中國(guó)是世界上綿羊種類最多的國(guó)家,隨著全國(guó)人口的不斷增長(zhǎng)和生產(chǎn)科學(xué)的進(jìn)步,人們對(duì)于綿羊肉食品的需求越來越大。但日益嚴(yán)重的病害和不斷惡化的自然條件給我綿羊養(yǎng)殖業(yè)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失。熱休克蛋白家族（HSPs）是生物體內(nèi)的重要抗感染和抗逆基因,HSP60作為HSPs中一個(gè)最為保守的大家族,廣泛存在于各類生物中,積極參與著機(jī)體的應(yīng)激免疫反應(yīng)且發(fā)揮重要作用,對(duì)綿羊HSP60的深入研究有助于我國(guó)綿羊養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。鑒于此,本試驗(yàn)以綿羊HSP60基因?yàn)閷?duì)象,通過Western Blotting和實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測(cè)HSP60在綿羊不同組織蛋白和基因水平的表達(dá)情況,利用免疫組化對(duì)HSP60蛋白在不同組織進(jìn)行定位分析,以2-3月齡綿羊胎兒心肌細(xì)胞為對(duì)象,構(gòu)建HSP60過表達(dá)載體pIRES2-EGFP-HSP60,合成靶向SiRNA沉默HSP60,進(jìn)行HSP60基因功能驗(yàn)證。研究結(jié)果如下:研究發(fā)現(xiàn)（1）通過基因和蛋白兩個(gè)層面的研究,發(fā)現(xiàn)綿羊各組織器官中HSP60表達(dá)存在差異;心臟中HSP60基因和蛋白表達(dá)量均明顯高于其他組織,推測(cè)HSP60對(duì)維持心臟的正常功能有重要作用。（2）成功構(gòu)建HSP60過表... 

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 熱休克蛋白研究進(jìn)展
        1.1 熱休克蛋白家族
        1.2 小分子熱休克蛋白
        1.3 熱休克蛋白40
        1.4 熱休克蛋白60
        1.5 熱休克蛋白70
        1.6 熱休克蛋白90
        1.7 熱休克蛋白110
    第二章 綿羊主要功能基因的研究進(jìn)展
        2.1 影響綿羊產(chǎn)肉性狀的功能基因
        2.2 影響綿羊繁殖性狀的功能基因
        2.3 影響綿羊泌乳性狀的功能基因
        2.4 影響綿羊產(chǎn)毛或產(chǎn)絨的功能基因
    第三章 RNA干擾技術(shù)研究進(jìn)展
        3.1 RNA干擾發(fā)展背景
        3.2 RNA干擾技術(shù)原理
        3.3 RNA干擾的應(yīng)用
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 綿羊HSP60基因在不同組織的定位表達(dá)
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果與分析
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 HSP60過表達(dá)載體的構(gòu)建及其功能驗(yàn)
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 SiRNA介導(dǎo)的HSP60基因敲低
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄A
附錄B
附錄C
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]HSP60在大鼠耳蝸發(fā)育和藥物性聾過程中的表達(dá)[D]. 田克勇.第四軍醫(yī)大學(xué) 2016
[2]胞外HSP60上調(diào)心肌TLR2和TLR4受體表達(dá)的研究[D]. 郭昕.寧夏醫(yī)科大學(xué) 2013
[3]過度訓(xùn)練大鼠腎組織熱休克蛋白70的表達(dá)及山莨菪堿干預(yù)的研究[D]. 楊潔.河北醫(yī)科大學(xué) 2012
[4]大鼠腎缺血后處理對(duì)熱休克蛋白表達(dá)的影響及作用[D]. 郭瓊梅.河北醫(yī)科大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3729855