本研究旨在分離犬腺病毒(CAV)的北京地區(qū)流行株,采集北京地區(qū)某寵物醫(yī)院2～4月齡發(fā)生咳嗽等呼吸道癥狀犬的鼻咽拭子,經(jīng)膠體金和PCR檢測,初篩為犬腺病毒陽性。經(jīng)過處理后,將其處理液接種于MDCK細(xì)胞,進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng),出現(xiàn)變圓、脫落、葡萄串樣等特征性細(xì)胞病變。通過形態(tài)學(xué)觀察、PCR鑒定及動物回歸試驗等方法對其進(jìn)行鑒定。PCR擴(kuò)增片段測序結(jié)果表明,該分離株為犬腺病毒Ⅱ型,遂將其命名為CAV-BJ02(GenBank:MN744708)株。用Reed-Muench法測得CAV-BJ02株的TCID₅₀為10^6.7·(100μL)^-1。電鏡下可清晰地觀察到呈正六邊形的二十面體、直徑在86 nm左右的犬腺病毒顆粒。遺傳進(jìn)化分析結(jié)果表明,本株病毒為CAV-Ⅱ型。動物回歸試驗結(jié)果表明,CAV-BJ02株可引起犬發(fā)熱等輕微臨床癥狀,以口鼻分泌物為主要排毒方式,排毒期為5～6 d,不導(dǎo)致犬死亡。上述研究結(jié)果為深入了解北京地區(qū)CAV的流行情況,為犬腺病毒病的診斷、防治及后續(xù)相關(guān)研究奠定了理論基礎(chǔ)。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及主要試劑
    1.2 樣本的采集及處理
    1.3 病毒的分離、傳代及滴度測定
    1.4 病毒的PCR鑒定
    1.5 病毒的電鏡觀察
    1.6 遺傳演化分析
    1.7 動物回歸試驗
2 結(jié) 果
    2.1 病毒分離培養(yǎng)
    2.2 PCR鑒定
    2.3 電鏡觀察
    2.4 遺傳進(jìn)化分析
    2.5 動物回歸試驗
        2.5.1 臨床癥狀
        2.5.2 排毒情況觀察
3 討 論
4 結(jié) 論



本文編號：3747379