產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)是動物和人類重要的細(xì)菌病原體�？梢酝ㄟ^產(chǎn)生各種外毒素引起人類食物中毒,也能使雞致病形成壞死性腸炎(NE)。為了調(diào)查泰安市部分養(yǎng)雞場及零售雞產(chǎn)品中產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行特征,本研究從泰安市6個(gè)不同養(yǎng)雞場采集疑似壞死性腸炎樣品以及兩批淘汰蛋雞樣品,同時(shí)在泰安市禽產(chǎn)品交易市場采集零售雞產(chǎn)品樣品。通過選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離,利用PCR方法鑒定分離菌株的主要毒素基因。藥物敏感紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer氏法)用于分離菌株的耐藥性研究。使用多位點(diǎn)序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)的方法,對部分分離菌株進(jìn)行分型分析。在采集的420份樣品中,共分離出209株產(chǎn)氣莢膜梭菌,陽性率30.7%。其中包括零售雞產(chǎn)品分離得到153株;疑似壞死性腸炎樣品25株;淘汰雞31株。PCR結(jié)果顯示:所有的分離株均為A型產(chǎn)氣莢膜梭菌,并且β₂毒素基因檢出率為11.5%,比相關(guān)報(bào)道的檢出率低。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示:菌株對慶大霉素的耐藥率最高,達(dá)到87%;其次是桿菌肽,達(dá)到73%;林可霉素耐藥率...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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符號說明
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌簡述
    1.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌病流行情況
    1.3 產(chǎn)氣莢膜梭菌病的致病機(jī)制
    1.4 多位點(diǎn)序列分型
    1.5 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 樣品采集
        2.1.3 主要培養(yǎng)基
        2.1.4 主要試劑及溶液配制
        2.1.5 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 樣品采集
        2.2.2 細(xì)菌的分離及純化
        2.2.3 菌種保存
        2.2.4 細(xì)菌的形態(tài)及生化鑒定
        2.2.5 細(xì)菌的DNA模板提取
        2.2.6 血清型鑒定
        2.2.7 毒素基因檢測
        2.2.8 藥敏試驗(yàn)
        2.2.9 耐藥基因檢測
        2.2.10 多位點(diǎn)序列分型(MLST)
3 結(jié)果
    3.1 菌株分離結(jié)果
    3.2 零售雞產(chǎn)品陽性率
    3.3 選擇培養(yǎng)基細(xì)菌菌落形態(tài)
    3.4 鏡檢結(jié)果
    3.5 PCR鑒定結(jié)果
        3.5.1 血清型鑒定
        3.5.2 β2 毒素基因的檢測
    3.6 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
        3.6.1 耐藥性結(jié)果
        3.6.2 耐藥基因檢測結(jié)果
        3.6.3 多重耐藥性結(jié)果
    3.7 多位點(diǎn)序列分型(MLST)
        3.7.1 管家基因擴(kuò)增
        3.7.2 MLST分析
        3.7.3 MLST與耐藥性
4 分析與討論
    4.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌分離狀況分析
    4.2 毒素基因檢測及耐藥性
    4.3 多位點(diǎn)序列分型(MLST)
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3739242