發(fā)布時(shí)間：2023-04-29 01:56

　　豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fevervirus)引起的一種烈性傳染病。E2為CSFV主要結(jié)構(gòu)蛋白,在介導(dǎo)CSFV感染宿主細(xì)胞方面發(fā)揮重要作用。為研究E2蛋白與宿主細(xì)胞蛋白的相互作用,本研究以E2為誘餌蛋白,利用酵母雙雜交系統(tǒng)從本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的豬外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)cDNA酵母表達(dá)文庫(kù)中篩選得到與CSFVE2蛋白相互作用的宿主細(xì)胞蛋白MEK2(mitogen-activated protein kinase kinase2),并用GST pulldown、雙分子熒光互補(bǔ)和激光共聚焦等方法驗(yàn)證了E2與MEK2的相互作用。進(jìn)一步研究證實(shí),CSFV感染PK-15細(xì)胞后,可活化ERK通路并促進(jìn)MEK2的表達(dá),而用MEK1/2特異性抑制劑U0126抑制該通路,則可顯著降低CSFV的增殖,表明CSFV通過(guò)調(diào)節(jié)該通路以促進(jìn)其增殖。與以往研究不同的是,用MEK1特異性抑制劑PD98059處理PK-15細(xì)胞則對(duì)CSFV增殖無(wú)明顯影響。分別于感染后不同時(shí)間...

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