番鴨呼腸孤病毒(MDRV)感染在臨床上以肝臟和脾臟出現(xiàn)白色壞死點為特征,臨床發(fā)病率和死亡率都很高,它能導致免疫抑制,給番鴨養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟損失,然而目前對于番鴨呼腸孤病毒感染,缺乏有效的治療藥物。中藥多糖具有抗病毒、增強免疫力等生物學功能,并且具有低毒性,低耐藥等特點,對于番鴨呼腸孤病毒的防治表現(xiàn)出了巨大的潛力。本試驗選用黃芪多糖(APS)分別進行了體外、體內(nèi)抗病毒作用研究及免疫試驗,初步揭示了黃芪多糖的抗病毒機理,結果表明黃芪多糖預防用藥能延遲番鴨呼腸孤病毒感染番鴨出現(xiàn)癥狀的時間,減輕其引起的病理變化,顯著降低死亡率,為臨床應用提供了一定的理論依據(jù)。主要研究結果如下:試驗一、黃芪多糖、猴頭菇多糖、“芪苓散”超微粉用藥濃度的篩選將1日齡雛番鴨165羽隨機分成11組,每組15羽,分別為空白對照組,同居感染對照組,黃芪多糖低、中、高劑量預防組,猴頭菇多糖低、中、高劑量預防組,“芪蒼散”超微粉低、中、高劑量預防組。從1日齡開始,黃芪多糖和猴頭菇多糖低、中、高劑量預防組分別以濃度O.1g/L、0.2g/L、0.4g/L飲水給藥;“芪苓散”超微粉低、中、高劑量預防組分別以濃度2.5g/kg、...

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 番鴨呼腸孤病毒概述
        1.1 病毒的分類地位
        1.2 病毒的形態(tài)及理化特性
        1.3 病毒的培養(yǎng)特性
        1.4 番鴨呼腸孤病毒感染的流行病學、臨床癥狀及病理變化
        1.5 番鴨呼腸孤病毒對番鴨機體免疫功能的影響
        1.6 番鴨呼腸孤病毒感染的防治
    2 家禽免疫系統(tǒng)概述
        2.1 免疫器官概述
        2.2 免疫細胞概述
    3 部分細胞因子對免疫的調(diào)節(jié)研究
        3.1 白細胞介素1的免疫調(diào)節(jié)作用
        3.2 白細胞介素2的免疫調(diào)節(jié)作用
        3.3 白細胞介素4的免疫調(diào)節(jié)作用
        3.4 白細胞介素6的免疫調(diào)節(jié)作用
        3.5 腫瘤壞死因子-α的免疫調(diào)節(jié)作用
    4 禽類神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)
        4.1 糖皮質(zhì)激素的免疫調(diào)節(jié)作用
        4.2 生長激素的免疫調(diào)節(jié)作用
        4.3 β-內(nèi)啡肽的免疫調(diào)節(jié)作用
    5 抗病毒感染中細胞因子的免疫應答
    6 中藥多糖對免疫的影響
        6.1 中藥多糖對免疫器官的影響
        6.2 中藥多糖對免疫細胞的影響
        6.3 中藥多糖對細胞因子的作用
        6.4 中藥多糖對免疫分子的作用
    7 中藥多糖抗病毒作用
        7.1 中藥多糖在體外條件下抗病毒作用的研究
        7.2 中藥多糖在動物機體內(nèi)的抗病毒研究
    8 本項目的立題依據(jù)、目的和意義
第二章 黃芪多糖、猴頭菇多糖、“芪苓散”超微粉用藥濃度篩選試驗
    1 材料
        1.1 試驗毒株
        1.2 實驗番鴨
        1.3 主要儀器設備
        1.4 主要試劑
    2 番鴨呼腸孤病毒病自然感染發(fā)病模型
    3 用建立的MDRV自然感染發(fā)病模型確定中藥飲水用藥濃度
        3.1 實驗番鴨分組
        3.2 番鴨臨床癥狀、剖檢病變觀察
        3.3 中藥的選擇及濃度的確定
    4 結果與分析
        4.1 各組實驗番鴨臨床癥狀、死亡分布情況
        4.2 各組實驗番鴨體重和死亡率分析
        4.3 試驗各組剖檢結果及分析
    5 討論
        5.1 試驗設計的依據(jù)
        5.2 黃芪多糖、猴頭菇多糖、“芪苓散”超微粉的用藥濃度篩選
第三章 黃芪多糖用藥時間和療程的確定
    1 材料
        1.1 試驗毒株
        1.2 實驗番鴨
        1.3 主要儀器設備
        1.4 主要試劑
    2 番鴨呼腸孤病毒病自然感染發(fā)病模型
    3 用建立的MDRV自然感染發(fā)病模型確定黃芪多糖飲水用藥時間和用藥療程
        3.1 實驗番鴨分組
        3.2 番鴨臨床癥狀、剖檢病變觀察
        3.3 黃芪多糖用藥時間和療程的確定
    4 結果與分析
        4.1 各組實驗番鴨臨床癥狀、死亡分布情況
        4.2 各組實驗番鴨體重和死亡率分析
        4.3 各組死亡實驗番鴨剖檢結果與分析
    5 討論
        5.1 黃芪多糖對人工攻毒感染番鴨的治療作用
        5.2 黃芪多糖的用藥時間和療程的確定
第四章 黃芪多糖對MDRV感染番鴨血清細胞因子、神經(jīng)介質(zhì)和激素的影響
    1 材料
        1.1 試驗毒株
        1.2 實驗番鴨
        1.3 主要儀器設備
        1.4 主要試劑
    2 番鴨呼腸孤病毒病自然感染發(fā)病模型
    3 黃芪多糖用藥濃度、用藥時間、療程的確定重復試驗
        3.1 實驗番鴨分組
        3.2 血清標本采集
        3.3 剖檢觀察
        3.4 血清指標檢測
        3.5 數(shù)據(jù)處理
    4 實驗結果與分析
        4.1 各采樣時間各組實驗番鴨剖檢變化
        4.2 各血清指標結果分析
    5 討論
        5.1 黃芪多糖對MDRV同居感染番鴨剖檢變化的影響
        5.2 黃芪多糖對健康番鴨(無MDRV感染的番鴨)血清部分細胞因子、神經(jīng)介質(zhì)和激素的影響
        5.3 雛番鴨感染MDRV后對番鴨血清部分細胞因子、神經(jīng)介質(zhì)和激素的影響
        5.4 黃芪多糖對MDRV感染的雛番鴨血清部分細胞因子、神經(jīng)介質(zhì)和激素的影響
第五章 黃芪多糖在體外對番鴨呼腸孤病毒的影響研究
    1 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要實驗儀器
    2 試驗內(nèi)容和方法
        2.1 黃芪多糖在體外CEF中最大安全濃度(無毒濃度)的測定
        2.2 MDRV-YB₄分離株細胞毒的擴繁及PCR鑒定
        2.3 先加入黃芪多糖對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
        2.4 病毒與黃芪多糖同時加入到單層細胞中對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
        2.5 先接種病毒后加黃芪多糖對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
    3 結果與分析
        3.1 APS在CEF上的安全濃度測定
        3.2 MDRV-YB₄分離株細胞毒的PCR鑒定結果
        3.3 先加入黃芪多糖后接種病毒對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
        3.4 病毒與黃芪多糖同時加入到單層細胞中對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
        3.5 先接種病毒后加黃芪多糖對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
    4 討論
        4.1 黃芪多糖在雞胚成纖維細胞上的安全濃度討論
        4.2 黃芪多糖的3種加藥方式對MDRV-YB₄分離株TCID₅₀的影響
第六章 黃芪多糖臨床應用試驗
    1 材料
        1.1 實驗番鴨和場地
        1.2 主要儀器設備
        1.3 主要試劑
    2 試驗方法與步驟
        2.1 實驗番鴨分組
        2.2 臨床觀察與飼料消耗記錄
        2.3 體重稱取
        2.4 血清樣品的采集
        2.5 血清指標檢測
        2.6 數(shù)據(jù)處理
    3 結果與分析
        3.1 體重結果與分析
        3.2 成活率與料重比結果與分析
        3.3 各血清指標結果分析
    4 討論
第七章 全文總結
    1 本研究結論
    2 本研究還需進一步解決的問題
參考文獻
附錄
    附錄1 “芪苓散”超微粉配方
    附錄2 雞胚成纖維細胞制作方法
    附錄3 細胞/組織RNA提取
    附錄4 ELISA檢測試劑盒說明書
    附錄5 主要試劑的配制
    附錄6 主要中英文縮略表
致謝



本文編號：3823494