發(fā)布時(shí)間：2023-03-04 00:00

　　馬立克氏病(Marek’s Disease, MD)是由具有高度傳染性、致瘤性的皰疹病毒科馬立克氏病毒引起的一種細(xì)胞結(jié)合性雞淋巴組織增生性免疫抑制性傳染病,對養(yǎng)禽業(yè)危害極大。 雞的主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility Complex, MHC)基因是由一組緊密連鎖且高度多態(tài)的基因座組成的,參與體內(nèi)外抗原呈遞的遺傳區(qū)域,在動物的免疫應(yīng)答、免疫調(diào)控中扮演著重要角色。雞的干擾素-γ (IFN-γ)基因是由感染病毒的細(xì)胞釋放的一種細(xì)胞因子,干擾其他細(xì)胞病毒復(fù)制,對于機(jī)體的腫瘤發(fā)生、移植排斥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)及免疫系統(tǒng)的平衡至關(guān)重要,IFN-y基因具有誘導(dǎo)某些腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC Ⅰ類和MHCⅡ類抗原的作用,可促進(jìn)此抗原誘導(dǎo)的自身T細(xì)胞數(shù)量的增加和CTL對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。家禽IFN-γ基因的表達(dá)量與其對馬立克氏病的抗性密切相關(guān)。MHC基因的不同基因型對MD的抗性不同,主要表現(xiàn)在其對IFN-γ等細(xì)胞因子的表達(dá)調(diào)控程度的不同等方面。 本文對壽光雞(SG)、濟(jì)寧百日雞(JB)、汶上蘆花雞(WL)、SPF白來航雞(SPF)的MHC基因進(jìn)行了遺傳多樣性分析,根據(jù)位于MHC ...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 馬立克氏病的研究進(jìn)展
    1.2 MHC的性質(zhì)和功能
        1.2.1 MHC的命名與遺傳學(xué)特性
        1.2.2 MHC基因表達(dá)產(chǎn)物的分子結(jié)構(gòu)
            1.2.2.1 MHCⅠ類分子結(jié)構(gòu)
            1.2.2.2 MHCⅡ類分子結(jié)構(gòu)
        1.2.3 國內(nèi)外家禽MHC的研究進(jìn)展
        1.2.4 主要組織相容性復(fù)合體與免疫抑制性腫瘤的研究進(jìn)展
            1.2.4.1 雞主要組織相容性復(fù)合體與抗馬立克氏病的相關(guān)研究
            1.2.4.2 雞主要組織相容性復(fù)合體與抗禽白血病的相關(guān)研究
            1.2.4.3 雞主要組織相容性復(fù)合體與抗禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥的相關(guān)研究
    1.3 γ干擾素的研究進(jìn)展
        1.3.1 干擾素的命名與分類
        1.3.2 γ干擾素的分子結(jié)構(gòu)與理化特征
        1.3.3 γ干擾素的免疫調(diào)節(jié)
        1.3.4 γ干擾素與MHC之間的聯(lián)系
        1.3.5 禽類γ干擾素的研究進(jìn)展
    1.4 山東省現(xiàn)有優(yōu)良地方雞品種資源
        1.4.1 濟(jì)寧百日雞
        1.4.2 汶上蘆花雞
        1.4.3 壽光雞
    1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCP技術(shù)
        1.5.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCP技術(shù)的應(yīng)用原理
        1.5.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在動物遺傳育種上的應(yīng)用
            1.5.2.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在細(xì)胞因子的表達(dá)分析
            1.5.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在單核苷酸多態(tài)性及突變的表達(dá)分析
            1.5.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因的應(yīng)用
    1.6 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)動物與病毒
    2.2 試劑與工具酶
    2.3 儀器與設(shè)備
    2.4 常用試劑的配制
        2.4.1 配制瓊脂糖凝膠的主要試劑
        2.4.2 配制非變性聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳及銀染的主要試劑
    2.5 試驗(yàn)方法
        2.5.1 血液基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測
        2.5.2 引物設(shè)計(jì)與合成
        2.5.3 PCR擴(kuò)增與檢測
        2.5.4 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳及其銀氨染色
        2.5.5 熒光PCR檢測技術(shù)
        2.5.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.5.7 等位基因型的劃分
        2.5.8 組織總RNA的提取與質(zhì)量檢測
        2.5.9 RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.5.10 IFN-γ基因、β-actin基因PCR擴(kuò)增
        2.5.11 熒光定量PCR
3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 四種雞群等位基因型判定
        3.1.1 基因組DNA提取結(jié)果
        3.1.2 MHC基因的PCR結(jié)果
        3.1.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果
        3.1.4 測序結(jié)果
        3.1.5 四種雞群遺傳多樣性的微衛(wèi)星標(biāo)記分析
        3.1.6 四種雞群的等位基因型與抗性分析
    3.2 壽光雞不同基因型IFN-γ表達(dá)量的分析
        3.2.1 Total RNA提取結(jié)果
        3.2.2 目的基因、持家基因擴(kuò)增片段
        3.2.3 目的基因與持家基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線、溶解曲線和動力學(xué)曲線
        3.2.4 IFN-γ基因在壽光雞肝脾腎組織中mRNA表達(dá)結(jié)果
4 討論
    4.1 四種雞群體遺傳多樣性的微衛(wèi)星標(biāo)記分析
    4.2 四種雞群體的不同基因型的劃分與抗病性的相關(guān)性
    4.3 壽光雞不同基因型的抗馬立克氏病比較
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文的情況



本文編號：3753353