沙門氏菌的各種血清型可對人、畜、禽和野生動(dòng)物引起疾病,沙門氏菌引發(fā)的疾病遍布世界各地,許多血清型的沙門氏菌可使人感染并發(fā)生食物中毒。近年來,禽沙門氏菌病的發(fā)生日趨嚴(yán)重,雞白痢是其中的一種,而且此病在流行、發(fā)生、臨床表現(xiàn)及剖檢變化、藥物敏感性等許多方面都發(fā)生了一些新的特點(diǎn),目前在雞白痢病方面還沒有一種有效的疫苗防治。本研究對收集的禽源沙門氏菌進(jìn)行鑒定,耐藥性和毒力基因的分析,并篩選了其中兩株雞白痢沙門氏菌,運(yùn)用病理組織學(xué)和免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行致病性研究。1、禽源沙門氏菌的鑒定及血清型分析本試驗(yàn)對收集的10株背景清晰的禽源沙門氏菌,進(jìn)行培養(yǎng),革蘭氏染色、PCR鑒定、血清型測序分析及生化實(shí)驗(yàn),并以腸炎沙門氏菌參考標(biāo)準(zhǔn)株作為對照。結(jié)果表明雞源沙門氏菌中有2株為雞白痢沙門氏菌,1株為豬霍亂沙門氏菌;鴨源沙門氏菌中有1株為腸炎沙門氏菌,6株為鼠傷寒沙門氏菌。2、禽源沙門氏菌的耐藥基因檢測及耐藥性分析通過K-B(Kirby-Bauer)法對收集的10株沙門氏菌進(jìn)行14種藥物敏感試驗(yàn)及11種對應(yīng)的耐藥基因PCR檢測,并以大腸桿菌ATCC25922作為對照。檢測結(jié)果表明對鏈霉素的耐藥率最高,達(dá)到了70%...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
    1 沙門氏菌概述
        1.1 沙門氏菌生物學(xué)特性
        1.2 沙門氏菌病原學(xué)特性
        1.3 沙門氏菌的鑒定
    2 沙門氏菌的耐藥性
    3 沙門氏菌毒力因子研究
        3.1 毒力質(zhì)粒
        3.2 毒素
        3.3 鞭毛
        3.4 菌毛
        3.5 毒力島
    4 雞白痢沙門氏菌致病性
        4.1 臨床特征及病理變化
        4.2 致病機(jī)制
        4.3 雞白痢沙門氏菌毒力蛋白SpiC在致病性中的作用
        4.4 雞白痢沙門氏菌與宿主細(xì)胞死亡
    5 研究目的與意義
材料和方法
    1 材料
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 供試菌株
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器設(shè)備
        1.5 藥敏紙片
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 主要試劑的配置
        2.2 禽源沙門氏菌的復(fù)蘇培養(yǎng)及鑒定
            2.2.1 細(xì)菌復(fù)蘇及培養(yǎng)
            2.2.2 革蘭氏染色
            2.2.3 PCR鑒定
            2.2.4 生化鑒定
        2.3 禽源沙門氏菌的藥物敏感性試驗(yàn)
        2.4 禽源沙門氏菌的耐藥基因檢測
            2.4.1 耐藥基因分類
            2.4.2 引物合成
            2.4.3 PCR的擴(kuò)增
        2.5 禽源沙門氏菌的毒力基因檢測
            2.5.1 引物合成
            2.5.2 PCR的擴(kuò)增
        2.6 雞白痢沙門氏菌致病性試驗(yàn)
            2.6.1 生長曲線的測定
            2.6.2 動(dòng)物致死性感染試驗(yàn)
            2.6.3 半數(shù)致死量(LD50)的測定
            2.6.4 動(dòng)物感染模型的建立
            2.6.5 載菌量的測定
            2.6.6 HE染色
            2.6.7 免疫組織化學(xué)染色
    3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理
結(jié)果與分析
    1 禽源沙門氏菌鑒定
        1.1 革蘭氏染色
        1.2 PCR鑒定結(jié)果
        1.3 生化鑒定結(jié)果
    2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
    3 耐藥基因檢測結(jié)果
    4 毒力基因檢測結(jié)果
    5 致病性試驗(yàn)結(jié)果
        5.1 雞白痢沙門氏菌生長曲線的測定
        5.2 致死性感染結(jié)果
        5.3 LD50測定結(jié)果
        5.4 感染雞白痢沙門氏菌后雛雞的臨床及剖檢變化
            5.4.1 雞白痢沙門氏菌S0701株感染組的臨床及剖檢變化
            5.4.2 雞白痢沙門氏菌S0702株感染組的臨床及剖檢變化
        5.5 感染雞白痢沙門氏菌后組織病理學(xué)變化
            5.5.1 雞白痢沙門氏菌S0701株感染雛雞的組織病理學(xué)變化
            5.5.2 雞白痢沙門氏菌S0702株感染雛雞的組織病理學(xué)變化
        5.6 乳酸環(huán)丙沙星給藥后肝臟和盲腸載菌量的變化
        5.7 IHC檢測感染后肝組織中毒力蛋白SpiC的表達(dá)變化
            5.7.1 雞白痢沙門氏菌S0701株感染后毒力蛋白SpiC的表達(dá)變化
            5.7.2 雞白痢沙門氏菌S0702感染后毒力蛋白SpiC的表達(dá)變化
        5.8 肝組織損傷與毒力蛋白SpiC的分布關(guān)系
        5.9 IHC檢測感染后肝組織中Caspase-1的表達(dá)變化
            5.9.1 IHC檢測S0701株感染后肝組織中Caspase-1的表達(dá)變化
            5.9.2 IHC檢測S0702株感染后肝組織中Caspase-1的表達(dá)變化
        5.10 IHC檢測感染后肝組織中Caspase-3的表達(dá)變化
            5.10.1 IHC檢測S0701株感染后肝組織中Caspase-3的表達(dá)變化
            5.10.2 IHC檢測S0702株感染后肝組織中Caspase-3的表達(dá)變化
討論
    1 禽源沙門氏菌的耐藥性與耐藥基因
    2 禽源沙門氏菌毒力基因
    3 雛雞感染雞白痢沙門氏菌后動(dòng)態(tài)組織病理學(xué)變化
    4 雛雞感染雞白痢沙門氏菌后肝損傷與毒力蛋白SpiC分布關(guān)系
    5 雛雞感染雞白痢沙門氏菌后肝組織中細(xì)胞死亡相關(guān)指標(biāo)分析
        5.1 雛雞感染雞白痢沙門氏菌后Caspase-1動(dòng)態(tài)變化
        5.2 雛雞感染雞白痢沙門氏菌后Caspase-3動(dòng)態(tài)變化
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3769206