目前利用性控精液進(jìn)行人工授精和生產(chǎn)性控胚胎,是比較有效的家畜性別控制方法。生產(chǎn)性控凍精應(yīng)用最廣泛的方法是利用改進(jìn)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行精子分離。本研究以荷斯坦牛性控精液生產(chǎn)技術(shù)流程為基礎(chǔ),根據(jù)大連黑牛精液特點,通過調(diào)整生產(chǎn)過程中的精子分離技術(shù)參數(shù),建立大連黑牛性控冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)流程。 實驗結(jié)果：利用流式細(xì)胞儀分離大連黑牛精液,在保證一定分離速度的同時,X/Y精子純度指標(biāo)可以達(dá)到89%以上(89%-91%)；通過調(diào)整冷凍稀釋液中甘油濃度,明顯提高了大連黑牛性控冷凍精液解凍后精子活力；在冷凍稀釋液中添加抗氧化劑VE和CAT,提高了大連黑牛性控冷凍精液解凍后精子活力和存活時間；使用分離后的精液進(jìn)行人工授精,受胎率為58.3%(235/403),公犢比例為93.2%(219/235)。 實驗結(jié)論：本研究以荷斯坦牛性控冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)為基礎(chǔ),通過調(diào)整精子分離技術(shù)參數(shù)和精液冷凍方法,建立了大連黑牛精子分離和性控凍精生產(chǎn)技術(shù)流程,并成功進(jìn)行小規(guī)模產(chǎn)業(yè)化示范應(yīng)用。證明利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行大連黑牛性控冷凍精液生產(chǎn)的可行性。

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 哺乳動物精子分離技術(shù)
    1.2 流式細(xì)胞儀分離X/Y精子的原理
    1.3 流式細(xì)胞儀分離精子的應(yīng)用與存在問題
    1.4 冷凍、解凍對精子細(xì)胞的損傷作用
    1.5 精液冷凍中防凍劑的應(yīng)用
    1.6 精液冷凍中抗氧化劑的應(yīng)用
    1.7 牛性控冷凍精液的人工授精技術(shù)
    1.8 大連黑牛
    1.9 研究目的與意義
第二章 實驗材料
    2.1 儀器設(shè)備
    2.2 藥品和試劑
    2.3 溶液配制
    2.4 采精
    2.5 原精運輸與保存
第三章 精子分離與冷凍
    3.1 精子染色
    3.2 精子分離
    3.3 原精活力對分離效果的影響
    3.4 精子平衡與冷凍
    3.5 不同甘油濃度的冷凍稀釋液對冷凍效果的影響
    3.6 冷凍稀釋液中添加抗氧化劑對冷凍效果的影響
第四章 性控凍精指標(biāo)檢測與人工授精
    4.1 活力檢測
    4.2 存活時間檢測
    4.3 頂體完整率測
    4.4 分離精子準(zhǔn)確率檢測
    4.5 人工授精
    4.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
第五章 試驗結(jié)果與討論
    5.1 試驗結(jié)果
    5.2 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3740094