肌肉生長抑制素(Myostatin,MSTN)是轉化生長因子β(TGFβ)家族的一員,又名生長/分化因子-8(Growth/Differentiation Factor,GDF-8),是肌肉生長的負調控因子,對畜禽瘦肉率性狀具有重要影響�；蚪M編輯技術是指通過人工核酸酶介導的基因組定點修飾技術,是基因修飾技術的重要方法之一。目前,已經(jīng)利用多種基因編輯工具制備出豬、牛、羊、小鼠等多種轉基因動物。隨著基因組編輯技術及其產品逐步進入產業(yè)化應用階段,將對國計民生產生重大而深遠的影響,世界多國對新型基因編輯技術及其產品的監(jiān)管制定了相應法律法規(guī)。我國政府高度重視轉基因生物的安全管理,針對轉基因動物、植物、微生物實行分級分階段管理。本研究以本實驗室前期利用TALEN技術制備的MSTN基因編輯梅山豬為實驗對象,以同齡野生型梅山豬為對照,從目標性狀遺傳穩(wěn)定性、基因修飾技術安全性、酮體性狀表型、基因漂移現(xiàn)象以及腸道微生物菌群變化等多方面研究,全面系統(tǒng)地評價MSTN基因編輯豬的安全性。實驗結果顯示,MSTN基因編輯梅山豬世代之間遺傳穩(wěn)定,個體健康狀況良好,各實質性器官未見明顯病變。MSTN基因編輯豬機體內M...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第一章 文獻綜述
    1. 研究背景
        1.1 MSTN基因
        1.2 基因編輯技術
        1.3 基因編輯動物和轉基因動物的安全性
        1.4 基于TALEN技術制備的梅山豬簡介
    2. 研究目的及意義
第二章 MSTN基因編輯豬安全性評價
    1. 實驗材料及方法
        1.1 實驗動物
        1.2 儀器、試劑
        1.3 MSTN基因編輯豬DNA分子鑒定
        1.4 MSTN基因編輯豬血液采集及血液生理、生化分析
        1.5 MSTN基因編輯豬酮體性狀檢測及組織樣品采集
        1.6 MSTN基因編輯豬的肌肉肉質的檢測
        1.7 MSTN基因編輯豬肌肉組織的RNA提取,反轉錄,及定熒光量PCR檢測
        1.8 MSTN基因編輯豬肌肉蛋白提取及western-blot檢測
        1.9 MSTN基因編輯豬各組織HE切片制作與觀察檢驗
        1.10 MSTN基因編輯豬腸道微生物檢測與差異性分析
        1.11 TALEN系統(tǒng)脫靶檢測及FokI隨機整合檢測
        1.12 MSTN基因編輯豬腸道遺傳漂移檢測
    2. 實驗結果及分析
        2.1 MSTN基因編輯豬分子鑒定
        2.2. TALEN系統(tǒng)基因隨機整合及脫靶檢測
        2.3. MSTN基因編輯豬的胴體性狀表型檢測結果
        2.4 MSTN基因編輯豬的血液檢測結果
        2.5 MSTN基因編輯豬實質性器官病理切片檢測
        2.6 MSTN基因編輯豬腸道微生物檢測
        2.7 MSTN基因漂移檢測
    3. 討論
        3.1 MSTN基因編輯豬遺傳穩(wěn)定性討論
        3.2 MSTN基因編輯豬表型性狀討論
        3.3 MSTN基因編輯豬的基因漂移可能性討論
    4. 下一步工作計劃
全文小結
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文



本文編號：3850529