為研制一種高效、快捷、靈敏的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)檢測試劑盒,本研究根據(jù)FAdV-4的保守序列設計了一對引物及探針,并在下游引物標記FITC,探針標記Biotin,應用納米PCR技術結合橫向流動試紙條技術(LFD),優(yōu)化反應及雜交條件后建立了檢測FAdV-4的納米PCR-LFD方法,并組裝了FAdV-4納米PCR檢測試劑盒。同時對試劑盒進行了特異性、敏感性、批內(nèi)批間可重復性、穩(wěn)定性、保存期評估等試驗及臨床樣品檢測。特異性試驗表明,此試劑盒能夠特異性檢測出FAdV-4,而對于禽的其他主要病毒性及細菌性病原如雞傳染性喉氣管炎病毒(ILTV)、雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)、雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)、雞馬立克病病毒(MDV)、雞減蛋綜合征病毒(EDSV)、鴨瘟病毒(DPV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒H9亞型(AIV(H9))、禽呼腸孤病毒(ARV)、FAdV標準株(FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11)、雞大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(SA)、雞白痢沙門氏菌(SP)、雞毒支原體(MG)的檢測結果均為陰性。敏感性試驗表...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 樣品及病毒株
    1.3 納米PCR-LFD擴增條件和體系的優(yōu)化
        1.3.1 引物
        1.3.2 納米PCR反應及雜交反應
    1.4 FAdV-4納米PCR試劑盒的組裝
    1.5 FAdV-4納米PCR試劑盒特異性試驗
    1.6 FAdV-4納米PCR試劑盒敏感性試驗
    1.7 FAdV-4納米PCR試劑盒批內(nèi)與批間重復試驗
    1.8 FAdV-4納米PCR試劑盒穩(wěn)定性試驗
    1.9 FAdV-4納米PCR試劑盒保存條件試驗
    1.10 臨床樣品的檢測
2 結 果
    2.1 FAdV-4納米PCR反應體系和條件優(yōu)化結果
    2.2 FAdV-4納米PCR試劑盒的組裝
    2.3 FAdV-4納米PCR試劑盒特異性試驗結果
    2.4 FAdV-4納米PCR試劑盒敏感性試驗結果
    2.5 FAdV-4納米PCR試劑盒批內(nèi)、批間重復性試驗結果
    2.6 FAdV-4納米PCR試劑盒穩(wěn)定性試驗結果
    2.7 FAdV-4納米PCR試劑盒保存條件試驗結果
    2.8 臨床樣品檢測結果
3 討 論
4 結 論



本文編號：3792754