發(fā)布時(shí)間：2023-03-11 08:18

　　大熊貓(Ailuropodamelanoloca)是我國(guó)特有的珍稀大型野生動(dòng)物,屬國(guó)家一級(jí)瀕危保護(hù)動(dòng)物。隨著大熊貓人工圈養(yǎng)的增多,疾病發(fā)生是影響大熊貓繁育重要因素。大熊貓疾病發(fā)生以消化系統(tǒng)疾病為主,其中大腸桿菌是引起腸道感染的主要病原菌。獸醫(yī)臨床主要使用抗菌藥物,尤其是使用β-內(nèi)酰胺類藥物控制大熊貓大腸桿菌病發(fā)生。隨著藥物的廣泛使用或?yàn)E用,耐藥大腸桿菌菌株迅速出現(xiàn),這給野生動(dòng)物感染性疾病的控制帶來(lái)了困難。大腸桿菌除了是重要的病原菌,也是動(dòng)物體內(nèi)的重要共生菌,對(duì)共生菌耐藥性的調(diào)查,有助于了解耐藥菌株的產(chǎn)生和流行趨勢(shì),為控制和減少耐藥的產(chǎn)生具有意義。本研究于2012年7月到2013年7月,從成都大熊貓繁育研究基地,采集大熊貓糞便和環(huán)境樣本,分離鑒定出125株大腸桿菌共生菌,其中糞便源大腸桿菌96株,環(huán)境源大腸桿菌29株。采用藥敏試驗(yàn)紙片擴(kuò)散法,檢測(cè)了菌株對(duì)18種抗菌藥物(8種p-內(nèi)酰胺類藥物和10種非p-內(nèi)酰胺類藥物)的藥物敏感性。結(jié)果顯示,125株大腸桿菌共生菌對(duì)p-內(nèi)酰胺類藥物氨芐西林、頭孢唑林和非β-內(nèi)酰胺類藥物四環(huán)素類、復(fù)方新諾明耐藥較嚴(yán)重(耐藥率范圍30%～75%),菌株對(duì)頭孢西...

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 文獻(xiàn)綜述
        1.1 大熊貓腸道菌群簡(jiǎn)介
        1.2 耐藥大腸桿菌的研究現(xiàn)狀
        1.3 大腸桿菌耐β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥機(jī)制研究
        1.4 大腸桿菌產(chǎn)ESBLs菌株耐藥基因的傳播機(jī)制
        1.5 ESBLs和AmpC酶的檢測(cè)
            1.5.1 產(chǎn)ESBLs酶的表型鑒定方法
            1.5.2 產(chǎn)AmpC酶的表型篩選
        1.6 質(zhì)粒ESBLs和AmpC酶基因的分子生物學(xué)檢測(cè)方法
    2 選題目的及意義
第二部分 試驗(yàn)研究
    第一章 大熊貓糞便及環(huán)境中大腸桿菌耐藥性監(jiān)測(cè)
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 樣本的采集及質(zhì)控菌株
                1.1.2 主要藥物
                1.1.3 培養(yǎng)基
                1.1.4 其他試劑
                1.1.5 主要儀器和設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 大腸桿菌的分離和純化
                1.2.2 大腸桿菌的鑒定
                1.2.3 大腸桿菌菌株的保存
                1.2.4 紙片擴(kuò)散法檢測(cè)菌株的藥物敏感性
                1.2.5 藥敏結(jié)果的判斷
                1.2.6 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 不同樣本大腸桿菌的分離及鑒定結(jié)果
            2.2 96株分離自大熊貓糞便大腸桿菌對(duì)藥物的耐藥情況
                2.2.1 96株分離自大熊貓糞便大腸桿菌對(duì)藥物的耐藥率
                2.2.2 糞便源大腸桿菌對(duì)藥物的多重耐藥
                2.2.3 糞便源菌株對(duì)不同抗菌藥物的交叉耐藥性
            2.3 29株分離自環(huán)境大腸菌對(duì)藥物的耐藥情況
                2.3.1 29株環(huán)境源菌株對(duì)抗菌藥物的耐藥率
                2.3.2 多重耐藥
                2.3.3 環(huán)境源菌株對(duì)不同抗菌藥物的交叉耐藥性
            2.4 不同來(lái)源菌株對(duì)抗菌藥物耐藥性比較
                2.4.1 不同來(lái)源菌株耐藥率比較
                2.4.2 不同來(lái)源菌株的多重耐藥性比較
        3 討論
            3.1 不同樣本大腸桿菌菌株的分離情況
            3.2 糞便源菌株對(duì)不同抗菌藥物的耐藥情況
                3.2.1 96株糞便源大腸桿菌對(duì)不同抗菌藥物的耐藥率
                3.2.2 糞便源大腸桿菌的多重耐藥性分析
                3.2.3 糞便源大腸桿菌的交叉耐藥性
            3.3 環(huán)境源大腸桿菌的耐藥性分析
                3.3.1 29株環(huán)境源大腸桿菌的耐藥性監(jiān)測(cè)
                3.3.2 29株環(huán)境源大腸桿菌的多重耐藥性監(jiān)測(cè)
                3.3.3 環(huán)境源大腸桿菌的交叉耐藥性
        4 小結(jié)
    第二章 大腸桿菌產(chǎn)ESBLs和AmpC酶及其基因型的檢測(cè)
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 菌株
                1.1.2 藥敏紙片
                1.1.3 培養(yǎng)基
                1.1.4 其他試劑
                1.1.5 主要儀器和設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 大腸桿菌產(chǎn)ESBLs的初步篩選
                1.2.2 大腸桿菌AmpC酶的初步篩選
                1.2.3 產(chǎn)ESBLs和AmpC酶菌株質(zhì)粒DNA的提取及電泳檢測(cè)
                1.2.4 大腸桿菌質(zhì)粒ESBLs和AmpC酶的基因型檢測(cè)
                1.2.5 基因測(cè)序
                1.2.6 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 產(chǎn)ESBLs和AmpC酶大腸桿菌的篩選
                2.1.1 糞便源大腸桿菌產(chǎn)ESBLs酶菌株的篩選
                2.1.2 環(huán)境源大腸桿菌產(chǎn)ESBLs酶菌株的篩選
                2.1.3 產(chǎn)AmpC酶大腸桿菌的篩選
            2.2 產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的耐藥性分析
            2.3 ESBLs基因和AmpC酶基因檢測(cè)
                2.3.1 ESBLs基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
                2.3.2 AmpC酶基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
            2.4 基因測(cè)序結(jié)果
        3 討論
            3.1 產(chǎn)ESBLs和AmpC酶大腸桿菌的篩選
            3.2 產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性菌株和陰性菌株的耐藥性比較
            3.3 大腸桿菌ESBLs和AmpC耐藥基因流行情況
第三部分 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3759523