發(fā)布時間：2023-03-24 04:06

　　雞沙門氏菌病是由沙門氏菌屬中的一種或幾種沙門氏菌引起的一類急性或慢性疾病的總稱,包括雞白痢、雞傷寒和雞副傷寒。臨床上以敗血癥和腸炎最為常見。本病在世界各地普遍存在,它不僅嚴(yán)重危害養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展,而且還可以通過禽產(chǎn)品進(jìn)入食物鏈,并嚴(yán)重威脅到人類的健康,是一種人畜共患的傳染病。長期以來,在我國的大部分雞場中都是通過采用抗菌藥物來防治此病的。由于抗菌藥物的不合理使用,已造成了沙門氏菌耐藥性的不斷增強(qiáng),甚至還表現(xiàn)出多重耐藥性,如此使得防治該病變得極其困難。近些年,國外許多國家已經(jīng)使用疫苗對禽類進(jìn)行免疫并取得了較好的效果。本試驗(yàn)對四川省7個地區(qū)26個雞場中的108份病料進(jìn)行了沙門氏菌分離與鑒定,并對其流行株進(jìn)行了弱毒株培育、弱毒疫苗制備等研究,旨在為該地區(qū)雞沙門氏菌病的流行病學(xué)調(diào)查、疫苗預(yù)防和治療提供參考資料。采用沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基,分別對來自26個養(yǎng)雞場的108份病料進(jìn)行細(xì)菌分離,并對分離菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、PCR檢測、生化鑒定、血清型鑒定、藥敏試驗(yàn)和致病性試驗(yàn)。結(jié)果顯示,從108份病料中鑒定出了28株沙門氏菌,分離率為25.9%,其中有9株符合雞白痢沙門氏菌的生化特性,19株菌符合雞傷寒沙門氏...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 前言
    2 病原學(xué)
        2.1 病原分類
        2.2 形態(tài)特征
        2.3 生長特性
        2.4 生化特性
        2.5 抵抗力
        2.6 抗原結(jié)構(gòu)
            2.6.1 O抗原
            2.6.2 H抗原
            2.6.3 Vi抗原
        2.7 抗原變異性
            2.7.1 H-O變異
            2.7.2 S-R變異
            2.7.3 位相變異
        2.8 毒力測定方法
            2.8.1 最小致死量
            2.8.2 半數(shù)致死量
    3 雞沙門氏菌病的特點(diǎn)
        3.1 流行病學(xué)特點(diǎn)
        3.2 臨床癥狀
            3.2.1 雞白痢
            3.2.2 雞傷寒
            3.2.3 雞副傷寒
        3.3 病理變化
    4 沙門氏菌減毒研究進(jìn)展
        4.1 化學(xué)誘變減毒
        4.2 抗生素誘導(dǎo)減毒
        4.3 基因工程減毒
    5 預(yù)防和控制
        5.1 管理措施
            5.1.1 凈化雞群
            5.1.2 嚴(yán)格隔離消毒制度
        5.2 疫苗免疫
        5.3 藥物防治
    6 研究目的與意義
第二部分 試驗(yàn)研究
    第一章 雞沙門氏菌的分離鑒定
        1 材料
            1.1 病料
            1.2 主要儀器
            1.3 主要試劑
            1.4 培養(yǎng)基及用途
            1.5 引物
            1.6 沙門氏菌屬診斷血清
            1.7 試驗(yàn)動物
        2 方法
            2.1 細(xì)菌的分離
            2.2 PCR檢測
                2.2.1 PCR模板制備
                2.2.2 PCR擴(kuò)增
            2.3 生化試驗(yàn)
            2.4 血清學(xué)試驗(yàn)
                2.4.1 菌液制備
                2.4.2 血清型鑒定
            2.5 藥物敏感性試驗(yàn)
            2.6 致病性試驗(yàn)
            2.7 沙門氏菌分離鑒定情況統(tǒng)計(jì)
        3 結(jié)果與分析
            3.1 細(xì)菌的分離
            3.2 目的片段PCR擴(kuò)增
            3.3 生化試驗(yàn)
            3.4 血清型鑒定
            3.5 藥敏試驗(yàn)
            3.6 致病性試驗(yàn)
            3.7 雞沙門氏菌分離鑒定情況統(tǒng)計(jì)
        4 討論
        5 小結(jié)
    第二章 雞傷寒沙門氏菌弱毒株的培育
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 主要儀器
            1.3 試劑
            1.4 培養(yǎng)基
            1.5 誘變劑的配制
                1.5.1 0.1M亞硝酸鈉溶液
                1.5.2 1M pH4.4醋酸緩沖液
            1.6 試驗(yàn)動物
        2 方法
            2.1 出發(fā)菌株的篩選
                2.1.1 細(xì)菌毒力檢測
                2.1.2 免疫原性檢測
            2.2 弱毒株的培育
                2.2.1 菌懸液制備
                2.2.2 紫外線誘變法
                2.2.3 亞硝酸誘變法
                2.2.4 紫外線-亞硝酸復(fù)合誘變法
                2.2.5 初步篩選弱毒株
                2.2.6 毒力檢測
                2.2.7 傳代培養(yǎng)
            2.3 弱毒株特性的檢測
                2.3.1 菌落形態(tài)特征
                2.3.2 生化特性
                2.3.3 毒力
                2.3.4 穩(wěn)定性
                2.3.5 免疫原性
        3 結(jié)果與分析
            3.1 出發(fā)菌株的篩選
                3.1.1 細(xì)菌毒力檢測
                3.1.2 免疫原性檢測
            3.2 弱毒株的培育
                3.2.1 紫外線誘變法
                3.2.2 亞硝酸誘變法
                3.2.3 紫外線-亞硝酸復(fù)合誘變法
                3.2.4 初步篩選弱毒株
                3.2.5 毒力檢測
                3.2.6 傳代培養(yǎng)菌的檢測
            3.3 弱毒株特性的檢測
                3.3.1 菌落形態(tài)特征
                3.3.2 生化特性
                3.3.3 毒力
                3.3.4 穩(wěn)定性
                3.3.5 免疫原性
        4 討論
        5 小結(jié)
    第三章 雞傷寒沙門氏菌弱毒疫苗的研制及其指標(biāo)檢驗(yàn)
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 主要儀器
            1.3 試劑
            1.4 培養(yǎng)基
            1.5 耐熱凍干保護(hù)劑
                1.5.1 配方
                1.5.2 配制方法
            1.6 試驗(yàn)動物
        2 方法
            2.1 種子液制備
            2.2 疫苗用菌液制備
            2.3 配苗、分裝及凍干
                2.3.1 耐熱凍干保護(hù)劑疫苗濃度的篩選
                2.3.2 耐熱凍干保護(hù)劑與菌體感作時間的篩選
                2.3.3 耐熱凍干保護(hù)劑疫苗分裝量的篩選
            2.4 成品疫苗檢驗(yàn)
                2.4.1 物理性狀
                2.4.2 活菌計(jì)數(shù)
                2.4.3 貯藏與有效期檢驗(yàn)
                2.4.4 安全性檢驗(yàn)
                2.4.5 最適免疫劑量檢驗(yàn)
                2.4.6 免疫保護(hù)期檢驗(yàn)
                2.4.7 疫苗菌體內(nèi)清除時間檢驗(yàn)
                2.4.8 免疫雞增重情況檢驗(yàn)
                2.4.9 交叉保護(hù)試驗(yàn)
        3 結(jié)果與分析
            3.1 配苗、分裝及凍干
                3.1.1 耐熱凍干保護(hù)劑疫苗濃度的篩選
                3.1.2 耐熱凍干保護(hù)劑與菌體感作時間的篩選
                3.1.3 耐熱凍干保護(hù)劑疫苗分裝量的篩選
            3.2 成品疫苗檢驗(yàn)
                3.2.1 物理性狀
                3.2.2 活菌計(jì)數(shù)
                3.2.3 貯藏與有效期檢驗(yàn)
                3.2.4 安全性檢驗(yàn)
                3.2.5 最適免疫劑量檢驗(yàn)
                3.2.6 免疫保護(hù)期檢驗(yàn)
                3.2.7 疫苗菌體內(nèi)清除時間檢驗(yàn)
                3.2.8 免疫雞增重情況檢驗(yàn)
                3.2.9 交叉保護(hù)試驗(yàn)
        4 討論
        5 小結(jié)
第三部分 參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3769410