發(fā)布時間：2023-03-04 00:00

　　馬立克氏病(Marek’s Disease, MD)是由具有高度傳染性、致瘤性的皰疹病毒科馬立克氏病毒引起的一種細胞結(jié)合性雞淋巴組織增生性免疫抑制性傳染病,對養(yǎng)禽業(yè)危害極大。 雞的主要組織相容性復合體(Major Histocompatibility Complex, MHC)基因是由一組緊密連鎖且高度多態(tài)的基因座組成的,參與體內(nèi)外抗原呈遞的遺傳區(qū)域,在動物的免疫應答、免疫調(diào)控中扮演著重要角色。雞的干擾素-γ (IFN-γ)基因是由感染病毒的細胞釋放的一種細胞因子,干擾其他細胞病毒復制,對于機體的腫瘤發(fā)生、移植排斥反應、免疫調(diào)節(jié)及免疫系統(tǒng)的平衡至關重要,IFN-y基因具有誘導某些腫瘤細胞表達MHC Ⅰ類和MHCⅡ類抗原的作用,可促進此抗原誘導的自身T細胞數(shù)量的增加和CTL對腫瘤細胞的殺傷作用。家禽IFN-γ基因的表達量與其對馬立克氏病的抗性密切相關。MHC基因的不同基因型對MD的抗性不同,主要表現(xiàn)在其對IFN-γ等細胞因子的表達調(diào)控程度的不同等方面。 本文對壽光雞(SG)、濟寧百日雞(JB)、汶上蘆花雞(WL)、SPF白來航雞(SPF)的MHC基因進行了遺傳多樣性分析,根據(jù)位于MHC ...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 馬立克氏病的研究進展
    1.2 MHC的性質(zhì)和功能
        1.2.1 MHC的命名與遺傳學特性
        1.2.2 MHC基因表達產(chǎn)物的分子結(jié)構(gòu)
            1.2.2.1 MHCⅠ類分子結(jié)構(gòu)
            1.2.2.2 MHCⅡ類分子結(jié)構(gòu)
        1.2.3 國內(nèi)外家禽MHC的研究進展
        1.2.4 主要組織相容性復合體與免疫抑制性腫瘤的研究進展
            1.2.4.1 雞主要組織相容性復合體與抗馬立克氏病的相關研究
            1.2.4.2 雞主要組織相容性復合體與抗禽白血病的相關研究
            1.2.4.3 雞主要組織相容性復合體與抗禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥的相關研究
    1.3 γ干擾素的研究進展
        1.3.1 干擾素的命名與分類
        1.3.2 γ干擾素的分子結(jié)構(gòu)與理化特征
        1.3.3 γ干擾素的免疫調(diào)節(jié)
        1.3.4 γ干擾素與MHC之間的聯(lián)系
        1.3.5 禽類γ干擾素的研究進展
    1.4 山東省現(xiàn)有優(yōu)良地方雞品種資源
        1.4.1 濟寧百日雞
        1.4.2 汶上蘆花雞
        1.4.3 壽光雞
    1.5 實時熒光定量PCP技術
        1.5.1 實時熒光定量PCP技術的應用原理
        1.5.2 實時熒光定量PCR技術在動物遺傳育種上的應用
            1.5.2.1 實時熒光定量PCR技術在細胞因子的表達分析
            1.5.2.2 實時熒光定量PCR技術在單核苷酸多態(tài)性及突變的表達分析
            1.5.2.3 實時熒光定量PCR技術在轉(zhuǎn)基因的應用
    1.6 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗動物與病毒
    2.2 試劑與工具酶
    2.3 儀器與設備
    2.4 常用試劑的配制
        2.4.1 配制瓊脂糖凝膠的主要試劑
        2.4.2 配制非變性聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳及銀染的主要試劑
    2.5 試驗方法
        2.5.1 血液基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測
        2.5.2 引物設計與合成
        2.5.3 PCR擴增與檢測
        2.5.4 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳及其銀氨染色
        2.5.5 熒光PCR檢測技術
        2.5.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        2.5.7 等位基因型的劃分
        2.5.8 組織總RNA的提取與質(zhì)量檢測
        2.5.9 RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.5.10 IFN-γ基因、β-actin基因PCR擴增
        2.5.11 熒光定量PCR
3 試驗結(jié)果與分析
    3.1 四種雞群等位基因型判定
        3.1.1 基因組DNA提取結(jié)果
        3.1.2 MHC基因的PCR結(jié)果
        3.1.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果
        3.1.4 測序結(jié)果
        3.1.5 四種雞群遺傳多樣性的微衛(wèi)星標記分析
        3.1.6 四種雞群的等位基因型與抗性分析
    3.2 壽光雞不同基因型IFN-γ表達量的分析
        3.2.1 Total RNA提取結(jié)果
        3.2.2 目的基因、持家基因擴增片段
        3.2.3 目的基因與持家基因的標準曲線、溶解曲線和動力學曲線
        3.2.4 IFN-γ基因在壽光雞肝脾腎組織中mRNA表達結(jié)果
4 討論
    4.1 四種雞群體遺傳多樣性的微衛(wèi)星標記分析
    4.2 四種雞群體的不同基因型的劃分與抗病性的相關性
    4.3 壽光雞不同基因型的抗馬立克氏病比較
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表論文的情況



本文編號：3753353