能否及早且準(zhǔn)確地診斷出奶牛的妊娠狀況是奶牛養(yǎng)殖的關(guān)鍵。奶牛受精后19-20 d(day)胚胎開始著床,大約在42 d完成這個進(jìn)程。胚胎著床后會產(chǎn)生一些物質(zhì),能通過循壞系統(tǒng)到達(dá)母體各種體液中。這樣從母體體液中檢測某些分子來診斷妊娠狀態(tài)就有了可能。而且著床之后,胚胎與母體子宮獲得了聯(lián)系,變得更為穩(wěn)定和安全,較少再發(fā)生流產(chǎn)。所以人工授精(Artificial Insemination,AI)后的20-42 d是奶牛早期診斷的最合適的時間段。在著床過程中,許多細(xì)胞因子起著重要的調(diào)控作用,這些細(xì)胞因子也是潛在的妊娠診斷標(biāo)記物。妊娠相關(guān)糖蛋白(Pregnancy Associated Glycoproteins,PAGs)在偶蹄類動物的妊娠階段血清中的成周期性的變化,盡管PAGs在功能上的研究還不是很明確,但作為早期妊娠診斷標(biāo)記分子已有大量研究。本課題選擇妊娠相關(guān)糖蛋白PAG1為標(biāo)記分子,以期建立一種ELISA試劑盒。首先,依據(jù)PAG1氨基酸序列,選出一段GTPPQEFQVC合成多肽;并與KLH偶聯(lián)用于動物免疫,與BSA偶聯(lián)用戶篩選單克隆細(xì)胞;并命名為2017-020-KLH和2017-020-B...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
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英文縮寫詞表
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 奶牛早期妊娠診斷技術(shù)的現(xiàn)狀
        1.1 觀察法
        1.2 直腸診斷法
        1.3 超聲波診斷法
        1.4 孕酮檢測法
        1.5 血清酸滴定法
        1.6 早孕因子檢測法
        1.7 干擾素τ檢測法
        1.8 妊娠相關(guān)糖蛋白檢測法
    第2章 妊娠相關(guān)糖蛋白研究進(jìn)展
        2.1 妊娠相關(guān)糖蛋白的發(fā)現(xiàn)
        2.2 妊娠相關(guān)糖蛋白結(jié)構(gòu)的研究
        2.3 妊娠相關(guān)糖蛋白基因的研究
        2.4 妊娠相關(guān)糖蛋白功能的研究
第二篇 試驗部分
    第1章 PAG1 單克隆抗體制備
        1.1 試驗材料
        1.2 試驗方法
        1.3 試驗結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第2章 抗體特異性鑒定與純化
        2.1 試驗材料
        2.2 試驗方法
        2.3 試驗結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第3章 PAG1 雙抗夾心法ELISA的建立
        3.1 試驗材料
        3.2 試驗方法
        3.3 試驗結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介及文章發(fā)表情況
致謝



本文編號：3813912