黑色素皮質激素受體1(melanocortin-1 receptor,MC1R)基因在哺乳動物毛色調控過程中起重要作用,但外源MC1R基因對羊駝(Lama pacos)毛囊干細胞(hair follicle stem cells,HFSCs)中小眼畸形相關轉錄因子(micropht-halmiaassocitated transcription factor,MITF)和酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因表達特性的影響研究較少。為了探討MC1R基因對MITF和TYR mRNA表達的影響,本研究通過構建羊駝MC1R真核表達載體pcDNA3.1(+)-MC1R,瞬時轉染HFSCs,qRT-PCR檢測轉染前后MC1R、MITF、TYR mRNA表達量;并采用細胞免疫化學技術對MC1R進行細胞定位。qRT-PCR結果顯示,羊駝HFSCs轉染pcDNA3.1(+)-MC1R后,MC1R mRNA表達量顯著增加(P<0.05),分別是空載體組和對照組的2.15和2.26倍,MITF和TYR mRNA表達量增加不顯著(P>0.05);細胞免疫化學結果顯示,MC1R在羊駝HFSC...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 MC1R基因的克隆
    1.3 pc DNA3.1(+)-MC1R重組克隆載體的構建
    1.4 pc DNA3.1(+)-MC1R轉染羊駝HFSCs
    1.5 q RT-PCR檢測MC1R、MITF、TYR m RNA表達
    1.6 MC1R細胞免疫化學定位
    1.7 數(shù)據(jù)處理與圖像分析
2 結果與分析
    2.1 羊駝MC1R全長基因的獲取
    2.2 質粒pc DNA3.1(+)-MC1R構建及雙酶切鑒定
    2.3 q RT-PCR檢測轉染前后相關基因表達
    2.4 MC1R蛋白的細胞表達定位
3 討論
    3.1 載體pc DNA3.1(+)-MC1R質粒構建結果
    3.2 轉染質粒對羊駝HFSCs黑色素相關基因的影響
    3.3 MC1R基因在羊駝HFSCs中的定位
4 結論



本文編號：3838487