本文主要研究N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine，NAC）對豬小腸上皮細胞（intestinal porcine epithelial cell-1，IPEC-1）生長與活力的影響及其作用機制。 1NAC對IPEC-1細胞生長與活力的影響。 （1）將IPEC-1細胞分為5個處理組：對照組，100μM NAC組，200μM NAC組、400μM NAC組和50μM胱氨酸（cystine，Cyss）組，研究不同水平的NAC對細胞生長與活力的影響，明確NAC在IPEC-1細胞培養(yǎng)液中的最佳添加水平。結(jié)果顯示，50μM Cyss組和三個水平NAC組IPEC-1細胞數(shù)量與對照組相比顯著增加（P<0.01），三天后達到最多,而培養(yǎng)液中添加100μM NAC細胞活力最高（P<0.01）。綜合IPEC-1細胞生長與活力的情況，明確NAC在IPEC-1細胞培養(yǎng)液中的最佳添加水平為100μM。（2）細胞隨機分為對照組、50μM Cyss組、100μM Cyss組、200μM Cyss組，100μM NAC組，50μM Cyss+100μM NAC組，100μM Cyss+100...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫詞表
第一章 緒論
    1.1 研究目的與意義
    1.2 國內(nèi)外研究進展
        1.2.1 NAC的研究進展
        1.2.2 谷胱甘肽的研究進展
        1.2.3 EGFR信號通路
    1.3 小結(jié)與展望
    1.4 研究目標(biāo)和內(nèi)容
第二章 試驗研究
    試驗一 NAC 對 IPEC-1 細胞生長與活力的影響
        1.1 材料與方法
            1.1.1 試驗材料與儀器
            1.1.2 試驗方法
        1.2 數(shù)據(jù)分析
        1.3 試驗結(jié)果
            1.3.1 NAC對IPEC-1細胞生長的影響
            1.3.2 NAC 對 IPEC-1 細胞活力的影響
            1.3.3 NAC、Cyss 對 IPEC-1 細胞生長的影響
            1.3.4 NAC、Cyss 對 IPEC-1 細胞活力的影響
        1.4 討論
            1.4.1 NAC 對 IPEC-1 細胞生長情況的影響
            1.4.2 NAC 對 IPEC-1 活力情況的影響
            1.4.3 NAC、Cyss 對 IPEC-1 細胞生長與活力的影響
        1.5 小結(jié)
    試驗二 NAC 對 IPEC-1 細胞生長和生理相關(guān)基因和蛋白表達的影響
        2.1 材料與方法
            2.1.1 試驗材料與儀器
            2.1.2 試驗方法
        2.2 數(shù)據(jù)分析
        2.3 試驗結(jié)果
            2.3.1 NAC 對 IPEC-1 細胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt mRNA相對表達量的影響
            2.3.2 NAC 對 IPEC-1 細胞 mTOR、4E-BP1、P70S6K mRNA 相對表達量的影響
            2.3.3 NAC 對 IPEC-1 細胞 TLR4、NF-κB、HSP70 mRNA 相對表達量的影響
            2.3.4 NAC 對 IPEC-1 細胞 Claudin-1、ZO-1、Occludin mRNA 相對表達量的影響
            2.3.5 NAC 對 IPEC-1 細胞 Na/K-ATPase、SGLT、AMPK、CFTR、IGFBP-3mRNA 相對表達量的影響
            2.3.6 NAC 對 IPEC-1 細胞 4E-BP1 蛋白表達的影響
        2.4 討論
            2.4.1 NAC 對 IPEC-1 細胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt mRNA相對表達量的影響
            2.4.2 NAC 對 IPEC-1 細胞 mTOR、4E-BP1、P70S6K mRNA 相對表達量的影響
            2.4.3 NAC 對 IPEC-1 細胞 TLR4、NF-κB、HSP70 mRNA 相對表達量的影響
            2.4.4 NAC 對 IPEC-1 細胞 Claudin-1、ZO-1、Occludin mRNA 相對表達量的影響
            2.4.5 NAC 對 IPEC-1 細胞 Na/K-ATPase、SGLT、AMPK、CFTR、IGFBP-3mRNA 相對表達量的影響
            2.4.6 NAC 對 IPEC-1 細胞 4E-BP1 蛋白表達的影響
        2.5 小結(jié)
    試驗三 GSH 在 NAC 調(diào)控 IPEC-1 細胞生長中的作用
        3.1 材料與方法
            3.1.1 試驗材料與儀器
            3.1.2 試驗方法
            3.1.3 HPLC 檢測 IPEC-1 細胞內(nèi)還原型 GSH 和 Cys 的濃度
        3.2 數(shù)據(jù)處理
        3.3 試驗結(jié)果
            3.3.1 不同濃度 BSO、DEM 對 IPEC-1 細胞生長的影響
            3.3.2 不同濃度 BSO、DEM 對 IPEC-1 細胞活力的影響
            3.3.3 添加 NAC 與 BSO、DEM 對 IPEC-1 細胞生長的影響
            3.3.4 添加 NAC 與 BSO、DEM 對 IPEC-1 細胞活力的影響
            3.3.5 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 對 IPEC-1 細胞生長的影響
            3.3.6 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 對 IPEC-1 細胞活力的影響
            3.3.7 HPLC 檢測 IPEC-1 細胞內(nèi)還原型 GSH 和 Cys 的濃度
        3.4 討論
            3.4.1 BSO、DEM、NAC 對 IPEC-1 細胞生長、活力的影響
            3.4.2 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 對 IPEC-1 細胞生長與活力的影響
            3.4.3 HPLC 檢測 IPEC-1 細胞內(nèi)還原型 GSH 和 Cys 的濃度
        3.5 小結(jié)
    試驗四 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞生長與活力的影響
        4.1 材料與方法
            4.1.1 試驗材料與儀器
            4.1.2 試驗方法
        4.2 數(shù)據(jù)分析
        4.3 試驗結(jié)果
            4.3.1 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞生長的影響
            4.3.2 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞活力的影響
            4.3.3 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt、mTOR、Bax、Cyclin D mRNA 表達量的影響
            4.3.4 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞、NF-κB、TLR4、IL-8、IL-6、TNF-α、STAT3、HSP70、pBD-1 mRNA 表達量的影響
            4.3.5 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 Claudin-1、Na/K-ATPase、ZO-1、CFTR mRNA 表達量的影響
            4.3.6 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、AMPK、SGLT 1 mRNA 表達量的影響
        4.4 討論
            4.4.1 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞生長、活力的影響
            4.4.2 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt、mTOR、Bax、Cyclin D mRNA 表達量的影響
            4.4.3 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 NF-κB、TLR4、IL-8、IL-6、TNF-α、STAT3、HSP70、pBD-1 mRNA 表達量的影響
            4.4.4 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 Claudin-1、Na/K-ATPase、ZO-1、CFTR mRNA 表達量的影響
            4.4.5 NAC 對 LPS 刺激 IPEC-1 細胞 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、AMPK、SGLT1 mRNA 表達量的影響
        4.5 小結(jié)
第三章 結(jié)論和建議
    3.1 主要結(jié)論
    3.2 創(chuàng)新點
    3.3 有待進一步研究的問題
參考文獻
致謝
碩士研究生期間的研究成果



本文編號：3810453