染料木素(Genistein),植物雌激素的一種,是一種天然的酪氨酸酶抑制劑,具有抗腫瘤、抗骨質(zhì)疏松、抗氧化、抗抑郁、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌和動物生長發(fā)育等生物學(xué)功能,廣泛存在于豆科植物中。作為一種功能型的食物成分,近年來人們在畜牧生產(chǎn)中通過添加染料木素獲得了一些積極的效果,但有關(guān)其具體作用機制的研究還較少,尤其是染料木素在促進(jìn)畜禽產(chǎn)肉性能方面的研究鮮見報道。此前相關(guān)研究分別獨立發(fā)現(xiàn)染料木素能夠促進(jìn)或抑制成肌細(xì)胞的分化,但其有效作用劑量和調(diào)控方式尚不明確。mi RNAs是一類長約22nt的保守的非編碼RNA,能夠通過與靶基因m RNA的3’-UTR相結(jié)合,使其降解或者抑制其轉(zhuǎn)錄后翻譯。已經(jīng)有許多mi RNAs被報道與骨骼肌的發(fā)育密切相關(guān)。本研究以C2C12成肌細(xì)胞和小鼠為實驗?zāi)Ｐ?探索染料木素對成肌細(xì)胞分化和小鼠骨骼肌發(fā)育的影響,以及mi R-222在此過程中所發(fā)揮的遺傳調(diào)控作用。主要研究結(jié)果如下:1.給妊娠期母鼠飼喂含染料木素的飼料,在活體內(nèi)引起骨骼肌組織中mi R-222的下調(diào)(P<0.01);同時上調(diào)mi R-222的靶基因Myo D(P<0.01)和Myo G(P=0.09)的...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 染料木素的研究概述
        1.1.1 染料木素簡介
        1.1.2 染料木素的作用機制
        1.1.3 染料木素在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用
    1.2 骨骼肌發(fā)育
        1.2.1 胚胎期骨骼肌的發(fā)育
        1.2.2 出生后骨骼肌的發(fā)育
        1.2.3 骨骼肌發(fā)育相關(guān)調(diào)節(jié)因子
    1.3 miRNA對骨骼肌發(fā)育的調(diào)節(jié)
        1.3.1 miRNA的形成及作用機制
        1.3.2 骨骼肌發(fā)育相關(guān)miRNA
    1.4 miR-222及BTG2概述
        1.4.1 miR-222概述
        1.4.2 BTG2概述
    1.5 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物和組織樣品收集
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 細(xì)胞和組織總RNA
        2.1.5 引物合成
        2.1.6 質(zhì)粒、菌株和細(xì)胞系
    2.2 實驗方法
        2.2.1 生物信息學(xué)分析
        2.2.2 RNA提取及檢測
        2.2.3 反轉(zhuǎn)錄PCR
        2.2.4 定量PCR
        2.2.5 BTG2基因部分3’-UTR真核表達(dá)載體構(gòu)建
        2.2.6 C2C12成肌細(xì)胞、Hela細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.7 熒光素酶活性檢測
        2.2.8 CCK檢測
        2.2.9 細(xì)胞免疫熒光染色
    2.3 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計方法
3.結(jié)果與分析
    3.1 染料木素對小鼠骨骼肌早期發(fā)育的影響
    3.2 染料木素對C2C12成肌細(xì)胞分化的影響
    3.3 染料木素影響C2C12成肌細(xì)胞分化過程中miRNAs的表達(dá)
    3.4 miR-222對C2C12成肌細(xì)胞分化的影響
        3.4.1 miR-222抑制C2C12成肌細(xì)胞分化
        3.4.2 miR-222靶向作用于BTG23’-UTR
        3.4.3 干擾BTG2表達(dá)對C2C12成肌細(xì)胞分化的影響
    3.5 mi R-222 參與染料木素對 C2C12 成肌細(xì)胞分化的調(diào)控作用
4.討論
    4.1 染料木素對小鼠骨骼肌早期發(fā)育的影響
    4.2 染料木素對C2C12成肌細(xì)胞分化的影響
    4.3 染料木素影響C2C12成肌細(xì)胞分化過程中miRNAs的表達(dá)
    4.4 miR-222對C2C12成肌細(xì)胞分化的調(diào)控
    4.5 mi R-222 參與染料木素對 C2C12 成肌細(xì)胞分化的調(diào)控作用
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：3815653