本文旨在研究不同抗凍劑(甘油和乙二醇)對絨山羊精子冷凍過程中HSP70和HSP90表達與分布的影響。采集6只年齡相同、體況良好絨山羊的精液,混合后加入到含不同抗凍劑的稀釋液中進行冷凍,解凍后檢測了不同冷凍保護劑對精子的冷凍保存效果、HSP70和HSP90表達與分布。主要結果如下所示:1.比較了不同濃度的甘油和乙二醇對內蒙古絨山羊精液冷凍的效果。在內蒙古絨山羊精液冷凍稀釋液中添加5%甘油,冷凍-解凍后精子活力為61.72%,顯著高于3%乙二醇組和5%乙二醇組(分別為49.71、42.6%,P<0.05);5%甘油組的精子頂體完整率、質膜完整率(分別為60.14%、63.09%)顯著高于3%乙二醇組(分別為43.26%、41.84%,P<0.05)和 5%乙二醇組(分別為 36.7%、31.96%,P<0.05);5%甘油組的精子DNA完整率為95.7%,與3%乙二醇組(95.37%,P>0.05)和5%乙二醇組(93.08%,P>0.05)之間差異不顯著。因此,在稀釋液中添加乙二醇作為精子抗凍劑,其冷凍效果并不優(yōu)于甘油。說明5%甘油作為精子抗凍劑有較好的保護...

【文章頁數】：54 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 精子冷凍保存原理
    1.2 冷凍保存對精子造成的影響
        1.2.1 精液冷凍過程中精子超微結構的變化
        1.2.2 冷凍保存對精子蛋白組和表觀遺傳修飾的影響
        1.2.3 冷凍保存對精子運動的影響
    1.3 影響冷凍保存效果的因素
        1.3.1 抗凍劑
        1.3.2 抗氧化劑
        1.3.3 抗凍蛋白
    1.4 冷凍過程中與精子活力相關的蛋白質
        1.4.1 熱休克蛋白70
        1.4.2 熱休克蛋白90
    1.5 研究目的與意義
2 研究一 不同濃度抗凍劑對絨山羊精子冷凍保存效果的影響
    2.1 精液采集
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
    2.3 稀釋液配置
    2.4 精液處理與冷凍
    2.5 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子質量評定
        2.5.1 精子活力
        2.5.2 精子頂體完整性
        2.5.3 精子質膜完整性
        2.5.4 精子DNA完整性
    2.6 統(tǒng)計分析
    2.7 結果與分析
        2.7.1 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子活力與運動參數的影響
        2.7.2 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子頂體、質膜和DNA完整性的影響
    2.8 討論
    2.9 小結
3 研究二 不同抗凍劑對絨山羊精子冷凍過程中熱休克蛋白70表達與分布的影響
    3.1 精液采集
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
    3.3 稀釋液配置
    3.4 精液處理與冷凍
    3.5 精子中熱休克蛋白70的檢測
    3.6 免疫熒光試驗
    3.7 精子ATP含量檢測
    3.8 結果
        3.8.1 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子中熱休克蛋白70表達的影響
        3.8.2 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子中熱休克蛋白70分布的影響
    3.9 討論
    3.10 小結
4 研究三 不同抗凍劑對絨山羊精子冷凍過程中熱休克蛋白90表達與分布的影響
    4.1 精液采集
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
    4.3 稀釋液配置
    4.4 精液處理與冷凍
    4.5 精子中熱休克蛋白90的檢測
    4.6 免疫熒光試驗
    4.7 結果
        4.7.1 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子中熱休克蛋白90表達的影響
        4.7.2 不同抗凍劑對冷凍-解凍后絨山羊精子中熱休克蛋白90分布的影響
    4.8 討論
    4.9 小結
5 結論
致謝
參考文獻
作者簡介



本文編號：3744219