近年來,隨著畜牧業(yè)的高速發(fā)展,獸藥在保證食源性動物增產(chǎn)、增效的同時,食品中獸藥殘留已經(jīng)成為一個日益嚴(yán)重的全球性公共衛(wèi)生問題。獸藥的不當(dāng)使用會使其殘留在動物可食用組織、雞蛋和奶制品中,不僅影響國際貿(mào)易、造成經(jīng)濟(jì)損失,更重要的是會給消費者的健康帶來潛在風(fēng)險。為了滿足監(jiān)測和控制食品獸藥殘留的需要,急需建立簡單、廉價、靈敏、快速和高通量的分析方法。本研究主要針對多肽類抗生素桿菌肽鋅(BAC)和多粘菌素(POL)、截短側(cè)耳素類抗生素泰妙菌素(TIA)和沃尼妙林(VAL)、抗寄生蟲藥硝碘酚腈(NIT)、氯氰碘柳胺(CLT)和碘醚柳胺(RAF)、非甾體類抗炎藥雙氯芬酸(DIC)和卡洛芬(CAR)、抗組胺藥賽庚啶(CPH)和吩噻嗪類(PZs)獸藥,設(shè)計并合成人工抗原,制備高靈敏度的單克隆抗體,以此為研究基礎(chǔ)建立相應(yīng)的免疫學(xué)快速檢測方法。(1)根據(jù)BAC的結(jié)構(gòu)特征,設(shè)計并合成了人工抗原BAC-BSA,獲得了兩株抗BAC單克隆抗體6D2-G10和3F2-F11細(xì)胞株,抗體亞型均為IgG1型。6D2-G10具有更高的靈敏度,IC50值為0.59ng/mL,親和力常數(shù)為6.69×109L/mol,對BAC結(jié)構(gòu)...

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫表
第一章 緒論
    1.1 立題背景
    1.2 抗生素類獸藥概述
        1.2.1 理化性質(zhì)
        1.2.2 作用機(jī)理
        1.2.3 殘留危害與限量標(biāo)準(zhǔn)
        1.2.4 檢測方法
    1.3 抗寄生蟲類獸藥概述
        1.3.1 理化性質(zhì)
        1.3.2 作用機(jī)理
        1.3.3 殘留危害與限量標(biāo)準(zhǔn)
        1.3.4 檢測方法
    1.4 非甾體類抗炎獸藥概述
        1.4.1 理化性質(zhì)
        1.4.2 作用機(jī)理
        1.4.3 殘留危害和限量標(biāo)準(zhǔn)
        1.4.4 檢測方法
    1.5 抗組胺藥與吩噻嗪類藥物概述
        1.5.1 理化性質(zhì)
        1.5.2 作用機(jī)理
        1.5.3 殘留危害與限量標(biāo)準(zhǔn)
        1.5.4 檢測方法
    1.6 立題依據(jù)和主要研究內(nèi)容
        1.6.1 本課題的意義及研究目的
        1.6.2 本課題的主要研究內(nèi)容
第二章 多肽類抗生素單克隆抗體的制備及免疫學(xué)檢測技術(shù)的建立
    2.1 引言
    2.2 儀器與化學(xué)試劑
        2.2.1 實驗儀器
        2.2.2 實驗材料
        2.2.3 溶液配制
        2.2.4 實驗動物
    2.3 試驗方法
        2.3.1 免疫原的設(shè)計與合成
        2.3.2 免疫原的表征
        2.3.3 動物免疫
        2.3.4 小鼠多抗血清檢測
        2.3.5 單克隆抗體的制備
        2.3.6 單克隆抗體的鑒定
        2.3.7 BAC膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
        2.3.8 POL的ic-ELISA檢測法的建立
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 人工抗原的合成和鑒定
        2.4.2 小鼠多抗血清的鑒定
        2.4.3 單克隆細(xì)胞株篩選
        2.4.4 單克隆抗體性質(zhì)鑒定
        2.4.5 BAC膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
        2.4.6 COL的ic-ELISA方法的建立
    2.5 本章小結(jié)
第三章 截短側(cè)耳素類抗生素單克隆抗體的制備及免疫學(xué)檢測技術(shù)的建立
    3.1 引言
    3.2 儀器與化學(xué)試劑
        3.2.1 實驗儀器
        3.2.2 實驗材料
        3.2.3 溶液配制
        3.2.4 實驗動物與細(xì)胞
    3.3 試驗方法
        3.3.1 免疫原的設(shè)計和合成
        3.3.2 免疫原的表征
        3.3.3 動物免疫
        3.3.4 小鼠多抗血清檢測
        3.3.5 單克隆抗體的制備
        3.3.6 單克隆抗體的鑒定
        3.3.7 膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 人工抗原的合成與鑒定
        3.4.2 小鼠多抗血清鑒定
        3.4.3 單克隆細(xì)胞株篩選
        3.4.4 單克隆抗體性質(zhì)鑒定
        3.4.5 膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
    3.5 本章小結(jié)
第四章 抗寄生蟲藥單克隆抗體的制備及免疫學(xué)檢測技術(shù)的建立
    4.1 引言
    4.2 儀器與化學(xué)試劑
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 實驗材料
        4.2.3 溶液配制
        4.2.4 實驗動物和細(xì)胞
    4.3 試驗方法
        4.3.1 免疫原的設(shè)計與合成
        4.3.2 免疫原的表征
        4.3.3 動物免疫
        4.3.4 小鼠多抗血清檢測
        4.3.5 單克隆抗體的制備
        4.3.6 單克隆細(xì)胞的鑒定
        4.3.7 NIT膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
        4.3.8 CLT的ic-ELISA檢測法的建立
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 人工抗原的合成與鑒定
        4.4.2 小鼠多抗血清鑒定
        4.4.3 單克隆細(xì)胞株篩選
        4.4.4 單克隆抗體性質(zhì)鑒定
        4.4.5 NIT膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
        4.4.6 CLT的ic-ELISA方法的建立
    4.5 本章小結(jié)
第五章 非甾體類抗炎藥單克隆抗體的制備及免疫學(xué)檢測技術(shù)的建立
    5.1 引言
    5.2 儀器與化學(xué)試劑
        5.2.1 實驗儀器
        5.2.2 實驗材料
        5.2.3 溶液配制
        5.2.4 實驗動物和細(xì)胞
    5.3 試驗方法
        5.3.1 免疫原的設(shè)計和合成
        5.3.2 免疫原的表征
        5.3.3 動物免疫
        5.3.4 小鼠多抗血清檢測
        5.3.5 單克隆抗體的制備
        5.3.6 單克隆抗體的鑒定
        5.3.7 膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 人工抗原的合成與鑒定
        5.4.2 小鼠多抗血清的鑒定
        5.4.3 單克隆細(xì)胞株篩選
        5.4.4 單克隆抗體性質(zhì)鑒定
        5.4.5 膠體金試紙條的建立和優(yōu)化
    5.5 本章小結(jié)
第六章 賽庚啶和吩噻嗪類藥物單克隆抗體的制備及免疫學(xué)檢測技術(shù)的建立
    6.1 引言
    6.2 儀器與化學(xué)試劑
        6.2.1 實驗儀器
        6.2.2 實驗材料
        6.2.3 溶液配制
        6.2.4 實驗動物和細(xì)胞
    6.3 試驗方法
        6.3.1 免疫原的設(shè)計和合成
        6.3.2 免疫原的表征
        6.3.3 動物免疫
        6.3.4 小鼠多抗血清檢測
        6.3.5 單克隆抗體的制備
        6.3.6 單克隆抗體的鑒定
        6.3.7 膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
    6.4 結(jié)果與討論
        6.4.1 人工抗原的合成與鑒定
        6.4.2 小鼠多抗血清鑒定
        6.4.3 單克隆細(xì)胞株篩選
        6.4.4 單克隆抗體性質(zhì)鑒定
        6.4.5 膠體金試紙條的建立與優(yōu)化
    6.5 本章小結(jié)
主要結(jié)論
創(chuàng)新點
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄: 作者在攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：3839222