兔支氣管敗血波氏桿菌PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2023-08-26 04:52
兔波氏桿菌病是由支氣管敗血渡氏桿菌(Bordetella bronchiseptica, Bb),也稱兔支氣管鮑特桿菌或博德特氏桿菌,是一種能廣泛的寄生在家畜、野生動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呼吸道上皮細(xì)胞纖毛上的革蘭氏陰性需氧小桿菌,能引起兔、豬、馬、狗、鼠等多種哺乳動(dòng)物的呼吸道疾病,感染動(dòng)物主要以鼻炎和支氣管肺炎為特征。近年來,也有該菌感染人引起發(fā)病的報(bào)道,尤其是年幼的兒童和抵抗力較差的老年人。在我國(guó),該茵在兔群中的感染率比較高,無論是幼兔、青年兔、種兔均有感染,給養(yǎng)兔業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。利用FHA基因設(shè)計(jì)了1對(duì)特異性引物,建立了一種PCR檢測(cè)方法,旨在建立一種簡(jiǎn)便、快速、敏感、特異的診斷方法,主要實(shí)驗(yàn)和結(jié)果如下:1.兔支氣管敗血波氏桿菌的分離和鑒定:采集安徽滁州某兔場(chǎng)送檢的疑似兔支氣管敗血波士桿菌感染的病死幼兔的鼻腔分泌物、肺臟、肝臟樣品進(jìn)行病原菌的分離與鑒定。本實(shí)驗(yàn)結(jié)合菌落形態(tài)、染色鏡檢、培養(yǎng)特性、血清學(xué)實(shí)驗(yàn)、生化鑒定和16SrRNAPCR擴(kuò)增,確定該分離菌為兔支氣管敗血波氏桿菌。藥物敏感實(shí)驗(yàn)研究表明:該病菌對(duì)強(qiáng)力霉素、氟苯尼考、慶大霉素、丁胺卡那霉素等高度敏感;對(duì)卡那霉素、鏈霉素、麥迪霉...
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
文中所引部分縮略語
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 支氣管敗血波氏桿菌的病原學(xué)
1.1 細(xì)菌的形態(tài)和生化特性
1.2 抗原結(jié)構(gòu)
1.3 支氣管敗血波氏桿菌的藥物敏感性
2 流行病學(xué)和致病機(jī)理
3 臨床癥狀及病理變化
3.1 臨床癥狀
3.2 病理變化
4 兔支氣管敗血波氏桿菌的診斷方法
4.1 微生物學(xué)診斷
4.2 血清學(xué)診斷
4.3 分子生物學(xué)診斷
5 預(yù)防與控制
5.1 藥物治療
5.2 免疫接種
5.3 防治
6 研究目的與意義
參考文獻(xiàn)
第二章 兔支氣管敗血波氏桿菌的分離和鑒定
摘要
1 材料與方法
1.1 病料來源
1.2 培養(yǎng)基與血清
1.3 酶及主要試劑
1.4 主要的儀器與設(shè)備
1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.6 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 分離菌株的形態(tài)結(jié)構(gòu)與培養(yǎng)培養(yǎng)特性
2.2 血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.5 分離株16SrRNA基因PCR擴(kuò)增結(jié)果及測(cè)序結(jié)果分析
2.6 分離菌的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
第三章 兔支氣管敗血波氏桿菌PCR方法的建立
摘要
1 材料與方法
1.1 菌種
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器與設(shè)備
1.4 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 PCR擴(kuò)增FHA基因片段結(jié)果
2.2 重組質(zhì)粒T-FHA的PCR鑒定
2.3 序列測(cè)定及同源性分析
2.4 PCR條件優(yōu)化結(jié)果分析
2.5 PCR特異性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
2.6 PCR敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3 討論
參考文獻(xiàn)
第四章 PCR方法在臨床上的應(yīng)用
摘要
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
1.2 培養(yǎng)基及主要試劑
1.3 引物
1.4 主要儀器與設(shè)備
1.5 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 血清學(xué)診斷結(jié)果
2.2 PCR方法診斷結(jié)果
2.3 常規(guī)血清學(xué)檢測(cè)與PCR檢測(cè)的對(duì)比
3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
本文編號(hào):3843993
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
文中所引部分縮略語
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 支氣管敗血波氏桿菌的病原學(xué)
1.1 細(xì)菌的形態(tài)和生化特性
1.2 抗原結(jié)構(gòu)
1.3 支氣管敗血波氏桿菌的藥物敏感性
2 流行病學(xué)和致病機(jī)理
3 臨床癥狀及病理變化
3.1 臨床癥狀
3.2 病理變化
4 兔支氣管敗血波氏桿菌的診斷方法
4.1 微生物學(xué)診斷
4.2 血清學(xué)診斷
4.3 分子生物學(xué)診斷
5 預(yù)防與控制
5.1 藥物治療
5.2 免疫接種
5.3 防治
6 研究目的與意義
參考文獻(xiàn)
第二章 兔支氣管敗血波氏桿菌的分離和鑒定
摘要
1 材料與方法
1.1 病料來源
1.2 培養(yǎng)基與血清
1.3 酶及主要試劑
1.4 主要的儀器與設(shè)備
1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.6 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 分離菌株的形態(tài)結(jié)構(gòu)與培養(yǎng)培養(yǎng)特性
2.2 血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.5 分離株16SrRNA基因PCR擴(kuò)增結(jié)果及測(cè)序結(jié)果分析
2.6 分離菌的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
第三章 兔支氣管敗血波氏桿菌PCR方法的建立
摘要
1 材料與方法
1.1 菌種
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器與設(shè)備
1.4 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 PCR擴(kuò)增FHA基因片段結(jié)果
2.2 重組質(zhì)粒T-FHA的PCR鑒定
2.3 序列測(cè)定及同源性分析
2.4 PCR條件優(yōu)化結(jié)果分析
2.5 PCR特異性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
2.6 PCR敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3 討論
參考文獻(xiàn)
第四章 PCR方法在臨床上的應(yīng)用
摘要
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
1.2 培養(yǎng)基及主要試劑
1.3 引物
1.4 主要儀器與設(shè)備
1.5 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 血清學(xué)診斷結(jié)果
2.2 PCR方法診斷結(jié)果
2.3 常規(guī)血清學(xué)檢測(cè)與PCR檢測(cè)的對(duì)比
3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
本文編號(hào):3843993
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