糖皮質(zhì)激素是哺乳動(dòng)物分娩啟動(dòng)的重要激素，不僅可以引起子宮收縮力的改變，通過多種途徑參與分娩，而且在分娩啟動(dòng)時(shí)各種激素間相互協(xié)調(diào)中發(fā)揮著樞紐作用。它主要由腎上腺皮質(zhì)分泌，現(xiàn)已證明其他部位如胎盤、卵巢、子宮等組織器官也可分泌，包括皮質(zhì)醇和皮質(zhì)酮，牛、羊等所分泌的90%以上是皮質(zhì)醇。糖皮質(zhì)激素必須與其受體相結(jié)合才能發(fā)揮作用。糖皮質(zhì)激素受體分為GRα和GRβ，主要以GRα形式存在。參與糖皮質(zhì)激素活性轉(zhuǎn)化的酶類主要是11β-羥基類固醇脫氫酶（11β-HSD）。11β-HSD分為11β-HSD1、11β-HSD2兩種。11β-HSD1是氧化還原酶，以還原作用為主，可使無(wú)活性的可的松還原為有活性的皮質(zhì)醇。11β-HSD2是專一性氧化酶，使有生物活性的皮質(zhì)醇轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)活性的可的松。 目前國(guó)內(nèi)外就糖皮質(zhì)激素受體、合成酶在圍產(chǎn)期山羊子宮頸中的定位以及mRNA表達(dá)與分娩前后子宮頸收縮和舒張的關(guān)系是否一致的研究較少，資料仍然缺乏。為了闡述上述問題，本試驗(yàn)分別采集健康山羊產(chǎn)前兩天、產(chǎn)前一天、分娩期、產(chǎn)后一天以及產(chǎn)后兩天的子宮頸，用Western Blot法檢測(cè)兔抗人糖皮質(zhì)激素受體蛋白（NR3C1）多克隆抗體，兔抗...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
符號(hào)說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 糖皮質(zhì)激素概述
        1.1.1 糖皮質(zhì)激素的合成
        1.1.2 糖皮質(zhì)激素的生理作用
        1.1.3 糖皮質(zhì)激素分泌的調(diào)節(jié)
    1.2 糖皮質(zhì)激素受體概述
        1.2.1 糖皮質(zhì)激素受體的結(jié)構(gòu)與分類
        1.2.2 糖皮質(zhì)激素受體的分布
        1.2.3 糖皮質(zhì)激素受體的作用機(jī)理
        1.2.4 糖皮質(zhì)激素受體的生理作用
    1.3 糖皮質(zhì)激素合成酶概述
        1.3.1 11β-HSD1 與 11β-HSD2 的研究簡(jiǎn)史
        1.3.2 11β-HSD1 與 11β-HSD2 的基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        1.3.3 11β-HSD1 與 11β-HSD2 的分布及功能
        1.3.4 11β-HSD 的調(diào)節(jié)
    1.4 脂肪細(xì)胞
        1.4.1 脂肪細(xì)胞的分類與功能
        1.4.2 脂肪細(xì)胞的形成
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 試驗(yàn)藥品與試劑
        2.1.3 試驗(yàn)儀器設(shè)備
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)
        2.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物子宮頸樣本的采集
        2.2.3 Western Βlot 法檢測(cè)兔抗人 NR3C1 抗體，兔抗人 11β-HSD1 抗體及兔抗人 11β-HSD2抗體在山羊子宮頸組織中的特異性
        2.2.4 免疫組織化學(xué)方法檢測(cè) NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 和脂肪細(xì)胞在圍產(chǎn)期山羊子宮頸組織中的分布
        2.2.5 熒光定量 RT-PCR 方法檢測(cè)圍產(chǎn)期山羊子宮頸組織中的 NR3C1、11β-HSD1 及11β-HSD2 的相對(duì)表達(dá)水平
3 結(jié)果與分析
    3.1 Western Blot 法檢測(cè)圍產(chǎn)期山羊子宮頸兔抗人 NR3C1 抗體、11β-HSD1 抗體、11β-HSD2 抗體的特異性
    3.2 圍產(chǎn)期山羊子宮頸中脂滴的分布
    3.3 圍產(chǎn)期山羊子宮頸中 NR3C1 受體蛋白及合成酶 11β-HSD1、11β-HSD2 的分布
    3.4 圍產(chǎn)期山羊子宮頸組織的熒光定量 RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果
        3.4.1 所有組織樣本總 RNA 提取的完整性和純度以及熒光定量 RT-PCR 的重復(fù)性檢驗(yàn)
        3.4.2 用 RT-PCR 方法得到的擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性檢驗(yàn)
        3.4.3 實(shí)時(shí)熒光定量 RT-PCR 擴(kuò)增 NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 及 ACTΒ內(nèi)參基因片段產(chǎn)物的擴(kuò)增曲線
        3.4.4 圍產(chǎn)期山羊各期子宮頸組織 RT-PCR 方法檢測(cè)目的基因的表達(dá)效果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
7 致謝
8 作者簡(jiǎn)介及發(fā)表論文情況



本文編號(hào)：3847481