為了從發(fā)病鵝分離致病性大腸桿菌并篩選對鵝源大腸桿菌抑菌效果良好的中藥,試驗采集黑龍江省大慶市林甸某農戶獅白鵝發(fā)病幼鵝新鮮糞便,分離致病菌,經PCR進行初步鑒定;隨后將黃芩、訶子、車前子等二十幾種傳統中藥利用酒浸、超聲波破碎、水浴濃縮進行提純,利用二倍稀釋法測定各類中藥的最小抑菌濃度(MIC),然后利用牛津杯法進一步測定MIC中抑菌濃度小于或等于12.5 mg/mL中藥的抑菌效果,從而找到抑菌效果顯著的中藥。結果表明:分離培養(yǎng)初步分離得到了3株菌,隨機選取1株進行后續(xù)試驗,PCR產物測序鑒定為大腸桿菌,測定的訶子、黃連、五倍子、車前子、艾葉、甘草、連翹等中藥對分離的大腸桿菌均具有抑菌作用,其中訶子、黃連、五倍子、烏梅的MIC為0.39～3.12 mg/mL,分離的鵝源大腸桿菌對其極度敏感。說明本試驗分離得到鵝源大腸桿菌,且部分中藥在抑制鵝源大腸桿菌方面具有一定效果。

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 病料
    1.2 藥品
    1.3 主要試劑
    1.4 主要儀器
2 方法
    2.1 大腸桿菌的分離培養(yǎng)及鑒定
    2.2 溶血性的測定
    2.3 中藥藥液的制備
    2.4 分離菌的PCR鑒定及測序
        2.4.1 引物的設計與合成
        2.4.2 細菌DNA的提取及PCR擴增
    2.5 最小抑菌濃度(MIC)的測定
    2.6 體外抑菌效果的測定
3 結果與分析
    3.1 細菌的分離培養(yǎng)及鏡檢
    3.2 分離菌的PCR鑒定
    3.3 中藥MIC的測定
    3.4 體外抑菌效果的測定
4 討論



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