哺乳動(dòng)物中，Ghrelin被發(fā)現(xiàn)是一種協(xié)調(diào)能量和生殖活動(dòng)平衡的促進(jìn)食欲的胃腸激素，是生長(zhǎng)激素促分泌物受體(Growth hormone secretagogue receptor，GHS-R)的內(nèi)源性配體，主要在胃組織內(nèi)分泌細(xì)胞中分布。近年，在生殖系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)Ghrelin的高表達(dá)，有力的證明Ghrelin在生殖系統(tǒng)中有著比較重要的位置。卵母細(xì)胞的成熟與發(fā)育是哺乳動(dòng)物進(jìn)行體外受精及胚胎發(fā)育的先決條件，但是，卵母細(xì)胞成熟過(guò)程受到多重因素的影響。Ghrelin作為近年發(fā)現(xiàn)的新型激素，在一定程度上影響著生殖系統(tǒng)。因此，探索Ghrelin在卵母細(xì)胞成熟過(guò)程中的潛在作用對(duì)于促進(jìn)體外受精等相關(guān)胚胎工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用有著重要的理論與實(shí)踐指導(dǎo)意義。 研究表明Ghrelin和GHS-R主要在卵巢具有分泌類固醇的黃體細(xì)胞和間隙細(xì)胞中表達(dá)，在卵母細(xì)胞中也有Ghrelin和其受體的表達(dá)。而且Ghrelin在體外刺激顆粒細(xì)胞增殖和抑制其凋亡而促進(jìn)卵泡發(fā)育，并且抑制卵母細(xì)胞成熟。Ghrelin是否參與牛卵母細(xì)胞成熟，是否可以促進(jìn)牛卵丘細(xì)胞增殖，未見(jiàn)報(bào)道。本研究以牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)為研究對(duì)象，運(yùn)用免疫...

【文章頁(yè)數(shù)】：121 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 引言
    1.1 概述
    1.2 生長(zhǎng)激素促分泌素(GHS)和其受體(GHS-R)的發(fā)現(xiàn)
    1.3 Ghrelin 的鑒定和純化
        1.3.1 Ghrelin 的純化和結(jié)構(gòu)
        1.3.2 哺乳動(dòng)物的 Ghrelin
        1.3.3 Ghrelin 和促胃動(dòng)素
        1.3.4 Ghrelin 的基因和結(jié)構(gòu)
        1.3.5 非哺乳類動(dòng)物的 Ghrelin
    1.4 Ghrelin 的分布
        1.4.1 Ghrelin 濃度的測(cè)定
        1.4.2 Ghrelin 在胃和腸道中的分布
        1.4.3 Ghrelin 在腦和垂體中的分布
        1.4.4 Ghrelin 生成細(xì)胞
    1.5 Ghrelin 受體
        1.5.1 Ghrelin 受體類型
        1.5.2 Ghrelin 受體的信號(hào)通路
        1.5.3 Ghrelin 受體的分布
    1.6 Ghrelin 的生理功能
        1.6.1 GH 釋放功能
        1.6.2 調(diào)節(jié)食欲
        1.6.3 調(diào)節(jié)胃腸作用
        1.6.4 心血管作用
        1.6.5 GHrelin 和胰島素分泌
    1.7 Ghrelin 與生殖
        1.7.1 Ghrelin 對(duì)生殖系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的研究現(xiàn)狀
        1.7.2 Ghrelin 與雌性生殖
        1.7.3 Ghrelin 調(diào)控細(xì)胞的機(jī)理研究現(xiàn)狀
        1.7.4 Ghrelin 對(duì)卵母細(xì)胞成熟和顆粒細(xì)胞發(fā)育的研究現(xiàn)狀
        1.7.5 研究問(wèn)題的提出
        1.7.6 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2 牛卵母細(xì)胞及卵丘細(xì)胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 的表達(dá)
    2.1 牛卵母細(xì)胞及卵丘細(xì)胞 Ghrelin 和 Ghrelin Receptor 蛋白的表達(dá)
        2.1.1 材料與方法
        2.1.2 結(jié)果
        2.1.3 討論
    2.2 體外自然成熟過(guò)程中卵母細(xì)胞及卵丘細(xì)胞中 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 的表達(dá)變化
        2.2.1 材料和方法
        2.2.2 結(jié)果
        2.2.3 討論
    2.3 小結(jié)
3 FSH 對(duì)體外成熟培養(yǎng)卵母細(xì)胞和卵丘細(xì)胞 Ghrelin 和 GHS-R1a mRNA 表達(dá)的影響
    3.1 材料和方法
        3.1.1 儀器和試劑
        3.1.2 牛卵母細(xì)胞和卵丘細(xì)胞的收集
        3.1.3 卵母細(xì)胞和卵丘細(xì)胞實(shí)時(shí)定量 RT-PCR 檢測(cè)
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 FSH 對(duì)卵母細(xì)胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表達(dá)的影響
        3.2.2 FSH 對(duì)卵丘細(xì)胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表達(dá)的影響
    3.3 討論
        3.3.1 FSH 對(duì)卵母細(xì)胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表達(dá)的影響
        3.3.2 FSH 對(duì)卵丘細(xì)胞 Ghrelin 及 GHS-R1a mRNA 表達(dá)的影響
    3.4 小結(jié)
4 Ghrelin 和[D-Lys³]-GHRP-6 對(duì)卵丘細(xì)胞體外增殖的影響
    4.1 [D-Lys³]-GHRP-6 對(duì)卵丘細(xì)胞體外增殖的影響
        4.1.1 材料和方法
        4.1.2 結(jié)果
        4.1.3 討論
    4.2 Ghrelin 對(duì)卵丘細(xì)胞體外增殖的影響
        4.2.1 材料和方法
        4.2.2 結(jié)果
        4.2.3 討論
        4.2.4 小結(jié)
5 Ghrelin 和[D-Lys³]-GHRP-6 對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟的影響
    5.1 材料和方法
        5.1.1 儀器和試劑
        5.1.2 牛卵母細(xì)胞的獲得
        5.1.3 RNA 提取
        5.1.4 實(shí)時(shí)熒光 PCR 反應(yīng)引物
        5.1.5 實(shí)時(shí) RT-PCR 反應(yīng)
        5.1.6 牛卵母細(xì)胞核成熟的判定
        5.1.7 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 FSH 和[D-Lys³]-GHRP-6 對(duì)卵母細(xì)胞 BMP15 和 GDF9 mRNA 相對(duì)表達(dá)的影響
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
附：博士期間參與發(fā)表論文



本文編號(hào)：3863289