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MBD4和TDG基因在豬前體脂肪細(xì)胞分化中的作用與機制

發(fā)布時間:2023-04-20 01:28
  脂肪在豬胴體中的數(shù)量和分布決定著豬肉的品質(zhì)和風(fēng)味,脂肪細(xì)胞是由前體脂肪細(xì)胞分化而來的,這一過程呈動態(tài)變化,同時受激素和生長因子的調(diào)控,這些激素或生長因子的改變會影響前體脂肪細(xì)胞的分化。表觀遺傳在細(xì)胞分化中起重要作用,可在基因組DNA序列不發(fā)生變化的前提下,基因表達(dá)發(fā)生改變。在前體脂肪細(xì)胞分化過程中,表觀基因組也會隨細(xì)胞分化而發(fā)生變化。DNA甲基化和去甲基化是表觀遺傳的重要部分,這兩個過程相互平衡,維持了甲基化譜式的穩(wěn)定。主動去甲基化相關(guān)的基因MBD4和TDG具有堿基切除修復(fù)功能,是重要的轉(zhuǎn)葡糖基酶,在細(xì)胞分化中起重要作用,MBD4和TDG基因在豬前體脂肪細(xì)胞分化中的作用以及對相關(guān)基因表達(dá)水平的影響還沒有被驗證,因此,本文以豬前體脂肪細(xì)胞作為研究對象,分析MBD4或TDG基因?qū)χ紊傻挠绊懸约芭c細(xì)胞分化相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子C/EBPα、PPARγ、aP2基因mRNA表達(dá)水平及基因啟動子區(qū)甲基化水平的變化,以獲得MBD4和TDG基因在豬前體脂肪細(xì)胞分化過程中的作用。 采取1-7d軍牧一號仔豬皮下脂肪組織進(jìn)行體外分離、培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,實時熒光定量PCR結(jié)果表明,C/EBPα基因mRNA表達(dá)量在豬...

【文章頁數(shù)】:111 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 前體脂肪細(xì)胞分化及轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究進(jìn)展
        1.1 前體脂肪細(xì)胞分化過程
        1.2 前體脂肪細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
            1.2.1 CEBP 基因家族對前體脂肪細(xì)胞分化的調(diào)控
            1.2.2 PPARγ基因?qū)η绑w脂肪細(xì)胞分化的調(diào)控
            1.2.3 C/EBPs 和 PPARγ基因?qū)η绑w脂肪細(xì)胞分化的共調(diào)控作用
            1.2.4 aP2 基因在脂肪細(xì)胞分化過程中的調(diào)控作用
            1.2.5 與前體脂肪細(xì)胞分化相關(guān)的其它轉(zhuǎn)錄因子
        1.3 前體脂肪細(xì)胞分化的表觀遺傳學(xué)調(diào)控
            1.3.1 哺乳動物生長發(fā)育的表觀遺傳現(xiàn)象
            1.3.2 DNA 甲基化
            1.3.3 DNA 去甲基化
            1.3.4 前體脂肪細(xì)胞分化和脂肪生成的表觀遺傳學(xué)調(diào)控
            1.3.5 前體脂肪細(xì)胞分化中轉(zhuǎn)錄因子啟動子區(qū)甲基化與基因表達(dá)的關(guān)系
    第2章 MBD4 和 TDG 基因研究進(jìn)展
        2.1 MBD4基因研究進(jìn)展
            2.1.1 MBDs 家族
            2.1.2 MBD4 基因簡介
            2.1.3 MBD4 的作用底物
            2.1.4 MBD4 基因多態(tài)性
            2.1.5 MBD4 基因的調(diào)控
        2.2 TDG基因研究進(jìn)展
            2.2.1 TDG 基因的結(jié)構(gòu)和定位
            2.2.2 TDG 基因的酶活性
            2.2.3 TDG 基因的功能
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 豬前體脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)規(guī)律分析
        1.1 材料與方法
            1.1.1 材料
            1.1.2 方法
        1.2 結(jié)果
            1.2.1 豬前體脂肪細(xì)胞分離、培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化結(jié)果
            1.2.2 豬前體脂肪細(xì)胞總 RNA 提取與質(zhì)量檢測
            1.2.3 豬前體脂肪細(xì)胞分化過程中,相關(guān)基因 mRNA 表達(dá)量分析結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第2章 MBD4 基因在豬前體脂肪細(xì)胞分化中的作用
        2.1 材料與方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 方法
        2.2 結(jié)果
            2.2.1 siRNA 轉(zhuǎn)染序列篩選
            2.2.2 MBD4‐siRNA 轉(zhuǎn)染效果檢測
            2.2.3 敲減 MBD4 基因?qū)ωi前體脂肪細(xì)胞分化的影響
            2.2.4 敲減 MBD4 基因分析 C/EBPα、PPARγ、aP2 基因啟動子區(qū)甲基化水平
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第3章 TDG 基因在豬前體脂肪細(xì)胞分化中的作用
        3.1 材料與方法
            3.1.1 材料
            3.1.2 方法
        3.2 結(jié)果
            3.2.1 siRNA 轉(zhuǎn)染試劑篩選
            3.2.2 TDG‐siRNA 轉(zhuǎn)染效率檢測
            3.2.3 敲減 TDG 基因?qū)ωi前體脂肪細(xì)胞分化的影響
            3.2.4 敲減 TDG 基因,C/EBPα、PPARγ、aP2 基因啟動子區(qū)甲基化水平的變化
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介
攻讀博士期間發(fā)表的主要論文
致謝



本文編號:3794610

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