肺臟是人體與外界進行氣體交換的唯一器官,而肺臟氣道粘膜上皮經常暴露于微生物、過敏原及污染源之中,易被侵蝕而造成損傷,同時肺臟上皮本身也在不斷進行著自我修復來維持肺臟功能的正常。在這一損傷修復過程中,氣道上皮干/先祖細胞(Airway epithelial stem/progenitor cell, EpiSPC)起著至關重要的作用。由此可見,分離鑒定EpiSPC的特性對了解氣道EpiSPC功能以及肺臟疾病的治療有著非常重要的意義。然而,由于臨床人肺臟組織來源困難,這極大地限制了其肺臟組織形態(tài)學與干細胞生物學特性等相關研究；而在常用的動物模型中,豬不但來源廣泛,而且它的肺臟無論在大小、解剖結構、生理特性、還是在細胞生物學特征上都與人類肺臟極為相近,是人類肺臟的最佳研究模型之一。因此,我們對豬氣道上皮細胞形態(tài)組成學及干細胞特異性抗原標記的篩選進行了初步的研究,這對分離鑒定豬肺臟氣道上皮干細胞／先祖細胞亞群及其生物學特性研究有重要的意義,并為進一步研究人類肺臟干細胞生物學特性及其在維持肺臟動態(tài)平衡、肺臟疾病發(fā)生機制和肺臟組織工程等方面的研究奠定了一定的理論基礎。 通過試驗獲得以下結果： 1....

【文章頁數】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 豬作為動物模型及其異種組織器官的替代來源的研究現狀
    1.2 豬肺臟形態(tài)學研究
        1.2.1 豬肺臟的形態(tài)學特征
        1.2.2 豬肺臟上皮細胞的組成
    1.3 干細胞
        1.3.1 肺臟干細胞
    1.4 肺臟干細胞內EpiSPC聚集的微環(huán)境
        1.4.1 微環(huán)境對干細胞的影響
        1.4.2 肺臟干細胞巢穴
        1.4.3 氣道上皮中多潛能的EpiSPC
    1.5 干細胞與肺疾病
    1.6 本課題研究的意義
第二章 豬氣道上皮細胞的形態(tài)學研究
    引言
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 主要試劑與儀器
    2.2 實驗方法與步驟
        2.2.1 豬氣道組織切片制作
        2.2.2 豬氣道的HE染色
        2.2.3 豬氣道組織PAS染色
        2.2.4 IHC鑒定豬氣道主要上皮細胞類型
        2.2.5 統計分析豬氣道不同區(qū)段主要上皮細胞的組成比例
    2.3 實驗結果
        2.3.1 豬肺臟組織的HE染色
        2.3.2 豬氣道組織PAS染色
        2.3.3 豬氣道主要上皮細胞的IHC染色
        2.3.4 豬氣道主要上皮細胞組成比例的統計分析
    2.4 討論與小結
        2.4.1 討論
        2.4.2 小結
第三章 豬氣道上皮細胞中其干細胞特異性抗原篩選的研究
    引言
    3.1 實驗材料
        3.1.1 主要儀器設備
        3.1.2 主要試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 豬氣道組織處理與冰凍切片制作
        3.2.2 豬氣道上皮細胞爬片的制作
        3.2.3 豬氣道上皮的IF或ICC單染
        3.2.4 豬氣道上皮的細胞爬片免疫熒光雙染
    3.3 實驗結果
        3.3.1 豬氣道上皮細胞類型與特異性EpiSPC抗原的表達
        3.3.2 豬氣管上皮細胞的免疫細胞熒光染色
        3.3.3 豬肺臟EpiSPC候選細胞亞群的免疫細胞熒染色鑒定
    3.4 討論與小結
        3.4.1 討論
        3.4.2 小結
結論
參考文獻
致謝
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本文編號：3782557