H5、H7和H9亞型禽流感病毒四重?zé)晒釸T-PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2023-06-02 04:29
旨在提高對(duì)禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)檢測(cè)效率,及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫病。本研究通過分析M基因以及H5、H7和H9亞型的HA基因序列保守區(qū)域,設(shè)計(jì)并合成了相關(guān)探針和引物,建立了禽流感病毒(AIV)四重?zé)晒釸T-PCR檢測(cè)方法,該方法可在檢測(cè)禽流感病毒(AIV)的同時(shí),確定病原是否為H5、H7和H9亞型。結(jié)果顯示,該檢測(cè)方法耗時(shí)短、特異性好、檢測(cè)下限達(dá)到10-5 ng·μL-1。采用該方法檢測(cè)臨床采集的13個(gè)活禽交易市場(chǎng)的384份禽咽喉和泄殖腔雙拭子樣品,經(jīng)檢測(cè),其中有60份樣品為流感病毒陽性,且全部是H9亞型,該結(jié)果與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法(NY/T 772—2013)檢測(cè)結(jié)果一致,κ值為1 (P<0.001)。本方法能實(shí)現(xiàn)對(duì)禽流感病毒及H5、H7和H9亞型的高通量快速檢測(cè),將在AIV快速檢測(cè)中發(fā)揮重要作用。
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要儀器試劑
1.2 毒株和核酸提取
1.3 引物和探針篩選
1.4 反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
1.5 特異性和靈敏度評(píng)估
1.6 臨床樣品檢測(cè)
2 結(jié) 果
2.1 引物和探針篩選
2.2 特異性
2.3 靈敏度
2.3. 1 M基因檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.2 H5亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.3 H7亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.4 H9亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.4 臨床試驗(yàn)結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論
本文編號(hào):3827666
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要儀器試劑
1.2 毒株和核酸提取
1.3 引物和探針篩選
1.4 反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
1.5 特異性和靈敏度評(píng)估
1.6 臨床樣品檢測(cè)
2 結(jié) 果
2.1 引物和探針篩選
2.2 特異性
2.3 靈敏度
2.3. 1 M基因檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.2 H5亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.3 H7亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.3.4 H9亞型檢測(cè)引物及探針靈敏度試驗(yàn)
2.4 臨床試驗(yàn)結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論
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