在禽致病性大腸桿菌(APEC)AE17及AE17△RyhB的基礎上利用Red同源重組技術構建基因缺失株AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE,對野生株和基因缺失株的生長、生物被膜形成和運動特性進行分析,并采用qRT-PCR技術比較野生株和缺失株中與運動性、生物被膜形成相關基因的轉錄水平。結果顯示,各菌株生長曲線無顯著差異;AE17△RyhB、AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE生物被膜形成能力較AE17顯著下降;AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE運動能力與AE17相比下降;AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE與AE17相比flhB、flgD、fliF和cheY轉錄水平均降低,而AE17△RyhB△cysE與AE17△cysE相比基因轉錄水平均有所增強;AE17△RyhB、AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE與AE17相比,flhD、flgC、sidA轉錄水平均顯著降低。表明cysE基因缺失降低了APEC生物被膜形成能力及運動能力,且RyhB基因缺失對cysE基因的運動能力調(diào)控作用有代償作用,RyhB、cysE基因均通過調(diào)節(jié)與生...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試驗材料
        1.1.1 菌種、質(zhì)粒及試劑
        1.1.2 引物的設計與合成
    1.2 試驗方法
        1.2.1 AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE構建與鑒定
        1.2.2 各菌株生長曲線測定
        1.2.3 各菌株生物被膜形成能力測定
        1.2.4 掃描電鏡觀察各菌株生物被膜
        1.2.5 各菌株運動性測定
        1.2.6 透射電鏡觀察各菌株鞭毛形態(tài)
        1.2.7 各菌株運動性、生物被膜相關基因轉錄水平檢測
2 結果與分析
    2.1 AE17△cysE、AE17△RyhB△cysE的鑒定
    2.2 各菌株的生長曲線
    2.3 各菌株生物被膜的形成能力
    2.4 各菌株的運動能力
    2.5 各菌株運動性、生物被膜形成相關基因的轉錄水平檢測
3 討 論



本文編號：3832049