沙門氏菌是導(dǎo)致食源性疾病最重要的病原菌之一,主要感染豬、雞等食品動(dòng)物,并通過(guò)食物鏈由動(dòng)物肉制品傳遞給人類,從而對(duì)公共健康造成危害。家禽被認(rèn)為是攜帶沙門氏菌最重要的載體,其中腸炎沙門氏菌血清型分離率較高。目前,由于抗生素的大量使用甚至濫用造成耐藥沙門氏菌的產(chǎn)生,這就使得我們迫切尋找一種抗生素替代物。丁酸梭菌由于廣譜的抗菌活性、不容易產(chǎn)生耐藥等特點(diǎn)以及廣泛的生物學(xué)功能而備受關(guān)注。大量研究表明丁酸梭菌能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、抑制病原微生物生長(zhǎng)等作用。然而,丁酸梭菌拮抗腸炎沙門氏菌感染雛雞的作用機(jī)制尚未明確。因此,在了解動(dòng)物源沙門氏菌耐藥特點(diǎn)基礎(chǔ)上,開(kāi)展腸炎沙門菌的致病性研究及丁酸梭菌對(duì)其拮抗作用機(jī)理探究。主要研究?jī)?nèi)容如下:1.動(dòng)物源沙門氏菌耐藥特點(diǎn)本研究旨在了解動(dòng)物源沙門氏菌耐藥特點(diǎn)及流行情況。2015年8月到2016年7月年間,從山東省濟(jì)南、臨沂等八個(gè)地區(qū)山地散養(yǎng)雞群、雞屠宰場(chǎng)和豬屠宰場(chǎng)共采集1300份肛門棉拭子樣品。沙門氏菌經(jīng)分離鑒定后,采用平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)沙門氏菌血清型、采用紙片擴(kuò)散的方法檢測(cè)沙門氏菌對(duì)14種常用抗生素的敏感性,利用多位點(diǎn)序列分型(MLST)方法分析沙門...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 沙門氏菌基本概況
    1.2 沙門氏菌流行狀況
    1.3 沙門氏菌分子分型方法
        1.3.1 脈沖場(chǎng)凝膠電泳
        1.3.2 多位點(diǎn)序列分型(MLST)
        1.3.3 多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析
    1.4 沙門氏菌導(dǎo)致炎癥反應(yīng)
    1.5 抗生素在防治沙門氏菌上的應(yīng)用及危害
    1.6 沙門氏菌耐藥機(jī)制
        1.6.1 質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性散播機(jī)制-基因盒-整合子系統(tǒng)
        1.6.2 抗生素靶標(biāo)基因突變引起的耐藥性
        1.6.3 細(xì)菌的主動(dòng)外排機(jī)制
        1.6.4 外膜的通透性降低
    1.7 抗生素替代品
        1.7.1 抗菌肽
        1.7.2 中草藥制劑
        1.7.3 益生菌
    1.8 益生菌益生功效
        1.8.1 益生菌提高動(dòng)物生產(chǎn)性能
        1.8.2 益生菌增強(qiáng)腸道免疫屏障功能
    1.9 丁酸梭菌的研究進(jìn)展
    1.10 蛋白質(zhì)組學(xué)
        1.10.1 蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展
        1.10.2 蛋白質(zhì)組學(xué)的功能與分類
        1.10.3 蛋白質(zhì)組技術(shù)
    1.11 本研究目的及意義
2 材料和方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)所用菌株
        2.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 常規(guī)耗材
        2.1.6 試劑配制
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 山地散養(yǎng)雞群沙門氏菌流行情況及特點(diǎn)
        2.2.2 山東省豬和雞屠宰場(chǎng)中沙門氏菌的血清型分布、耐藥特點(diǎn)及攜帶Ⅰ類整合子情況
        2.2.3 腸炎沙門氏菌致病性及丁酸梭菌拮抗其感染肉雞的作用機(jī)理
        2.2.4 丁酸梭菌調(diào)控腸道炎癥和腸道屏障功能的作用機(jī)制
3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 山地散養(yǎng)雞群沙門氏菌流行情況及特點(diǎn)
        3.1.1 山地散養(yǎng)雞群樣品分離結(jié)果
        3.1.2 沙門氏菌PCR鑒定結(jié)果
        3.1.3 沙門氏菌血清型分布
        3.1.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
        3.1.5 β內(nèi)酰胺類耐藥基因及喹諾酮類耐藥基因的檢測(cè)結(jié)果
        3.1.6 Ⅰ類整合子檢測(cè)和基因盒特點(diǎn)
        3.1.7 多位點(diǎn)序列分型(MLST)結(jié)果
        3.1.8 ERIC-PCR分析結(jié)果
    3.2 山東省豬和雞屠宰場(chǎng)中沙門氏菌的血清型分布、耐藥特點(diǎn)及攜帶Ⅰ類整合子情況.
        3.2.1 沙門氏菌分離鑒定結(jié)果
        3.2.2 沙門氏菌血清分型結(jié)果
        3.2.3 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果
        3.2.4 β內(nèi)酰胺類耐藥基因的檢測(cè)結(jié)果
        3.2.5 Ⅰ類整合子檢測(cè)和基因盒特點(diǎn)
        3.2.6 多位點(diǎn)序列分型(MLST)結(jié)果
    3.3 腸炎沙門氏菌致病性及丁酸梭菌拮抗其感染肉雞的作用機(jī)理
        3.3.1 沙門氏菌計(jì)數(shù)結(jié)果
        3.3.2 盲腸腸道形態(tài)變化
        3.3.3 肝臟組織中細(xì)胞因子表達(dá)水平
        3.3.4 脾臟組織中細(xì)胞因子表達(dá)水平
        3.3.5 盲腸組織中細(xì)胞因子表達(dá)水平
        3.3.6 肝臟、脾臟和盲腸組織中MyD88信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)水平
    3.4 丁酸梭菌調(diào)控腸道炎癥和腸道屏障功能的作用機(jī)制
        3.4.1 丁酸梭菌對(duì)盲腸組織形態(tài)完整性的影響
        3.4.2 丁酸梭菌對(duì)血清中IgA和細(xì)胞因子的影響
        3.4.3 丁酸梭菌對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞中CD4+和CD8+T細(xì)胞數(shù)量的影響
        3.4.4 丁酸梭菌對(duì)盲腸內(nèi)容物微生物菌群的影響
        3.4.5 丁酸梭菌對(duì)腸道組織中細(xì)胞因子的影響
        3.4.6 丁酸梭菌對(duì)腸道組織中黏蛋白muc-2表達(dá)水平的影響
        3.4.7 丁酸梭菌對(duì)腸道組織緊密連接蛋白表達(dá)水平的影響
        3.4.8 丁酸梭菌對(duì)腸道組織中TLR4-、MyD88-和NF-κB信號(hào)通路的影響
        3.4.9 丁酸梭菌對(duì)空腸組織蛋白的影響
        3.4.10 丁酸梭菌對(duì)腸黏膜上皮細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的影響
        3.4.11 丁酸梭菌對(duì)腸黏膜上皮細(xì)胞中黏蛋白muc-2表達(dá)水平的影響
        3.4.12 丁酸梭菌對(duì)腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白表達(dá)水平的影響
        3.4.13 丁酸梭菌對(duì)腸黏膜上皮細(xì)胞中TLR4-、MyD88-和NF-κB信號(hào)通路的影響
4 討論
    4.1 山地散養(yǎng)雞群沙門氏菌流行情況及特點(diǎn)
    4.2 山東省豬和雞屠宰場(chǎng)中沙門氏菌的血清型分布、耐藥特點(diǎn)及攜帶Ⅰ類整合子情況.
    4.3 腸炎沙門氏菌致病性及丁酸梭菌拮抗其感染肉雞的作用機(jī)理
    4.4 丁酸梭菌調(diào)控腸道炎癥和腸道屏障功能的作用機(jī)制
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
獲獎(jiǎng)情況



本文編號(hào)：3849708