試驗旨在查明貴州某竹鼠養(yǎng)殖場竹鼠死亡原因。通過細菌分離鑒定、形態(tài)學(xué)觀察、生理生化特性定、16S r DNA基因序列分析及系統(tǒng)進化樹構(gòu)建等方法對分離菌種屬進行確定,紙片擴散法進行藥敏試驗,PCR方法檢測耐藥基因,人工感染小鼠試驗探究分離菌的致病性和PCR檢測毒力基因。結(jié)果顯示:經(jīng)革蘭氏染色鏡檢分離菌為革蘭陰性短桿菌,其16S r DNA基因序列經(jīng)測序及BLAST比對,顯示其與大腸埃希氏菌序列相似度達98. 2%—100%。在系統(tǒng)發(fā)育樹上與大腸桿菌聚為一枝。結(jié)合生理生化鑒定結(jié)果確定分離菌為大腸埃希氏菌。藥敏試驗結(jié)果顯示,分離菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢氨芐等藥物敏感、對四環(huán)素、多西環(huán)素、青霉素等藥物表現(xiàn)耐藥,4種耐藥基因檢測結(jié)果顯示Intl1 (146 bp)、tet A(831 bp) 2種耐藥基因,與藥敏表型相符。人工感染試驗結(jié)果顯示,該菌對小鼠有致病性。8種毒力基因檢測分離菌攜帶pap A(761 bp)、Uid A(264 bp)、afa(251 bp) 3種毒力因子。上述結(jié)果表明本實驗分離到一株對四環(huán)素類耐藥的竹鼠源大腸埃希氏菌,為該竹鼠養(yǎng)殖場的竹鼠疾病防治與合理用藥提供了科學(xué)依...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 送檢材料
    1.2 試驗材料
    1.3 細菌分離培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察
    1.4 細菌生化鑒定
    1.5 細菌16S rDNA基因檢測及序列分析
    1.6 細菌藥敏實驗和耐藥基因檢測
        1.6.1 細菌藥敏實驗
        1.6.2 細菌耐藥基因檢測
    1.7 細菌人工感染試驗與毒力基因檢測
        1.7.1 細菌人工動物感染試驗
        1.7.2 細菌毒力基因檢測
2 結(jié)果
    2.1 細菌分離培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
    2.2 生化鑒定結(jié)果
    2.3 細菌16S rDNA基因檢測及序列分析結(jié)果
    2.4 細菌藥敏實驗結(jié)果
    2.5 細菌耐藥基因檢測結(jié)果
    2.6 細菌人工感染試驗結(jié)果
    2.7 細菌毒力基因 PCR檢測結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：3743106