本研究旨在對(duì)枯草芽胞桿菌的發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化,從而提高其發(fā)酵液的酶活。而后通過(guò)固態(tài)發(fā)酵的方法,將其應(yīng)用到處理豆粕的步驟中,獲得了良好的效果。該研究對(duì)降低我國(guó)飼料行業(yè)成本,彌補(bǔ)飼料原料短缺,促進(jìn)相關(guān)畜牧行業(yè)發(fā)展有著重大的現(xiàn)實(shí)意義。 本研究以篩選細(xì)菌的多酶活性為出發(fā)點(diǎn),從實(shí)驗(yàn)室分離和保藏的一批芽胞桿菌中,通過(guò)功能篩選的方法分別鑒定了這些芽胞桿菌的不同酶活,選出了一株綜合活性最高的枯草芽胞桿菌BME-92,在實(shí)驗(yàn)室水平對(duì)該芽胞桿菌進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)其能夠分泌五種功能性酶,并且活性很高,這些酶包括蛋白酶,木聚糖酶,甘露聚糖酶,淀粉酶和纖維素酶。根據(jù)微生物發(fā)酵和培養(yǎng)的特點(diǎn),設(shè)計(jì)出一個(gè)能夠發(fā)酵枯草芽胞桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基配方(豆粕20g/L,麩皮20g/L,(NH4)2SO41g/L, CaCl26g/L, K2HPO40.3g/L, MnSO4·H2O0.2g/L, MgSO4-7H2O0.2g/L)。應(yīng)用Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法設(shè)計(jì)相結(jié)合的優(yōu)化方法,對(duì)該培養(yǎng)基配方進(jìn)行了優(yōu)化,確定了該培養(yǎng)基中影響枯草芽胞桿菌BME-92發(fā)酵產(chǎn)酶的主要因子及其最佳配方：豆粕17.3g/L, CaCl...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 前言
    1.1 枯草芽胞桿菌的應(yīng)用現(xiàn)狀
        1.1.1 枯草芽胞桿菌在養(yǎng)殖中酌應(yīng)用
        1.1.2 枯草芽胞桿菌在農(nóng)業(yè)生物防治中的應(yīng)用
    1.2 豆粕簡(jiǎn)介
        1.2.1 豆粕的營(yíng)養(yǎng)
        1.2.2 粕蛋白質(zhì)的組成
        1.2.3 豆粕氨基酸的組成
        1.2.4 粕的抗?fàn)I養(yǎng)因子
    1.3 發(fā)酵過(guò)程及優(yōu)化
        1.3.1 影響芽胞桿菌發(fā)酵的因素
        1.3.2 培養(yǎng)基對(duì)發(fā)酵的影響
        1.3.3 發(fā)酵條件對(duì)發(fā)酵的影響
        1.3.4 發(fā)酵優(yōu)化辦法
    1.4 本課題研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌種
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 溶液
        2.1.4 儀器設(shè)備
    2.2 高活性多產(chǎn)酶型菌株的篩選
        2.2.1 菌株的活化及培養(yǎng)
        2.2.2 目的菌株篩選
    2.3 目的菌株總DNA提取和16SrRNA基因鑒定
        2.3.1 基因組DNA的提取
        2.3.2 菌株16S rRNA基因鑒定
    2.4 目的菌株生長(zhǎng)曲線繪制
    2.5 目的菌株的酶活分析
        2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
        2.5.2 蛋白酶活性分析
        2.5.3 木聚糖酶活性分析
        2.5.4 甘露聚糖酶活性分析
        2.5.5 淀粉酶活性分析
        2.5.6 纖維素酶活性分析
    2.6 液態(tài)發(fā)酵條件
    2.7 液態(tài)發(fā)酵優(yōu)化
        2.7.1 發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
        2.7.2 發(fā)酵條件優(yōu)化
    2.8 固態(tài)發(fā)酵及產(chǎn)物品質(zhì)分析
        2.8.1 單糖含量的測(cè)定
        2.8.2 肽含量的測(cè)定
        2.8.3 脲酶活性的測(cè)定
        2.8.4 聚丙烯酰胺變性凝膠電泳法(SDS-PAGE)分析蛋白降解
    2.9 泥鰍飼養(yǎng)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
    3.1 多酶活菌株篩選結(jié)果
    3.2 BME-92菌株總DNA提取
    3.3 BME-92菌株16SrRNA基因鑒定
    3.4 枯草芽胞桿菌BME-92基本形態(tài)和生長(zhǎng)曲線繪制
    3.5 枯草芽胞桿菌BME-92液態(tài)發(fā)酵優(yōu)化
        3.5.1 液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
        3.5.2 液態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化
    3.6 優(yōu)化后發(fā)酵液酶活分析
        3.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.6.2 酶活分析
    3.7 固態(tài)發(fā)酵及產(chǎn)物品質(zhì)分析
        3.7.1 單糖和肽含量的測(cè)定
        3.7.2 抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的測(cè)定
        3.7.3 大分子蛋白降解分析
    3.8 泥鰍飼養(yǎng)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
4 討論
參考文獻(xiàn)
研究成果
致謝



本文編號(hào)：3791190