世界衛(wèi)生組織稱全世界大約有一半抗菌藥物用于農(nóng)場(chǎng)，其中，大多數(shù)以亞治療劑量添加于食品和動(dòng)物飼料中，以此來達(dá)到預(yù)防疾病或是促生長(zhǎng)的目的�？咕幬镩L(zhǎng)期、廣泛的不合理使用及抗菌藥物選擇壓力等原因，使大腸桿菌耐藥株不斷增加、耐藥譜不斷擴(kuò)大及多重耐藥株的大量出現(xiàn)，耐藥性的產(chǎn)生給防治疾病帶來了嚴(yán)重的問題，抗菌藥物在選擇壓力下，產(chǎn)生耐藥性，使得耐藥細(xì)菌的種類和數(shù)量增加，且將耐藥基因傳其后代，形成“耐藥菌庫(kù)”。因此，減少細(xì)菌的耐藥性，已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。著眼目前養(yǎng)殖行業(yè)的實(shí)際發(fā)展情況，合理用藥是目前最適合的方法。其中聯(lián)合用藥被認(rèn)為是解決防止細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的有效方法。 因此，積極開展大腸桿菌耐藥性監(jiān)測(cè)，將有利于遏制大腸桿菌耐藥性發(fā)生發(fā)展，優(yōu)化抗菌藥物的合理使用，通過聯(lián)合用藥有助于防治大腸桿菌病。 本文采集了山東部分地區(qū)病禽的病料，經(jīng)細(xì)菌的分離純化，運(yùn)用細(xì)菌培養(yǎng)特性試驗(yàn)、生化試驗(yàn)等方法鑒定臨床分離菌株79株。其中致病性大腸桿菌55株，通過WHO推薦的Kirby-Bauer(K-B)法測(cè)定79株菌株對(duì)18種抗菌藥物的耐藥性，采用微量肉湯稀釋法測(cè)定痢菌凈、頭孢噻肟鈉、左氟沙星、氟苯尼考、新霉素、阿奇霉素、粘桿...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
符號(hào)及縮略詞
目錄
中文摘要
Abstract
前言
    1.1 大腸桿菌的抗原及毒力因子
    1.2 大腸桿菌的培養(yǎng)特性及生化特點(diǎn)
        1.2.1 大腸桿菌的生長(zhǎng)培養(yǎng)特性
        1.2.2 生化反應(yīng)特點(diǎn)
    1.3 大腸桿菌的致病性
    1.4 大腸桿菌的檢測(cè)方法
    1.5 大腸桿菌耐藥性
        1.5.1 耐藥性的產(chǎn)生
        1.5.2 耐藥性產(chǎn)生的遺傳機(jī)制
        1.5.3 大腸桿菌耐藥性的現(xiàn)狀及耐藥性的檢測(cè)意義
            1.5.3.1 檢測(cè)方法
            1.5.3.2 近年來大腸埃希氏菌藥敏試驗(yàn)情況
    1.6 體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)
        1.6.1 體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的意義和目的
        1.6.2 體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的方法
        1.6.3 體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)中各種藥物的介紹
            1.6.3.1 喹諾酮類
            1.6.3.2 頭孢類
            1.6.3.3 氨基糖苷類
            1.6.3.4 四環(huán)素類抗生素
            1.6.3.5 酰胺醇類抗生素
            1.6.3.6 大環(huán)內(nèi)酯類抗生素
            1.6.3.7 多肽類抗生素
            1.6.3.8 喹噁林類
        1.6.4 抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用的理論依據(jù)
        1.6.5 聯(lián)合用藥的適應(yīng)癥
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 試劑及其他用品
        2.1.3 抗菌藥物
        2.1.4 主要試劑及培養(yǎng)基的配制
        2.1.5 主要儀器與設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 大腸桿菌的分離
            2.2.1.1 大腸桿菌的樣本采集
            2.2.1.2 大腸桿菌的分離培養(yǎng)
        2.2.2 大腸桿菌的鑒定
            2.2.2.1 革蘭氏染色、鏡檢
            2.2.2.2 生化鑒定
            2.2.2.3 致病性試驗(yàn)
            2.2.2.4 大腸桿菌的保存
        2.2.3 藥敏試驗(yàn)
        2.2.4 分子鑒定試驗(yàn)
            2.2.4.1 設(shè)計(jì)引物
            2.2.4.2 PCR 產(chǎn)物的純化回收
            2.2.4.3 目的基因的連接轉(zhuǎn)化及鑒定
            2.2.4.4 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞（E.coli DH5α）的制備
            2.2.4.5 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化
            2.2.4.6 重組質(zhì)粒 DNA 的提取
            2.2.4.7 重組質(zhì)粒的鑒定
            2.2.4.8 陽(yáng)性克隆序列的測(cè)序及結(jié)果分析
        2.2.5 聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的研究
            2.2.5.1 抗菌藥物儲(chǔ)備液配制
            2.2.5.2 大腸桿菌對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的測(cè)定
            2.2.5.3 細(xì)菌懸液的制備
            2.2.5.4 最小抑菌濃度的測(cè)定
            2.2.5.5 八種抗生素兩兩組合的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)
            2.2.5.6 具體操作
3 結(jié)果與分析
    3.1 分離鑒定（鏡檢、生化試驗(yàn)、培養(yǎng)結(jié)果）
    3.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
    3.3 聯(lián)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 八種抗菌藥物對(duì)選取的 12 株大腸桿菌最小抑菌濃度 MIC 的測(cè)定
        3.3.2 體外聯(lián)合藥敏試驗(yàn)研究結(jié)果
            3.3.2.1 八種抗菌藥物對(duì)標(biāo)準(zhǔn)株大腸桿菌 ATCC25922 的體外聯(lián)合試驗(yàn)的結(jié)果
            3.3.2.2 八種抗菌藥物兩兩組合分別對(duì) 12 株臨床分離株大腸桿菌的體外聯(lián)合試驗(yàn)的結(jié)果
    3.4 聯(lián)合藥敏藥物療效動(dòng)物試驗(yàn)
4 討論
    4.1 大腸桿菌耐藥性討論
    4.2 防治措施
    4.3 聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的研究討論
    4.4 注意理論和臨床的差異
    4.5 影響結(jié)果的因素
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3778238