本研究采集了新疆石河子地區(qū)疑似羊傳染性膿皰病毒（ORFV）感染的發(fā)病山羊唇部結(jié)痂病料，通過病毒檢測(cè)、分離和鑒定。以O(shè)RFV分離株為研究對(duì)象，分別克隆了ORFV分離株主要保護(hù)性抗原基因B2L和F1L，以及3個(gè)毒力基因VIR、GIF和VGEF，并進(jìn)行了測(cè)序和遺傳進(jìn)化分析，從分子水平上證實(shí)了ORFV石河子流行株發(fā)生了遺傳變異。以O(shè)RFV-SHZ1為研究對(duì)象，通過同源重組的方法構(gòu)建了ORFV119基因的缺失株，并對(duì)其滴度、生長(zhǎng)特性和遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行了初步研究。本研究為新疆地區(qū)ORFV的科學(xué)防控和疫苗研發(fā)奠定了前期基礎(chǔ)。研究方法和主要結(jié)果如下： 1．ORFV石河子流行株的分離鑒定 采集新疆石河子地區(qū)疑似羊傳染性膿皰病毒（ORFV）感染的羔羊唇部結(jié)痂病料，用ORFV B2L基因特異性引物擴(kuò)增，篩選出ORFV陽(yáng)性病料。將ORFV陽(yáng)性病料碾磨和無菌處理后，接種Veroa細(xì)胞進(jìn)行病毒分離。在盲傳五代后出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變，經(jīng)電鏡負(fù)染觀察在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中觀察到外觀呈橢圓形、有囊膜、表面呈繩索樣結(jié)構(gòu)排列的副痘病毒粒子。超薄切片顯示，細(xì)胞內(nèi)有成熟的病毒粒子。用純化病毒液劃痕接種2月齡羔羊進(jìn)行動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)，接種后...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師評(píng)閱表
中文摘要
Abstract
中英文縮寫詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
第二章 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
    實(shí)驗(yàn)一 羊傳染性膿皰病毒石河子流行株的分離鑒定
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 PCR 檢測(cè)
            2.2 ORFVSHZ1 株 B2L 基因核苷酸及推導(dǎo)氨基酸的序列分析
            2.3 病毒分離
            2.4 病毒學(xué)鑒定結(jié)果
            2.5 ORFV分離株TCID50的測(cè)定
            2.6 動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)
        3 討論
    實(shí)驗(yàn)二 羊傳染性膿皰病毒石河子流行株部分重要抗原及毒力基因的克隆和遺傳進(jìn)化分析
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 ORFV 石河子流行株 B2L、F1L、VIR、GIF 及 VEGF 基因的 PCR 擴(kuò)增結(jié)果
            2.2 重組質(zhì)粒的菌液 PCR 鑒定
            2.3 ORFV 石河子流行株 SHZ1 株 B2L、F1L、VIR、GIF 及 VEGF 基因測(cè)序結(jié)果
            2.4 ORFV 石河子流行株 B2L、F1L、VIR、GIF 及 VEGF 基因的核苷酸及氨基酸同源性分析
            2.5 ORFV 石河子流行株 B2L、F1L、VIR、GIF 及 VEGF 基因的遺傳進(jìn)化分析
        3 討論
    實(shí)驗(yàn)三 羊傳染性膿皰病毒 119 基因缺失株的構(gòu)建及鑒定研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 穿梭載體的構(gòu)建
            2.2 重組病毒的純化與鑒定
            2.3 重組病毒與親本毒株 TCID50比較
            2.4 重組病毒在 Vero 細(xì)胞生長(zhǎng)特性分析
            2.5 重組病毒的遺傳穩(wěn)定性
        3 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介
在學(xué)校期間參與的研究課題
獲獎(jiǎng)情況
發(fā)表論文



本文編號(hào)：3805037