發(fā)布時(shí)間：2023-05-07 01:18

　　腫瘤（Tumor）已成為當(dāng)前人類健康的一大殺手，嚴(yán)重威脅著人們的生命與健康。肺癌是目前世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤，是導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的主要因素。于此同時(shí)，動(dòng)物腫瘤病的發(fā)病率和病死率也呈上升趨勢(shì)。馬立克氏�。∕arek’s disease，MD）等腫瘤病具有高致病性和傳染性，給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失。中藥治療腫瘤具有許多優(yōu)勢(shì)，從天然植物中尋找抗腫瘤活性成分是抗腫瘤藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。秦嶺主峰太白山為我國(guó)三大“藥山”之一，中草藥資源豐富，其中有149種以“七”字命名的藥用植物，即太白“七藥”。本研究從太白“七藥”中篩選出6味中草藥組成抗腫瘤中藥方劑“腫瘤消”。為了驗(yàn)證“腫瘤消”方劑的抗腫瘤活性和作用機(jī)理，以人肺腺癌A549細(xì)胞和馬立克氏淋巴瘤MDCC-MSBl細(xì)胞為主要的體外腫瘤細(xì)胞模型，對(duì)“腫瘤消”方劑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用和機(jī)理進(jìn)行了研究，目的在于為科學(xué)、合理地開(kāi)發(fā)太白山中草藥資源提供指導(dǎo)，為臨床抗腫瘤藥物篩選提供理論支持。 （1）“腫瘤消”方劑對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抗腫瘤活性。采用MTT法對(duì)“腫瘤消”方劑的抗腫瘤活性進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明“腫瘤消”方劑對(duì)馬立克氏淋巴瘤MDCC-MSBl細(xì)胞、人肺...

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
文獻(xiàn)綜述
    第一章 中藥抗腫瘤研究進(jìn)展
        1.1 人和動(dòng)物腫瘤病概述
        1.2 中藥抗腫瘤作用研究進(jìn)展
            1.2.1 中藥抗腫瘤作用及其中醫(yī)機(jī)制
            1.2.2 中藥復(fù)方抗腫瘤作用研究
            1.2.3 太白“七藥”抗腫瘤作用研究進(jìn)展
        1.3 中藥抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展
            1.3.1 抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂
            1.3.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡
            1.3.3 阻滯腫瘤細(xì)胞增殖周期
            1.3.4 影響原癌基因和抑癌基因的表達(dá)
            1.3.5 抑制端粒酶活性
            1.3.6 影響細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)
            1.3.7 抑制腫瘤血管生成
        1.4 展望
試驗(yàn)研究
    第二章 “腫瘤消”方劑抗腫瘤活性及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞株
            2.1.2 中草藥制劑
            2.1.3 試劑
            2.1.4 試劑配制
            2.1.5 儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)和傳代
            2.2.2 MTT 法檢測(cè)“腫瘤消”方劑對(duì)腫瘤細(xì)胞存活率的影響
            2.2.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
            2.2.4 Hoechst 染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡
            2.2.5 DNA 片段化分析
            2.2.6 線粒體膜電位勢(shì)能(ΔΨm)變化檢測(cè)
            2.2.7 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
            2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        2.3 結(jié)果
            2.3.1 “腫瘤消”方劑對(duì)腫瘤細(xì)胞存活率的影響
            2.3.2 “腫瘤消”方劑對(duì) A549 細(xì)胞形態(tài)的影響
            2.3.3 凋亡 A549 細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化
            2.3.4 “腫瘤消”方劑對(duì) MDCC-MSB1 細(xì)胞核內(nèi) DNA 降解的影響
            2.3.5 “腫瘤消”方劑對(duì) MDCC-MSB1 細(xì)胞線粒體膜電位勢(shì)能的影響
            2.3.6 “腫瘤消”方劑對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡率的影響
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 “腫瘤消”方劑誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡的信號(hào)通路研究
        3.1 材料
            3.1.1 細(xì)胞株
            3.1.2 中草藥制劑
            3.1.3 試劑
            3.1.4 試劑配制
            3.1.5 儀器
        3.2 方法
            3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            3.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            3.2.3 試驗(yàn)分組
            3.2.4 細(xì)胞蛋白樣品制備
            3.2.5 SDS-PAGE 蛋白凝膠電泳
            3.2.6 轉(zhuǎn)膜（半干轉(zhuǎn)）
            3.2.7 一抗、二抗孵育
            3.2.8 顯影
        3.3 結(jié)果
            3.3.1 “腫瘤消”方劑對(duì) p38 MAPK 信號(hào)通路的影響
            3.3.2 “腫瘤消”方劑對(duì)死亡受體的影響
            3.3.3 “腫瘤消”方劑對(duì) caspase 8 的影響
            3.3.4 “腫瘤消”方劑對(duì) p53、Bax 和 Bcl-2 的影響
            3.3.5 “腫瘤消”方劑對(duì) cytochrome c 的影響
            3.3.6 “腫瘤消”方劑對(duì) caspase 9 和 caspase 3 的影響
        3.4 討論
            3.4.1 腫瘤細(xì)胞模型的選擇
            3.4.2 “腫瘤消”誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡涉及到 p38 MAPK 的持續(xù)活化
            3.4.3 “腫瘤消”方劑誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡的死亡受體途徑
            3.4.4 “腫瘤消”方劑誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡的線粒體途徑
            3.4.5 “腫瘤消”方劑誘導(dǎo) A549 細(xì)胞凋亡的信號(hào)通路模式圖
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3809964