本研究包括三個部分：1、日糧精料水平對山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡和自噬的影響；2、饑餓對山羊瘤胃上皮細(xì)胞自噬和凋亡的影響；3、體外研究pH和SCFA對原代培養(yǎng)山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡和自噬的影響。1日糧精料水平對山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡和自噬的影響將15只裝有永久性瘤胃瘺管的青年雜交山羊(波爾山羊×淮南羊)分為精料組(HC組,n=9)和粗料組(HF組,n=6),單圈飼養(yǎng),自由飲水,兩組山羊每天飼喂兩次,時間點(diǎn)分別是8：00和17：00,飼喂80天后采樣。山羊屠宰后檢測表明, HC組山羊終體重、瘤胃干重、5×5cm。瘤胃上皮重均顯著高于HF組(P<0.05)；HC組山羊瘤胃液pH顯著低于HF組(P<0.01)；運(yùn)用氣相色譜方法檢測瘤胃液SCFA,結(jié)果顯示HC組山羊瘤胃液中,TSCFA、乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、正戊酸及異戊酸的濃度均顯著高與HF組(P<0.01)；Real-time Q-PCR方法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)基因p53、Bcl-2、 Bax、Caspase3 及 Caspase9的表達(dá),結(jié)果顯示HC組山羊瘤胃上皮p53、Bcl-2、Bax、 Caspase3和Caspase96的...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
本文部分縮寫的中英文對照
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 瘤胃上皮
        1 瘤胃上皮的結(jié)構(gòu)
            1.1 瘤胃上皮的解剖學(xué)特點(diǎn)
            1.2 瘤胃上皮的細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)
        2 瘤胃上皮的生長發(fā)育
        3 日糧結(jié)構(gòu)對瘤胃的影響
        參考文獻(xiàn)
    第二章 細(xì)胞凋亡
        1 細(xì)胞凋亡的概況
        2 細(xì)胞凋亡的發(fā)生過程和分子機(jī)制
            2.1 細(xì)胞凋亡的發(fā)生過程
            2.2 細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制
        3 細(xì)胞凋亡的生理學(xué)特點(diǎn)
        參考文獻(xiàn)
    第三章 細(xì)胞自噬
        1 細(xì)胞自噬的概況
        2 細(xì)胞自噬的發(fā)生過程和分子機(jī)制
            2.1 自噬的發(fā)生過程
            2.2 自噬的分子機(jī)制
        3 細(xì)胞自噬的生理作用
        參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
    第四章 日糧精料水平對山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡和自噬的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及動物飼養(yǎng)
            1.2 樣品采集
            1.3 主要儀器和試劑
            1.4 瘤胃液pH的測定
            1.5 瘤胃液內(nèi)短鏈脂肪酸(SCFA)的測定
            1.6 Real-time Q-PCR方法檢測凋亡、自噬相關(guān)基因的表達(dá)
            1.7 TUNEL凋亡染色
            1.8 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 日糧精料水平對山羊體重的影響
            2.2 日糧精料水平對山羊瘤胃重的影響
            2.3 日糧精料水平對山羊瘤胃pH和SCFA濃度的影響
            2.4 日糧精料水平對山羊瘤胃上皮凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.5 日糧精料水平對山羊瘤胃上皮自噬相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.6 凋亡和自噬相關(guān)基因與pH、SCFA相關(guān)性分析
            2.7 日糧精料水平對山羊瘤胃上皮TUNEL細(xì)胞凋亡檢測的影響
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第五章 饑餓對山羊瘤胃上皮細(xì)胞自噬和凋亡的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與動物飼養(yǎng)
            1.2 樣品采集
            1.3 主要儀器和試劑
            1.4 瘤胃液pH的測定
            1.5 瘤胃液內(nèi)短鏈脂肪酸(SCFA)的測定
            1.6 Real-time Q-PCR方法檢測自噬、凋亡相關(guān)基因的表達(dá)
            1.7 透射電鏡制樣與觀察
            1.8 Western blot檢測饑餓山羊瘤胃上皮細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá)以及ERK和AKT的磷酸化
            1.9 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 饑餓對山羊瘤胃pH和SCFA濃度的影響
            2.2 饑餓山羊透射電鏡觀察自噬泡、線粒體和細(xì)胞核
            2.3 饑餓對山羊瘤胃上皮自噬相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.4 饑餓對山羊瘤胃上皮凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.5 自噬和凋亡相關(guān)基因與pH、SCFA相關(guān)性分析
            2.6 自噬和凋亡相關(guān)基因與饑餓相關(guān)性分析
            2.7 饑餓對山羊瘤胃上皮LC3蛋白表達(dá)的影響
            2.8 饑餓對山羊瘤胃上皮ERK磷酸化的影響
            2.9 饑餓對山羊瘤胃上皮AKT磷酸化的影響
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第六章 體外研究pH和SCFA對原代培養(yǎng)山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡和自噬的影響
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑和儀器
            1.2 樣品采集
            1.3 瘤胃上皮細(xì)胞的分離和原代培養(yǎng)
            1.4 pH和SCFA處理山羊瘤胃上皮細(xì)胞后檢測凋亡、自噬相關(guān)基因的表達(dá)
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 pH和SCFA對山羊瘤胃上皮細(xì)胞凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.2 pH和SCFA對山羊瘤胃上皮細(xì)胞自噬相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
            2.3 凋亡和自噬相關(guān)基因與pH、SCFA效應(yīng)分析
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
本文創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：3870492