發(fā)布時(shí)間：2023-04-03 19:53

　　分枝桿菌噬菌體是侵染分枝桿菌的病毒。在治療分枝桿菌所致疾病方面具有一定的研究及開發(fā)價(jià)值，同時(shí)它也是研究分枝桿菌遺傳學(xué)的工具。近些年，因抗生素的大量使用，細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生和傳播也越來(lái)越嚴(yán)重，人們對(duì)其關(guān)注也逐漸增多，而噬菌體裂解酶作為一種既不易產(chǎn)生耐藥性，又具有獨(dú)特作用的抗菌劑備受人們青睞。LysA和LysB為分枝桿菌噬菌體L5的兩種細(xì)胞內(nèi)溶素，具有裂解酶的特性，具備作為抗菌劑的潛力。本研究通過(guò)原核表達(dá)獲得了純化的LysA和LysB，并對(duì)其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了初步研究： 1、采用常規(guī)方法，擴(kuò)增出分枝桿菌噬菌體L5的lysA基因（1431bp）和lysB基因（1029bp），成功構(gòu)建克隆載體pMD19T-lysA和pMD19T-lysB。預(yù)測(cè)表明LysA、LysB均有信號(hào)肽，為分泌蛋白；LysA全長(zhǎng)477aa，有2個(gè)α螺旋，7個(gè)β折疊，有溶解酶活性；LysB全長(zhǎng)343aa，具有6個(gè)α螺旋，6個(gè)β折疊，有脂肪酶活性。 2、采用pET-28a表達(dá)載體用大腸桿菌成功表達(dá)出56.09kDa的LysA和41.32kDa的LysB，LysA、LysB均以包涵體形式存在。優(yōu)化最適誘導(dǎo)條件為：37℃，1.0mmo...

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 分枝桿菌研究概況
    1.2 噬菌體裂解酶研究概況
    1.3 分枝桿菌噬菌體裂解酶研究進(jìn)展
    1.4 研究的目的與意義
第二章 分枝桿菌噬菌體 L5 lysA、lysB 基因的克隆及序列分析
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 分枝桿菌噬菌體 L5 LysA、LysB 的表達(dá)、純化及活性研究
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3781047