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NA/NS1基因部分缺失的H5N1亞型禽流感病毒對干擾素的拮抗作用及與宿主的相互作用

發(fā)布時間:2023-05-21 22:30
  H5N1亞型禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)是重要的人獸共患病病原,在自然選擇條件下NA和NS1部分基因缺失的H5N1亞型AIV演變?yōu)閮?yōu)勢流行株,該類毒株與未缺失病毒相比具有復(fù)制競爭優(yōu)勢,對鴨的致病性明顯增強。進(jìn)一步研究證明NA和NS1蛋白具有幫助禽流感病毒拮抗干擾素的抗病毒能力;NA蛋白的49~68位缺失20aa會提高病毒在一定濃度干擾素下的增殖能力;NS1蛋白80~84位缺失5aa也可以提高病毒的抗干擾素能力,但是具體機制尚不清楚。為了進(jìn)一步探索該類禽流感病毒抗干擾素作用及病毒感染后宿主蛋白表達(dá)的差異性,本研究內(nèi)容如下:1.NA和NS1蛋白原核表達(dá)及多克隆抗體制備為了獲得檢測NA蛋白和NS1蛋白的抗體,本研究通過擴(kuò)增NA.NA+.NS1和NS1+基因,分別連接原核表達(dá)載體PET-32a進(jìn)行原核表達(dá),蛋白純化后免疫小鼠,獲得NA、NA+、NS1和NSl+的多抗血清。結(jié)果顯示,NA、NA+、NS1和NS1+多抗血清反應(yīng)性良好,可以檢測NA和NS1自身蛋白,且NA和NA+及NS1和NS1+多抗血清之間均具有良好的交叉反應(yīng)性。2.NA基因部分缺失對病毒抗干...

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
符號說明
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    綜述一 H5N1亞型禽流感病毒NA和NS1基因的研究進(jìn)展
    綜述二 蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)技術(shù)研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
第二部分 研究內(nèi)容
    第一章 NA和NS1蛋白原核表達(dá)及多抗血清制備
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
        參考文獻(xiàn)
    第二章 NA/NS1基因部分缺失對病毒抗干擾素水平的影響
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
        參考文獻(xiàn)
    第三章 A+S+/A-S-病毒感染麻鴨肺臟蛋白質(zhì)組學(xué)分析
        1 材料
        2 方法
        3 結(jié)果
        4 討論
        參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
致謝



本文編號:3821546

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