河南省PRV血清學(xué)調(diào)查及鑒別野毒/疫苗毒株二重FQ-PCR方法的建立
發(fā)布時間:2023-03-29 22:29
為了更好的了解河南省豬偽狂犬的流行狀況,本次調(diào)查通過對本實驗室2007-2014年以來血清學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總,按照不同時間、不同地區(qū)、不同生長階段豬群劃分,從時間、空間、畜間三個角度全面分析近幾年河南省PR的流行趨勢。比較分析得出:2007年-2010年河南省豬偽狂犬g E抗體陽性率呈逐年下降趨勢,但在2010年以后河南省豬偽狂犬g E抗體陽性率持續(xù)升高;將2014年檢測1373頭豬血清抗體數(shù)據(jù),按照區(qū)域劃分為豫東、豫西、豫北、豫南、豫中5個地區(qū),結(jié)果顯示豫北地區(qū)PRV野毒感染率高達(dá)66.67%,其次是豫中和豫南地區(qū)分別59.51%、53.9%;將2014年766頭背景清晰的血清學(xué)數(shù)據(jù),按照豬不同飼養(yǎng)階段進(jìn)行分群,得出母豬和后備母豬的陽性率分別高達(dá)64.21、50%,其次是育肥豬野毒的陽性率為49.01%。雖然疫苗的免疫接種是預(yù)防和控制豬偽狂犬病的根本措施,但近幾年P(guān)R仍呈高爆發(fā)趨勢,因此如何鑒別野毒和疫苗毒株感染成為了一個重要的問題。本研究根據(jù)Gen Bank中PRV-g D/g E基因序列,選取高度保守序列設(shè)計2對特異性引物和2條MGB探針。采用矩陣法篩選最佳引物和探針濃度,優(yōu)化最佳退...
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 病毒的基本特征
1.1.1 病原特點
1.1.2 結(jié)構(gòu)蛋白與功能
1.2 流行特點
1.2.1 傳染源
1.2.2 易感動物
1.2.3 傳播途徑
1.2.4 流行現(xiàn)狀
1.3 診斷方法
1.3.1 病原分離鑒定
1.3.2 動物接種
1.3.3 血清學(xué)方法
1.3.4 分子生物學(xué)方法
1.4 防控現(xiàn)狀
1.4.1 加強日常管理
1.4.2 減少應(yīng)激因素
1.4.3 制定合理的免疫程序,使用高質(zhì)量疫苗
1.4.4 豬群的凈化
第2章 河南省豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查
2.1 數(shù)據(jù)來源及調(diào)查方法
2.1.1 數(shù)據(jù)來源
2.1.2 調(diào)查方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 不同年份豬偽狂犬gE抗體陽性率
2.2.2 不同地區(qū)豬場偽狂犬gE抗體陽性率
2.2.3 不同豬群偽狂犬gE抗體陽性率
2.3 討論
2.3.1 2007-2014年河南省PRV流行趨勢
2.3.2 2014年河南各地區(qū)PRV gE抗體陽性率
2.3.3 不同生長階段豬群PRVg E抗體陽性率
第3章 鑒別豬偽狂犬野毒/疫苗株二重FQ-PCR方法的建立
3.1 材料
3.1.1 菌(毒)株及樣品
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要設(shè)備
3.2 方法
3.2.1 引物和探針的設(shè)計與合成
3.2.2 PRV標(biāo)準(zhǔn)陽性模板的制備
3.2.3 反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.2.4 靈敏度測定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.2.5 特異性試驗
3.2.6 穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗
3.2.7 臨床應(yīng)用試驗
3.3 結(jié)果
3.3.1 PCR擴增結(jié)果
3.3.2 菌液鑒定結(jié)果
3.3.3 質(zhì)粒DNA濃度的測定
3.3.4 最佳反應(yīng)體系和條件的確定
3.3.5 靈敏度測定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.3.6 特異性試驗
3.3.7 穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗
3.3.8 臨床應(yīng)用試驗
3.4 討論
第4章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果
本文編號:3774619
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 病毒的基本特征
1.1.1 病原特點
1.1.2 結(jié)構(gòu)蛋白與功能
1.2 流行特點
1.2.1 傳染源
1.2.2 易感動物
1.2.3 傳播途徑
1.2.4 流行現(xiàn)狀
1.3 診斷方法
1.3.1 病原分離鑒定
1.3.2 動物接種
1.3.3 血清學(xué)方法
1.3.4 分子生物學(xué)方法
1.4 防控現(xiàn)狀
1.4.1 加強日常管理
1.4.2 減少應(yīng)激因素
1.4.3 制定合理的免疫程序,使用高質(zhì)量疫苗
1.4.4 豬群的凈化
第2章 河南省豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查
2.1 數(shù)據(jù)來源及調(diào)查方法
2.1.1 數(shù)據(jù)來源
2.1.2 調(diào)查方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 不同年份豬偽狂犬gE抗體陽性率
2.2.2 不同地區(qū)豬場偽狂犬gE抗體陽性率
2.2.3 不同豬群偽狂犬gE抗體陽性率
2.3 討論
2.3.1 2007-2014年河南省PRV流行趨勢
2.3.2 2014年河南各地區(qū)PRV gE抗體陽性率
2.3.3 不同生長階段豬群PRVg E抗體陽性率
第3章 鑒別豬偽狂犬野毒/疫苗株二重FQ-PCR方法的建立
3.1 材料
3.1.1 菌(毒)株及樣品
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要設(shè)備
3.2 方法
3.2.1 引物和探針的設(shè)計與合成
3.2.2 PRV標(biāo)準(zhǔn)陽性模板的制備
3.2.3 反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.2.4 靈敏度測定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.2.5 特異性試驗
3.2.6 穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗
3.2.7 臨床應(yīng)用試驗
3.3 結(jié)果
3.3.1 PCR擴增結(jié)果
3.3.2 菌液鑒定結(jié)果
3.3.3 質(zhì)粒DNA濃度的測定
3.3.4 最佳反應(yīng)體系和條件的確定
3.3.5 靈敏度測定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
3.3.6 特異性試驗
3.3.7 穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗
3.3.8 臨床應(yīng)用試驗
3.4 討論
第4章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果
本文編號:3774619
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