巢顆粒細胞增殖活力檢測
            7.2.6 RNA提取與qRT-PCR
            7.2.7 豬卵巢顆粒細胞蛋白質(zhì)提取與WesternBlot
            7.2.8 統(tǒng)計分析
        7.3 試驗結(jié)果與分析
            7.3.1 不同濃度Wortmannin對豬卵巢顆粒細胞增殖活力的影響
            7.3.2 不同濃度Wortmannin對豬卵巢顆粒細胞Wnt/β-catenin通路的影響
            7.3.3 Wortmannin處理豬卵巢顆粒細胞下調(diào)CYP19A1和CYP11A1基因表達
            7.3.4 Wortmannin處理豬卵巢顆粒細胞調(diào)控性腺激素受體和凋亡相關(guān)基因的表達.
        7.4 討論
        7.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄一
附錄二
附錄三
致謝
作者簡介



本文編號：3872058