發(fā)布時間：2023-01-12 11:19

　　中國是世界上綿羊種類最多的國家,隨著全國人口的不斷增長和生產科學的進步,人們對于綿羊肉食品的需求越來越大。但日益嚴重的病害和不斷惡化的自然條件給我綿羊養(yǎng)殖業(yè)造成了重大經濟損失。熱休克蛋白家族（HSPs）是生物體內的重要抗感染和抗逆基因,HSP60作為HSPs中一個最為保守的大家族,廣泛存在于各類生物中,積極參與著機體的應激免疫反應且發(fā)揮重要作用,對綿羊HSP60的深入研究有助于我國綿羊養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。鑒于此,本試驗以綿羊HSP60基因為對象,通過Western Blotting和實時熒光定量PCR分別檢測HSP60在綿羊不同組織蛋白和基因水平的表達情況,利用免疫組化對HSP60蛋白在不同組織進行定位分析,以2-3月齡綿羊胎兒心肌細胞為對象,構建HSP60過表達載體pIRES2-EGFP-HSP60,合成靶向SiRNA沉默HSP60,進行HSP60基因功能驗證。研究結果如下:研究發(fā)現（1）通過基因和蛋白兩個層面的研究,發(fā)現綿羊各組織器官中HSP60表達存在差異;心臟中HSP60基因和蛋白表達量均明顯高于其他組織,推測HSP60對維持心臟的正常功能有重要作用。（2）成功構建HSP60過表... 

【文章頁數】：59 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 熱休克蛋白研究進展
        1.1 熱休克蛋白家族
        1.2 小分子熱休克蛋白
        1.3 熱休克蛋白40
        1.4 熱休克蛋白60
        1.5 熱休克蛋白70
        1.6 熱休克蛋白90
        1.7 熱休克蛋白110
    第二章 綿羊主要功能基因的研究進展
        2.1 影響綿羊產肉性狀的功能基因
        2.2 影響綿羊繁殖性狀的功能基因
        2.3 影響綿羊泌乳性狀的功能基因
        2.4 影響綿羊產毛或產絨的功能基因
    第三章 RNA干擾技術研究進展
        3.1 RNA干擾發(fā)展背景
        3.2 RNA干擾技術原理
        3.3 RNA干擾的應用
第二篇 研究內容
    第一章 綿羊HSP60基因在不同組織的定位表達
        1.1 材料與方法
        1.2 結果與分析
        1.3 討論
        1.4 小結
    第二章 HSP60過表達載體的構建及其功能驗
        2.1 材料與方法
        2.2 結果
        2.3 討論
        2.4 小結
    第三章 SiRNA介導的HSP60基因敲低
        3.1 材料與方法
        3.2 結果
        3.3 討論
        3.4 小結
結論
參考文獻
附錄A
附錄B
附錄C
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]熱休克蛋白70和骨橋蛋白在甲狀腺癌中的表達及臨床意義[J]. 黃卓雅,胡琛,易智君,張耀忠,廖鵬娟,鐘曉華,趙文麗.  診斷病理學雜志. 2017(09)
[2]miRNA-1 HSP70與急性心肌梗死相關性研究[J]. 徐好杰,蔣有緒.  現代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2017(04)
[3]HSP60口服耐受誘導調節(jié)T細胞Foxp3去甲基化抑制動脈粥樣硬化[J]. 李小林,王博遠,程偉寧,吳純,李大主,朱靜,汪俊軍.  中國免疫學雜志. 2016(05)
[4]牦牛HSP27基因的克隆及其在雌性生殖器官中的表達[J]. 何翃閎,崔燕,潘陽陽,樊江峰,胡威,張譯夫,劉鵬剛,李秦,余四九.  中國農業(yè)科學. 2015(20)
[5]CYP6CM1基因RNA干擾載體的構建及轉基因煙草對煙粉虱抗藥性的影響[J]. 張保龍,胡雪虹,陳天子,楊郁文,常蕾,劉方,王坤波.  江蘇農業(yè)學報. 2012(04)
[6]西農莎能奶山羊和布爾山羊GnRH基因多態(tài)性與產羔數的相關分析[J]. 顏泉梅,陳秋菊,崔易虹,朱廣琴,朱春梅,安小鵬,楊莎,王建剛,宋宇軒,曹斌云.  中國獸醫(yī)學報. 2011(11)
[7]雄性生殖中熱休克蛋白作用的研究進展[J]. 朱曄敏,丁之德.  國際生殖健康/計劃生育雜志. 2010(01)
[8]轉EGFP基因豬胎兒神經干細胞的體外分化[J]. 鄭月茂,趙雪,賀小英,權富生,劉軍,張涌.  中國農業(yè)科學. 2009(09)
[9]持續(xù)熱應激狀態(tài)下肉雞心臟和腎臟組織損傷與hsp60 mRNA轉錄[J]. 嚴建燕,鮑恩東,于紀棉,朱琳.  南京農業(yè)大學學報. 2009(03)
[10]HSP60免疫學特性與疾病的關系[J]. 王鵬,井申榮,曾韋錕.  云南大學學報(自然科學版). 2009(S1)

博士論文
[1]大鼠心肌細胞Hsp60/Hsp10的表達及抗熱應激損傷機理研究[D]. 程艷芬.南京農業(yè)大學 2015
[2]急性冷應激大鼠組織和細胞熱休克蛋白90表達及應激性損傷機理研究[D]. 陳玲.南昌大學 2012
[3]持續(xù)熱應激肉雞組織中熱休克蛋白表達規(guī)律與應激性損傷機理研究[D]. 于紀棉.南京農業(yè)大學 2009
[4]應激肉牛幾種組織中HSPs表達的研究[D]. 楊煥民.中國人民解放軍軍需大學 2002

碩士論文
[1]HSP60在大鼠耳蝸發(fā)育和藥物性聾過程中的表達[D]. 田克勇.第四軍醫(yī)大學 2016
[2]胞外HSP60上調心肌TLR2和TLR4受體表達的研究[D]. 郭昕.寧夏醫(yī)科大學 2013
[3]過度訓練大鼠腎組織熱休克蛋白70的表達及山莨菪堿干預的研究[D]. 楊潔.河北醫(yī)科大學 2012
[4]大鼠腎缺血后處理對熱休克蛋白表達的影響及作用[D]. 郭瓊梅.河北醫(yī)科大學 2011



本文編號：3729855