為了探究低濃度過氧化氫(H₂O₂)預(yù)處理對(duì)犬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)抗凋亡能力的影響,試驗(yàn)采用流式細(xì)胞術(shù)鑒定干細(xì)胞表面標(biāo)志物,誘導(dǎo)成骨分化、成脂分化鑒定干細(xì)胞分化能力,MTT Assay檢測(cè)H₂O₂處理后細(xì)胞存活能力,Western-blot檢測(cè)凋亡和抗氧化蛋白質(zhì)[抗相關(guān)死亡促進(jìn)因子(Bad)、B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶前體(Pro-caspase3)、剪切后含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cle-caspase3)、超氧化物歧化酶2(SOD2)]表達(dá)水平。結(jié)果表明:所提取細(xì)胞為ADSCs,提取的犬ADSCs具有良好的分化能力,可以分化成脂肪細(xì)胞及骨細(xì)胞。低濃度(1.5,2,2.5μmol/L)H₂O₂可以促進(jìn)或顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖(P<0.05或P<0.01),高濃度(15,25,35μmol/L)H₂O₂可以顯著或極顯著抑制細(xì)胞增殖(P<0.05或P<...

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 樣品來源
    1.2 主要試劑和儀器
2 方法
    2.1 ADSCs的分離培養(yǎng)
    2.2 ADSCs表面標(biāo)志物的鑒定
    2.3 ADSCs多向分化潛能的鑒定
        2.3.1 ADSCs成脂分化及油紅O染色
        2.3.2 ADSCs成骨分化及茜素紅S染色
    2.4 不同濃度H2O2對(duì)犬ADSCs增殖的影響
    2.5 細(xì)胞凋亡的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
    2.6 凋亡相關(guān)蛋白的Western-blot檢測(cè)
    2.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 原代ADSCs的形態(tài)觀察
    3.2 犬ADSCs表面標(biāo)志物的鑒定
    3.3 犬ADSCs多向分化潛能的鑒定
        3.3.1 犬ADSCs成脂分化
        3.3.2 犬ADSCs成骨分化
    3.4 不同濃度H2O2對(duì)犬ADSCs增殖的影響
        3.4.1 高濃度H2O2對(duì)犬ADSCs增殖的影響
        3.4.2 低濃度H2O2對(duì)犬ADSCs增殖的影響
    3.5 低濃度H2O2預(yù)處理對(duì)高濃度H2O2誘導(dǎo)犬ADSCs凋亡的影響
    3.6 低濃度H2O2預(yù)處理對(duì) ADSCs 凋亡蛋白及抗氧化相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論



本文編號(hào)：3750159