以ATDC5細(xì)胞為研究對象,分別添加Dhh重組蛋白或轉(zhuǎn)染Dhh干擾片段,應(yīng)用MTS法、流式細(xì)胞術(shù)及熒光定量PCR等方法,對Dhh在ATDC5細(xì)胞增殖與分化中的作用進(jìn)行研究。結(jié)果顯示,Dhh高表達(dá)于ATDC5細(xì)胞中,添加rDhh可顯著增強ATDC5細(xì)胞的增殖活性,降低G1期細(xì)胞百分比,提高S期細(xì)胞數(shù)量。通過熒光定量PCR檢測細(xì)胞周期蛋白D1(Cyclin D1,Ccnd1)、Ccnd2、Ccnd3和Ccne1以及細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2(Cyclin-dependent kinase 2,Cdk2)、Cdk4和Cdk6表達(dá)的變化。結(jié)果顯示,添加rDhh可顯著提高Ccnd1、Ccnd2、Ccnd3和Ccne1的表達(dá),同時Cdk2、Cdk4和Cdk6的表達(dá)也顯著增加。添加rDhh可顯著提高肥大軟骨細(xì)胞標(biāo)志分子Col X和Runx2 mRNA的表達(dá),而轉(zhuǎn)染Dhh siRNA后可降低Col X和Runx2 mRNA的表達(dá)。以上結(jié)果說明,Dhh對ATDC5細(xì)胞的增殖和分化過程起到促進(jìn)作用。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 ATDC5細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 引物設(shè)計與合成
    1.3 PCR擴增
    1.4 MTS細(xì)胞增殖檢測
    1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測
    1.6 siRNA的合成及轉(zhuǎn)染
    1.7 熒光定量PCR
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Dhh在ATDC5細(xì)胞中的表達(dá)
    2.2 Dhh對ATDC5細(xì)胞增殖的影響
    2.3 Dhh對ATDC5細(xì)胞增殖周期的影響
    2.4 Dhh對ATDC5細(xì)胞細(xì)胞周期蛋白及細(xì)胞周期蛋白激酶表達(dá)的影響
    2.5 Dhh對ATDC5細(xì)胞分化的影響
3 討論



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