為了查明導(dǎo)致北疆地區(qū)部分規(guī)模化豬場疑似副豬嗜血桿菌病的病原及其生物學(xué)特性。方法:采集來源于不同地區(qū)規(guī)模化豬場病死豬的病料,包括肺臟、淋巴結(jié)和關(guān)節(jié)積液等;選擇TSA培養(yǎng)基培養(yǎng),采用10%CO₂兼性厭氧條件對細菌分離,根據(jù)該菌的16S rRNA來設(shè)計引物,采用PCR方法對分離株進行鑒定,然后觀察其培養(yǎng)、生理生化、血清學(xué)和藥敏特性,最后觀察分離株對小鼠的致病性。為提高候選株的培養(yǎng)效率,掌握候選株的生長特性,為疫苗菌株的制備提供理論依據(jù)。本試驗選擇基于OD值連續(xù)測定的活菌計數(shù)法,將候選株接種于TSB培養(yǎng)基上,置于10%CO₂培養(yǎng),對該菌株的OD₆₀₀值進行測定。鑒于副豬嗜血桿菌血清型眾多,商品化疫苗尚未全部覆蓋。本試驗以不同血清型的菌株作為候選菌株,進行擴大培養(yǎng),制備菌體滅活苗,同時對該疫苗的物理性狀、安全性和免疫保護力進行評價。結(jié)果:總共從174份病料中分離到31株分離株,其生理生化、培養(yǎng)及分子特征均符合副豬嗜血桿菌的特性;且分離株的血清型包括1、4、5、12四種;分離株副豬嗜血桿菌對慶大霉素、磺胺異噁唑、土霉素、頭孢噻肟、林...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞(Abbrevintion)
文獻綜述
    1 病原學(xué)介紹
    2 流行病學(xué)
    3 毒力
        3.1 莢膜
        3.2 脂多糖(LPS)
        3.3 外膜蛋白(OMP)
        3.4 菌毛
        3.5 轉(zhuǎn)鐵蛋白
        3.6 酶類
    4 致病機理及病理變化
    5 診斷方法
        5.1 分離鑒定
        5.2 血清學(xué)鑒定
        5.3 PCR技術(shù)
        5.4 生物學(xué)方法
    6 防制
        6.1 飼養(yǎng)管理
        6.2 疫苗接種
        6.3 藥物治療
試驗一 副豬嗜血桿菌的分離鑒定及相關(guān)特性研究
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 病料
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 培養(yǎng)基的配制
            1.1.4 實驗儀器
            1.1.5 實驗動物
            1.1.6 PCR引物設(shè)計
            1.1.7 微量生化發(fā)酵管
            1.1.8 藥敏紙片
            1.1.9 衛(wèi)星現(xiàn)象檢查用菌種
        1.2 實驗方法
            1.2.1 細菌的分離與純化
            1.2.2 染色鏡檢
            1.2.3 PCR鑒定
            1.2.4 生化鑒定
            1.2.5 藥物敏感性試驗
            1.2.6 血清型分型
            1.2.7 分離株小鼠致病性試驗
    2 結(jié)果
        2.1 細菌分離
        2.2 鏡檢
        2.3 種特異性PCR鑒定
        2.4 同源性比對結(jié)果
        2.5 生化鑒定
        2.6 藥敏試驗
        2.7 血清分型結(jié)果
        2.8 致病性試驗
    3 小結(jié)
    4 討論
試驗二 副豬嗜血桿菌分離株HZG-6 生長曲線的測定
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要培養(yǎng)基及其制備
        1.2 方法
            1.2.1 HZG-6 株菌液的制備
            1.2.2 生長曲線的測定
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    4 小結(jié)
試驗三 三價菌體滅活苗的制備及免疫保護力測定
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 試驗菌株和試驗動物
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 培養(yǎng)基
        1.2 方法
            1.2.1 半數(shù)致死量(LD50)的測定
            1.2.2 抗原制備
            1.2.3 物理性狀檢驗
            1.2.4 疫苗安全性檢測
            1.2.5 免疫保護試驗
            1.2.6 血清抗體的檢測
    2 結(jié)果
        2.1 半數(shù)致死量(LD50)的測定
        2.2 疫苗制備
        2.3 黏度測定
        2.4 疫苗穩(wěn)定性檢驗
        2.5 安全性檢測
        2.6 免疫保護試驗
        2.7 抗體水平檢測
    3 小結(jié)
    4 討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡歷
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本文編號：3853197