肌肉生長(zhǎng)抑制素(Myostatin,MSTN)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)家族的一員,又名生長(zhǎng)/分化因子-8(Growth/Differentiation Factor,GDF-8),是肌肉生長(zhǎng)的負(fù)調(diào)控因子,對(duì)畜禽瘦肉率性狀具有重要影響�；蚪M編輯技術(shù)是指通過(guò)人工核酸酶介導(dǎo)的基因組定點(diǎn)修飾技術(shù),是基因修飾技術(shù)的重要方法之一。目前,已經(jīng)利用多種基因編輯工具制備出豬、牛、羊、小鼠等多種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。隨著基因組編輯技術(shù)及其產(chǎn)品逐步進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用階段,將對(duì)國(guó)計(jì)民生產(chǎn)生重大而深遠(yuǎn)的影響,世界多國(guó)對(duì)新型基因編輯技術(shù)及其產(chǎn)品的監(jiān)管制定了相應(yīng)法律法規(guī)。我國(guó)政府高度重視轉(zhuǎn)基因生物的安全管理,針對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、植物、微生物實(shí)行分級(jí)分階段管理。本研究以本實(shí)驗(yàn)室前期利用TALEN技術(shù)制備的MSTN基因編輯梅山豬為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以同齡野生型梅山豬為對(duì)照,從目標(biāo)性狀遺傳穩(wěn)定性、基因修飾技術(shù)安全性、酮體性狀表型、基因漂移現(xiàn)象以及腸道微生物菌群變化等多方面研究,全面系統(tǒng)地評(píng)價(jià)MSTN基因編輯豬的安全性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,MSTN基因編輯梅山豬世代之間遺傳穩(wěn)定,個(gè)體健康狀況良好,各實(shí)質(zhì)性器官未見(jiàn)明顯病變。MSTN基因編輯豬機(jī)體內(nèi)M...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 研究背景
        1.1 MSTN基因
        1.2 基因編輯技術(shù)
        1.3 基因編輯動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的安全性
        1.4 基于TALEN技術(shù)制備的梅山豬簡(jiǎn)介
    2. 研究目的及意義
第二章 MSTN基因編輯豬安全性評(píng)價(jià)
    1. 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 儀器、試劑
        1.3 MSTN基因編輯豬DNA分子鑒定
        1.4 MSTN基因編輯豬血液采集及血液生理、生化分析
        1.5 MSTN基因編輯豬酮體性狀檢測(cè)及組織樣品采集
        1.6 MSTN基因編輯豬的肌肉肉質(zhì)的檢測(cè)
        1.7 MSTN基因編輯豬肌肉組織的RNA提取,反轉(zhuǎn)錄,及定熒光量PCR檢測(cè)
        1.8 MSTN基因編輯豬肌肉蛋白提取及western-blot檢測(cè)
        1.9 MSTN基因編輯豬各組織HE切片制作與觀察檢驗(yàn)
        1.10 MSTN基因編輯豬腸道微生物檢測(cè)與差異性分析
        1.11 TALEN系統(tǒng)脫靶檢測(cè)及FokI隨機(jī)整合檢測(cè)
        1.12 MSTN基因編輯豬腸道遺傳漂移檢測(cè)
    2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析
        2.1 MSTN基因編輯豬分子鑒定
        2.2. TALEN系統(tǒng)基因隨機(jī)整合及脫靶檢測(cè)
        2.3. MSTN基因編輯豬的胴體性狀表型檢測(cè)結(jié)果
        2.4 MSTN基因編輯豬的血液檢測(cè)結(jié)果
        2.5 MSTN基因編輯豬實(shí)質(zhì)性器官病理切片檢測(cè)
        2.6 MSTN基因編輯豬腸道微生物檢測(cè)
        2.7 MSTN基因漂移檢測(cè)
    3. 討論
        3.1 MSTN基因編輯豬遺傳穩(wěn)定性討論
        3.2 MSTN基因編輯豬表型性狀討論
        3.3 MSTN基因編輯豬的基因漂移可能性討論
    4. 下一步工作計(jì)劃
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3850529