我國(guó)擁有世界上最豐富的家鴨品種資源,養(yǎng)鴨量和消費(fèi)量均占世界第一。近年來(lái)我國(guó)鴨肉產(chǎn)量逐步上升,但仍然不能完全滿(mǎn)足日益增長(zhǎng)的消費(fèi)需求,養(yǎng)鴨業(yè)看似前景廣闊,但其存在的問(wèn)題也較多,其中育種技術(shù)水平不高、個(gè)體產(chǎn)肉能力不高等問(wèn)題較為突出,極大地阻礙了肉鴨產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展。因此,利用先進(jìn)的育種和分子技術(shù)手段提高動(dòng)物個(gè)體的產(chǎn)肉量顯得尤為必要。 胚胎期是家禽生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)法逾越的重要階段,這一時(shí)期動(dòng)物肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育對(duì)成年家禽的產(chǎn)肉能力影響巨大,通過(guò)促進(jìn)胚胎期骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育的方法,是提高個(gè)體產(chǎn)肉量的最有效的可能方法之一。鑒于禽類(lèi)胚胎期如此重要的作用,本研究選擇了我國(guó)地方家鴨品種中成年體重較大、生長(zhǎng)速度較快的高郵鴨和體重較小、生長(zhǎng)速度較慢的金定鴨為研究素材,來(lái)解析它們?cè)谂咛テ诘南嚓P(guān)生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)及骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)等方面的差異及其原因,并深入研究生肌調(diào)節(jié)因子(MRFs)、鈣蛋白酶3和外源性甲狀腺激素(T3)對(duì)鴨胚胎期骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育的作用,以期能在胚胎期發(fā)掘與鴨個(gè)體產(chǎn)肉量相關(guān)的重要基因,為相關(guān)遺傳改良方法的建立奠定基礎(chǔ)理論知識(shí)。主要的研究結(jié)果如下： 1.利用高郵鴨和金定鴨種蛋進(jìn)行人工孵化,觀察不同時(shí)期的胚胎發(fā)...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
本文部分的符號(hào)說(shuō)明
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 我國(guó)地方家鴨資源豐富
        1.1 高郵鴨品種及其相關(guān)研究的概述
            1.1.1 基本情況
            1.1.2 品種的形成
            1.1.3 體型外貌
            1.1.4 生產(chǎn)性能與特點(diǎn)
            1.1.5 高郵鴨相關(guān)科學(xué)研究
        1.2 金定鴨品種及其相關(guān)研究的概述
            1.2.1 基本情況
            1.2.2 品種的形成
            1.2.3 體型外貌
            1.2.4 生產(chǎn)性能與特點(diǎn)
            1.2.5 金定鴨相關(guān)科學(xué)研究
    2 禽類(lèi)胚胎期對(duì)產(chǎn)肉性能的重要作用
    3 肌肉生長(zhǎng)發(fā)育形成的機(jī)制
        3.1 肌肉的結(jié)構(gòu)
        3.2 肌纖維的分類(lèi)
        3.3 生肌調(diào)節(jié)因子家族(MRFs)
    4 鈣蛋白酶
    5 甲狀腺激素
        5.1 甲狀腺激素的主要生理作用
        5.2 甲狀腺激素對(duì)肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的作用
    6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)及其在基因表達(dá)中的應(yīng)用
        6.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的原理與特點(diǎn)
        6.2 熒光定量PCR的化學(xué)原理
            6.2.1 SYBR Green Ⅰ染料法
            6.2.2 TaqMan探針?lè)?br>        6.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)(一)
第二章 鴨胚胎發(fā)育觀察及圖譜的建立
    1 材料和方法
        1.1 試驗(yàn)素材
        1.2 試驗(yàn)儀器
        1.3 孵化條件
        1.4 胚胎觀察和數(shù)據(jù)采集
        1.5 數(shù)據(jù)處理與分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 胚胎期胚胎重量變化分析
        2.2 胚胎發(fā)育觀察及圖譜的建立
            2.2.1 發(fā)育早期
            2.2.2 發(fā)育后期
    3 討論
    參考文獻(xiàn)(二)
第三章 高郵鴨和金定鴨胚胎期生長(zhǎng)發(fā)育差異比較
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料與孵化方法
        1.2 胚蛋的解剖
        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
            1.3.1 累積生長(zhǎng)
            1.3.2 絕對(duì)生長(zhǎng)
            1.3.3 相對(duì)生長(zhǎng)
            1.3.4 分化生長(zhǎng)
            1.3.5 數(shù)據(jù)差異比較
    2 結(jié)果與分析
        2.1 高郵鴨胚胎期生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)測(cè)定及分析
            2.1.1 高郵鴨不同胚齡生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)測(cè)定
            2.1.2 高郵鴨不同胚齡生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)的變化情況
        2.2 金定鴨胚胎期生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)測(cè)定及分析
            2.2.1 金定鴨不同胚齡生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)測(cè)定
            2.2.2 金定鴨不同胚齡生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)的變化情況
        2.3 高郵鴨和金定鴨重要生長(zhǎng)發(fā)育性能指標(biāo)的比較
    3 討論
    參考文獻(xiàn)(三)
第四章 鴨胚胎期生肌調(diào)節(jié)因子mRNA表達(dá)規(guī)律及其與胸腿肌生長(zhǎng)發(fā)育關(guān)系的研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 試驗(yàn)方法
            1.3.1 總RNA提取和cDNA合成
            1.3.2 引物設(shè)計(jì)、目的片段的克隆
            1.3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立
            1.3.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 四個(gè)基因的Real-time PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
            2.1.1 MyoD基因Real-time PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
            2.1.2 MyoG基因Real-time PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
            2.1.3 Myf6基因Real-time PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
            2.1.4 Myf5基因Real-time PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)、溶解曲線(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
        2.2 胚胎期和出生早期不同鴨品種胸腿肌組織中MyoDl基因mRNA表達(dá)規(guī)律研究
            2.2.1 MyoD1基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期胸肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.2.2 鴨胸肌MyoD1基因mRNA的表達(dá)量與胚重和胸肌重的相關(guān)性分析
            2.2.3 MyoD1基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期腿肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.2.4 鴨腿肌MyoD1基因mRNA表達(dá)量與胚重和腿肌重的相關(guān)性分析
        2.3 胚胎期和出生早期不同鴨品種胸腿肌組織中MyoG基因mRNA表達(dá)規(guī)律研究
            2.3.1 MyoG基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期胸肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.3.2 鴨胸肌MyoG基因mRNA表達(dá)量與胚重和胸肌重的相關(guān)性分析
            2.3.3 MyoG基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期腿肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.3.4 鴨腿肌MyoG基因mRNA表達(dá)量與胚重和腿肌重的相關(guān)性分析
        2.4 胚胎期和出生早期不同鴨品種胸腿肌組織中Myf6基因mRNA表達(dá)規(guī)律研究
            2.4.1 Myf6基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期胸肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.4.2 鴨胸肌Myf6基因mRNA表達(dá)量與胚重和胸肌重的相關(guān)性分析
            2.4.3 Myf6基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期腿肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.4.4 鴨腿肌Myf6基因mRNA表達(dá)量與胚重和腿肌重的相關(guān)性分析
        2.5 胚胎期和出生早期不同鴨品種胸腿肌組織中Myf5基因mRNA表達(dá)規(guī)律研究
            2.5.1 Myf5基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期胸肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.5.2 鴨胸肌Myf5基因mRNA表達(dá)量與胚重和胸肌重的相關(guān)性分析
            2.5.3 Myf5基因在高郵鴨和金定鴨胚胎期和出生早期腿肌組織中的mRNA表達(dá)規(guī)律
            2.5.4 鴨腿肌Myf5基因mRNA表達(dá)量與胚重和腿肌重的相關(guān)性分析
    3 討論
        3.1 MyoD1基因?qū)喤咛テ诩俺錾缙谛赝燃∩L(zhǎng)發(fā)育的作用
        3.2 MyoG基因?qū)喤咛テ诩俺錾缙谛赝燃∩L(zhǎng)發(fā)育的作用
        3.3 Myf6基因?qū)喤咛テ诩俺錾缙谛赝燃∩L(zhǎng)發(fā)育的作用
        3.4 Myf5基因?qū)喤咛テ诩俺錾缙谛赝燃∩L(zhǎng)發(fā)育的作用
    參考文獻(xiàn)(四)
第五章 鴨胚骨骼肌成肌細(xì)胞中生肌調(diào)節(jié)因子的mRNA表達(dá)特性分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 試驗(yàn)方法
            1.3.1 成肌細(xì)胞的分離純化
            1.3.2 RNA提取和質(zhì)量檢測(cè)
            1.3.3 cDNA第一鏈的合成
            1.3.4 引物設(shè)計(jì)、目的片段的克隆和標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒制備
            1.3.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
            1.3.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的建立
            1.3.7 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鴨胸肌成肌細(xì)胞中生肌調(diào)節(jié)因子的mRNA表達(dá)規(guī)律
        2.2 鴨腿肌成肌細(xì)胞中生肌調(diào)節(jié)因子的mRNA表達(dá)規(guī)律
    3 討論
    參考文獻(xiàn)(五)
第六章 外源性甲狀腺激素T3對(duì)鴨胚胎生長(zhǎng)發(fā)育及成肌細(xì)胞生肌因子表達(dá)的影響
    1 鴨種蛋內(nèi)注射T3及胚胎生長(zhǎng)發(fā)育性能的測(cè)定
        1.1 材料與方法
            1.1.1 鴨種蛋的準(zhǔn)備
            1.1.2 主要試劑與設(shè)備
            1.1.3 T3試劑配置
            1.1.4 鴨種蛋消毒與錐孔
            1.1.5 蛋內(nèi)注射并封孔
            1.1.6 種蛋孵化
            1.1.7 涼蛋
            1.1.8 鴨生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)測(cè)定
            1.1.9 血清中T3、T4的測(cè)定
            1.1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        1.2 T3對(duì)成肌細(xì)胞中生肌因子mRNA表達(dá)量的影響
            1.2.1 試驗(yàn)素材
            1.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備
            1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)與分離
            1.2.4 T3干擾
            1.2.5 RNA提取
            1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            1.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果
        2.1 種蛋內(nèi)注射T3的鴨胚胎期及出生早期生長(zhǎng)發(fā)育觀測(cè)
        2.2 T3干擾的成肌細(xì)胞中生肌因子mRNA表達(dá)變化規(guī)律
            2.2.1 成肌細(xì)胞中Myf6基因mRNA表達(dá)變化規(guī)律
            2.2.2 成肌細(xì)胞中Myf5基因mRNA表達(dá)量的變化規(guī)律
            2.2.3 成肌細(xì)胞中MyoD1基因mRNA表達(dá)量的變化規(guī)律
    3 討論
        3.1 T3對(duì)鴨胚胎期和出生后早期生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        3.2 T3對(duì)鴨胚胎成肌細(xì)胞生肌因子mRNA表達(dá)的影響
    參考文獻(xiàn)(六)
第七章 鴨骨骼肌早期發(fā)育過(guò)程中CAPN3基因表達(dá)及其與肌纖維性狀的關(guān)系
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 肌纖維性狀測(cè)定
        1.4 總RNA提取和cDNA合成
        1.5 引物設(shè)計(jì)、目的片段標(biāo)準(zhǔn)品的制備
        1.6 熒光實(shí)時(shí)定量PCR
        1.7 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 肌纖維類(lèi)型的鑒定和方法的比較
        2.2 鴨早期發(fā)育過(guò)程中肌纖維的發(fā)育性變化
        2.3 CAPN3基因在不同鴨品種胚胎期和出雛早期胸肌中的表達(dá)
        2.4 CAPN3基因在不同鴨品種胚胎期和出雛早期腿肌中的表達(dá)
    3 討論
        3.1 鴨骨骼肌肌纖維類(lèi)型的鑒別
        3.2 CAPN3基因mRNA表達(dá)與鴨早期發(fā)育中骨骼肌纖維性狀的關(guān)系
    參考文獻(xiàn)(七)
第八章 全文結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    1 全文結(jié)論
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
附錄1 鴨胚胎骨骼標(biāo)本制作方法的建立
附錄2 一種分離純化鴨胚骨骼肌成肌細(xì)胞的方法
附錄3 一種鑒別鴨骨骼肌中肌纖維類(lèi)型的方法
致謝
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本文編號(hào)：3759617