產(chǎn)肉量和肉質(zhì)是豬肉生產(chǎn)中極其重要的經(jīng)濟(jì)性狀。肉質(zhì)方面,脂肪的含量與肉的嫩度、風(fēng)味和多汁性相關(guān),并影響豬的整體胴體質(zhì)量,是生豬生產(chǎn)中影響經(jīng)濟(jì)效益的重要因素。前體脂肪細(xì)胞分化及成熟脂肪細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累程度顯著影響脂肪含量。項(xiàng)目組前期研究成果表明,骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP2)可以顯著促進(jìn)豬前體脂肪細(xì)胞分化,而在此過程中,前體脂肪細(xì)胞中有大量lncRNAs的表達(dá)發(fā)生顯著變化,但它們的具體作用和機(jī)制尚不明確。因此,本研究首先體外分離培養(yǎng)豬前體脂肪細(xì)胞,在細(xì)胞分化過程中添加50ng/ml的BMP2后,利用高通量測(cè)序技術(shù)篩選出受BMP2調(diào)控的差異表達(dá)lncRNA,并通過生物信息學(xué)預(yù)測(cè)及構(gòu)建lncRNA-miRNA-mRNA互作網(wǎng)絡(luò)。隨后分別通過雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)、qRT-PCR、油紅O染色等方法明確候選lncRNA/miRNA/mRNA的相互調(diào)控關(guān)系及其對(duì)前體脂肪細(xì)胞分化、脂質(zhì)生成與沉積的影響,結(jié)果表明:在132個(gè)受BMP2調(diào)控而差異表達(dá)的lncRNA中,有61個(gè)表達(dá)上調(diào),71個(gè)下調(diào)。LncRNA潛在的靶基因GO功能富集在組織發(fā)育、器官形態(tài)發(fā)生和細(xì)胞分化等功能。KEGG通路則富集于mTOR信號(hào)通路、賴...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 脂肪的生成及其影響因素
        1 脂肪的形成及其與肉品質(zhì)的關(guān)系
        2 影響脂肪沉積的因素
            2.1 畜禽品種
            2.2 營(yíng)養(yǎng)水平與管理
            2.3 前體脂肪細(xì)胞分化
    第2章 LncRNA及 miRNA在脂肪形成中的作用
        1 LncRNA的來源和潛在功能
        2 miRNA的來源和潛在功能
        3 ceRNA機(jī)制的產(chǎn)生和研究進(jìn)展
        4 LncRNA在前體脂肪細(xì)胞分化和脂肪形成中的作用
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第1章 BMP2 誘導(dǎo)的豬前體脂肪細(xì)胞差異lncRNA表達(dá)譜的構(gòu)建及分析
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 RNA質(zhì)量檢測(cè)
            2.2 整體測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估
            2.3 LncRNA鑒定
            2.4 差異表達(dá)lncRNA分析與靶基因篩選
            2.5 靶基因的GO分析
            2.6 通路顯著性富集分析
            2.7 LncRNA-miRNA-mRNA互作預(yù)測(cè)分析與篩選
            2.8 差異表達(dá)lncRNA q-PCR驗(yàn)證結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第2章 LncRNA 00046716 對(duì)豬前體脂肪細(xì)胞分化的影響
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果
            2.1 LncRNA 00046716、FASN在豬前體脂肪細(xì)胞分化過程中表達(dá)趨勢(shì)
            2.2 LncRNA 00046716 在豬前體脂肪細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)結(jié)果
            2.4 LncRNA00046716 對(duì)豬前體脂肪細(xì)胞分化關(guān)鍵基因的影響..
            2.5 LncRNA 00046716 對(duì)豬脂肪細(xì)胞甘油三酯積累的影響
            2.6 備選lncRNA-miRNA-mRNA互作網(wǎng)絡(luò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)
            2.7 LncRNA 00046716 可能競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA-149 影響FASN的表達(dá)
            2.8 miRNA-149對(duì)FASN蛋白表達(dá)的影響
            2.9 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證lncRNA00046716-miRNA-149-FASN調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
        3 討論
        4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3758389