國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)為奶牛胎衣不下(retained fetal membrane,RFM)的主要病理學(xué)基礎(chǔ)是母體胎盤和胎兒胎盤之間的黏連,而造成黏連的主要物質(zhì)是Ⅳ型膠原蛋白(Collagen-Ⅳ,Col-Ⅳ)。黏著斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)是一種125 kDa胞質(zhì)內(nèi)非受體型酪氨酸激酶,位于細(xì)胞間黏附處或細(xì)胞間基質(zhì)黏附處,可調(diào)控MMP-2和MMP-9的活性,而MMP-2和MMP-9是Col-Ⅳ水解的關(guān)鍵酶,參與細(xì)胞之間的黏連過程。那么FAK在奶牛RFM過程中如何發(fā)揮作用,具體的作用機(jī)制如何尚不清楚。因此,本研究擬通過檢測(cè)RFM奶牛母體胎盤組織中FAK信號(hào)通路各關(guān)鍵因子及COL-Ⅳ表達(dá)變化,明確FAK及Col-Ⅳ與奶牛RFM的關(guān)系,并在建立奶牛原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞模型的基礎(chǔ)上,以FAK信號(hào)通路和Col-Ⅳ為研究對(duì)象,運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù),通過過表達(dá)和基因沉默F(xiàn)AK,檢測(cè)FAK信號(hào)通路相關(guān)因子和Col-Ⅳ的表達(dá)變化,闡明奶牛胎衣外排過程中FAK信號(hào)通路對(duì)Col-Ⅳ水解調(diào)控的分子機(jī)制,從而為豐富奶牛RFM病因?qū)W提供理論依據(jù)。選取胎次、體重、年齡和泌乳量都相近,且無...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 RFM的研究進(jìn)展
        1.2.1 RFM的流行病學(xué)特點(diǎn)
        1.2.2 奶牛的胎盤結(jié)構(gòu)
        1.2.3 RFM的臨床特征及并發(fā)癥
        1.2.4 RFM病因?qū)W
        1.2.5 RFM的防治
    1.3 FAK的研究進(jìn)展
        1.3.1 FAK在細(xì)胞存活和增殖中的信號(hào)傳導(dǎo)
        1.3.2 FAK與細(xì)胞極性和遷移
        1.3.3 FAK與細(xì)胞黏附
    1.4 FAK與奶牛RFM
2 RFM奶牛母體胎盤中FAK信號(hào)通路關(guān)鍵信號(hào)分子變化及與疾病發(fā)生相關(guān)性的研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 免疫組織化學(xué)結(jié)果
        2.2.2 總RNA提取與濃度測(cè)定結(jié)果
        2.2.3 Q-PCR檢測(cè)FAK信號(hào)通路關(guān)鍵分子和Col-Ⅳ的 mRNA表達(dá)變化結(jié)果
        2.2.4 總蛋白提取與濃度測(cè)定結(jié)果
        2.2.5 奶牛母體胎盤組織中FAK信號(hào)通路關(guān)鍵分子和Col-Ⅳ蛋白的表達(dá)水平
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
3 FAK信號(hào)通路對(duì)Col-Ⅳ蛋白表達(dá)調(diào)控作用的研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 奶牛UCE原代細(xì)胞鑒定結(jié)果
        3.2.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力以及確定FAK激活劑與抑制劑最佳濃度的結(jié)果
        3.2.3 FAK低表達(dá)和過表達(dá)影響通路關(guān)鍵因子及Col-Ⅳ表達(dá)的結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3770054